亭扎肝素药理与临床应用概述

亭扎肝素钠（tinzaparin sodium）是最新的低分子肝素,2000年7月得到FDA批准,联合使用华法林时,用于治疗伴有或没有肺栓塞（PE）症状的急性深静脉血栓形成（DVT）症状。正如其他低分子肝素一样,

凝血酶抑制剂亭扎肝素对肺癌血管生成的抑制作用及分子机制研究

目的 探讨凝血酶抑制剂亭扎肝素对肺癌血管生成的抑制作用及分子机制。方法 使用不同浓度(10、20、50、100 U/L)亭扎肝素处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并分组,同时设置对照组(不加亭扎肝素),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell实验分别检测各组细胞活力和细胞迁移情况。通过体外试管形成实验、网络形成试验和主动脉环试验进一步验证亭扎肝素的体外、体内抗血管生成作用,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测HUVEC和HCC827细胞中对照组与20 U/L亭扎肝素组的凝血酶含量和血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)蛋白含量。通过HCC827异种移植物进一步验证亭扎肝素的抗肿瘤和抗血管生成作用,检测对照组与20 U/L亭扎肝素组的肿瘤质量、肿瘤体积。采用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki-67、CD31和血管内皮生长因子A(VEGFA)表达情况,并检测肿瘤组织中的凋亡细胞。结果 CCK-8法和Tranwell实验发现,20 U/L亭扎肝素可有效抑制HUVEC的细胞活力和细胞迁移。网络形成试验显示,相较于对照组,20 U/L亭扎肝素可有效抑制HUVEC的管形成,差异有统计学意义(P<0.05)。主动脉环测定结果显示,相较于对照组,20 U/L亭扎肝素减少了血管生成,抑制了CAM模型中的新血管形成,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot检测结果显示,HUVEC和HCC827细胞中,20 U/L亭扎肝素组的凝血酶含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);HCC827细胞中,20 U/L亭扎肝素组的VEGF、p-Akt和Akt蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。HCC827异种移植物验证结果显示,20 U/L亭扎肝素组的肿瘤质量、肿瘤体积均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,20 U/L亭扎肝素可抑制肿瘤增殖,促进肿瘤细胞凋亡,并抑制血管生成。结论 亭扎肝素可降低凝血酶的表达,抑制细胞增殖和血管生成,促进肺癌细胞凋亡,其抗血管生成作用与Akt及其下游信号通路的失活有关。

低分子量肝素核磁共振鉴别方法的研究

目的:建立核磁共振一维碳谱定性鉴别低分子肝素类型的方法。方法:一维13C-NMR实验在装配5 mm BBO探头的Bruker Ascend-500核磁共振谱仪上采集。采样时间1.1s;弛豫时间1s;测量温度40℃;谱宽δ(ppm)236。结果:比较不同类型低分子量肝素标准品的碳谱精细结构信息发现,不同类型的低分子量肝素都有其特征的碳谱信号,因此可以通过碳谱特征信号对低分子量肝素进行区分。结论:核磁共振一维碳谱定性鉴别低分子肝素的方法专属性强,简单方便,是鉴别低分子量肝素较好的方法。