天花粉蛋白的盐析工艺和亲和双水相分离工艺

近年,随着天花粉蛋白(TCS)在抗癌细胞和HIV病毒方面的临床性研究进展,天花粉蛋白生产工艺也需在保证效益的前提下精细化。本实验利用硫酸铵分级沉淀、硫酸铵粗提后亲和双水相进一步纯化,得到精制的天花粉蛋白。并对提取工艺进行了优化,最后利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对其纯度进行了鉴定以及相对分子质量的测定,并对比了盐析法和亲和双水相分离法,研究结果表明:硫酸铵沉淀法最佳分离条件为固液比为1∶12、浸泡时间为24h、pH在5左右,最终得率0.8mg/g;亲和萃取最佳条件:染料CibacronBlue F3GA-吐温80在成相吐温80中的含量8%,成相吐温80的占双水相含量为4.0%,(NH4)2SO4的含量2.0mol/L,充分混合的时间9h,反萃取氯化钠的含量为0.5mol/L,反萃取的时间为8h,得率0.6mg/g,但凝胶电泳显示其纯度较高。

番木瓜蛋白酶研究与应用综述

木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶,广泛存在于番木瓜的茎叶和果实中。本文主要对木瓜蛋白酶的组成及结构、特性、制备以及在食品、医药、工业中的用途进行了综述。由于木瓜蛋白酶的产率、活性及应用性与其分离方法相关,提出今后需深入进行木瓜蛋白酶的亲和双水相萃取等新型分离方法的研究。

木瓜蛋白酶的分离方法及其应用进展

对亲和层析法、超滤膜分离法、沉淀分离法、溶剂萃取法、双水相萃取法等分离提取木瓜蛋白酶的方法进行了评述;综述了木瓜蛋白酶在食品、化工、纺织、医药等行业的应用进展。木瓜蛋白酶的产率、活性及应用性与其分离方法相关,指出今后需深入进行木瓜蛋白酶的亲和双水相萃取等新型分离方法的研究。