-
题名C19orf18蛋白的表达与纯化及多克隆抗体制备
- 1
-
-
作者
童霄霞
杨远勤
陈勉
王怀远
胡海军
章康健
-
机构
浙江理工大学
中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所
四川辉阳生命工程股份有限公司
-
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期176-182,共7页
-
基金
四川科技项目(2013ZZ0004)
四川辉阳生命工程股份有限公司研究项目(Y363S21763)
-
文摘
旨在得到较高浓度和纯度的C19orf18蛋白,再将得到的目的蛋白用于制备其特异性的多克隆抗体。利用PCR技术扩增出C19orf18基因的胞内段和胞外段,中间用柔性肽连接,再将目的片段克隆到p ET28a(+)与p ET32a(+)载体上,通过诱导表达少量的目的蛋白,筛选出表达量较高的载体,再用筛选得到的表达量较高的载体大量表达目的蛋白,通过镍柱纯化得到较纯的C19orf18蛋白。用得到的蛋白免疫新西兰白兔,得到的抗血清先经过Protein A纯化,再进行抗原亲和纯化得到C19orf18蛋白多克隆抗体。结果显示,载体p ET28a-C19orf18蛋白表达量高于p ET32a-C19orf18,经过镍柱纯化后得到了较高浓度与纯度的目的蛋白,利用得到的目的蛋白作为抗原成功制备了其特异性的多克隆抗体。在原核细胞中成功表达了C19orf18重组蛋白,并得到了其特异性多克隆抗体,所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、蛋白免疫印迹实验。
-
关键词
C19orf18蛋白
原核表达
抗原亲和纯化
-
Keywords
C19off18 protein
prokaryotic expression
antigen affinity purification
-
分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
-
-
题名旋毛虫单克隆抗体特性鉴定
- 2
-
-
作者
王克领
李春华
马增全
闫玉河
袁文甫
许威光
-
机构
河南省农业科学院畜牧兽医研究所
-
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
1994年第S1期96-99,共4页
-
文摘
用已建立的抗旋毛虫单克隆抗体杂交瘤细胞株(D_4,E_2)所分泌的单克隆抗体(McAb),经纯化后电泳分析,其重链分子量为55KD,轻链分子量为29KD,符合IgG抗体特点。两株单克隆抗体与旋毛虫阳性猪血清所针对的旋毛虫抗原决定簇相同,都不与猪的其它寄生虫发生交叉反应,与抗原的相对亲和力E_2>D_4,单克隆抗体亲和层析纯化抗原的分子量为49KD,经免疫斑点染色证明为糖蛋白。
-
关键词
旋毛虫
杂交瘤细胞株
单克隆抗体
亲和纯化抗原
-
Keywords
Trichinella spiralis
Hybridomas
Monoclonal antibody
Affinitive purified antigen
-
分类号
Q813.2
[生物学—生物工程]
-