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聚苯乙烯肽亲合标签和葡萄球菌蛋白A免疫球蛋白Fc结合区融合蛋白的克隆表达与应用
1
作者
陈佳
陆慧琦
+3 位作者
宋杰
吴海洋
曹玉华
韩焕兴
《检验医学》
CAS
北大核心
2011年第5期330-333,共4页
目的应用生物工程技术克隆、表达聚苯乙烯肽(PS)亲和标签(PStag)和葡萄球菌蛋白A(SPA)免疫球蛋白(IgG)-Fc结合区(ZZ)融合蛋白,在大肠埃希菌BL21中进行高效表达并初步纯化,为优化、提升免疫检测方法奠定基础。方法应用基因合成技术串联SP...
目的应用生物工程技术克隆、表达聚苯乙烯肽(PS)亲和标签(PStag)和葡萄球菌蛋白A(SPA)免疫球蛋白(IgG)-Fc结合区(ZZ)融合蛋白,在大肠埃希菌BL21中进行高效表达并初步纯化,为优化、提升免疫检测方法奠定基础。方法应用基因合成技术串联SPA-ZZ结构域和PStag基因,构建重组表达质粒pPS-SPA,经酶切和测序确认,将阳性重组质粒转化BL21感受态细菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫转印试验(Western blot)鉴定表达和纯化产物;直接酶联免疫吸附试验(ELISA)验证融合表达产物对亲水ELISA板的表面吸附特性和定向结合兔、鼠IgG-Fc区的效果。结果在合成基因的基础上构建的表达载体经序列分析与限制性酶切证实了串联基因的正确克隆,PAGE结果表明可诱导高表达PStag-SPA,纯化产物对亲水ELISA板的吸附能力较高,表达产物对兔与鼠IgG具有定向吸附能力。结论重组表达的PStag-SPA具有对ELISA板的黏着能力和定向结合兔、鼠IgG-Fc的应用潜力,为优化酶免疫检测技术提供了技术支持。
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关键词
聚苯乙烯
肽
亲和
标签
葡萄球菌蛋白A
免疫球蛋白Fc区
酶联免疫吸附试验
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职称材料
链霉亲和素及其亲和系统的蛋白质进化
被引量:
2
2
作者
张檬
罗棉兴
陈国
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期722-729,共8页
链霉亲和素/生物素(Streptavidin/Biotin)体系作为目前已知的最高亲和力作用体系,已在生物学研究中获得广泛应用。本文针对Streptavidin/Biotin和Strep-Tactin/Strep-tag两个相关系统的演化,分别从链霉亲和素蛋白的结构改造、亲和肽标...
链霉亲和素/生物素(Streptavidin/Biotin)体系作为目前已知的最高亲和力作用体系,已在生物学研究中获得广泛应用。本文针对Streptavidin/Biotin和Strep-Tactin/Strep-tag两个相关系统的演化,分别从链霉亲和素蛋白的结构改造、亲和肽标签优化等方面进行了较为详细的归纳。通过对链霉亲和素蛋白各种突变体的优缺点的比较,有助于实际应用中选择合适的Streptavidin突变体。本文通过对链霉亲和素蛋白质进化的综述,可帮助更准确地理解市场上各种链霉亲和素蛋白的功能和用途,并为深入研究链霉亲和素蛋白的进化提供参考。
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关键词
链霉
亲和
素
亲和
系统
亲和肽标签
蛋白质进化
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职称材料
题名
聚苯乙烯肽亲合标签和葡萄球菌蛋白A免疫球蛋白Fc结合区融合蛋白的克隆表达与应用
1
作者
陈佳
陆慧琦
宋杰
吴海洋
曹玉华
韩焕兴
机构
上海第二军医大学附属长征医院实验诊断科
上海艾力斯医药科技有限公司
出处
《检验医学》
CAS
北大核心
2011年第5期330-333,共4页
基金
上海市科委资助项目(074119642)
文摘
目的应用生物工程技术克隆、表达聚苯乙烯肽(PS)亲和标签(PStag)和葡萄球菌蛋白A(SPA)免疫球蛋白(IgG)-Fc结合区(ZZ)融合蛋白,在大肠埃希菌BL21中进行高效表达并初步纯化,为优化、提升免疫检测方法奠定基础。方法应用基因合成技术串联SPA-ZZ结构域和PStag基因,构建重组表达质粒pPS-SPA,经酶切和测序确认,将阳性重组质粒转化BL21感受态细菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫转印试验(Western blot)鉴定表达和纯化产物;直接酶联免疫吸附试验(ELISA)验证融合表达产物对亲水ELISA板的表面吸附特性和定向结合兔、鼠IgG-Fc区的效果。结果在合成基因的基础上构建的表达载体经序列分析与限制性酶切证实了串联基因的正确克隆,PAGE结果表明可诱导高表达PStag-SPA,纯化产物对亲水ELISA板的吸附能力较高,表达产物对兔与鼠IgG具有定向吸附能力。结论重组表达的PStag-SPA具有对ELISA板的黏着能力和定向结合兔、鼠IgG-Fc的应用潜力,为优化酶免疫检测技术提供了技术支持。
关键词
聚苯乙烯
肽
亲和
标签
葡萄球菌蛋白A
免疫球蛋白Fc区
酶联免疫吸附试验
Keywords
Polystyrene peptide tag
Staphylococal protein A
Immunoglobin Fc binding domain
Enzyme-linked immunosorbent assay
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
链霉亲和素及其亲和系统的蛋白质进化
被引量:
2
2
作者
张檬
罗棉兴
陈国
机构
华侨大学生物工程与生物技术系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期722-729,共8页
基金
国家自然科学基金(No.21576108)
福建省新世纪优秀人才项目资助
华侨大学研究生科研创新基金资助项目~~
文摘
链霉亲和素/生物素(Streptavidin/Biotin)体系作为目前已知的最高亲和力作用体系,已在生物学研究中获得广泛应用。本文针对Streptavidin/Biotin和Strep-Tactin/Strep-tag两个相关系统的演化,分别从链霉亲和素蛋白的结构改造、亲和肽标签优化等方面进行了较为详细的归纳。通过对链霉亲和素蛋白各种突变体的优缺点的比较,有助于实际应用中选择合适的Streptavidin突变体。本文通过对链霉亲和素蛋白质进化的综述,可帮助更准确地理解市场上各种链霉亲和素蛋白的功能和用途,并为深入研究链霉亲和素蛋白的进化提供参考。
关键词
链霉
亲和
素
亲和
系统
亲和肽标签
蛋白质进化
Keywords
streptavidin ( SA)
affinity system
affinity peptide tag
protein evolution
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
聚苯乙烯肽亲合标签和葡萄球菌蛋白A免疫球蛋白Fc结合区融合蛋白的克隆表达与应用
陈佳
陆慧琦
宋杰
吴海洋
曹玉华
韩焕兴
《检验医学》
CAS
北大核心
2011
0
下载PDF
职称材料
2
链霉亲和素及其亲和系统的蛋白质进化
张檬
罗棉兴
陈国
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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