口蹄疫兔化弱毒疫苗ZBatt株与其亲本强毒株生物学特性的比较研究

为研究口蹄疫兔化弱毒疫苗ZBatt株和其亲本强毒株ZBCF222之间的生物学特性差异,测定了ZBatt和ZBCF222病毒复制效率,病毒感染细胞后6种宿主因子mRNA表达水平,比较了病毒对乳鼠和豚鼠致病性差异。结果显示:ZBatt和ZBCF222分别感染PK、IBRS-2细胞均不产生明显CPE,感染BHK-21细胞均可以产生CPE和相似的蚀斑形态,病毒生长曲线无显著差异(P>0.05);ZBCF222感染牛原代肾细胞(BK)可产生CPE,形成明显蚀斑,接种豚鼠可产生致病性,而ZBatt感染BK细胞不产生CPE,对豚鼠无明显致病性;二者在BK细胞上的病毒生长曲线和RNA复制效率呈显著性差异(P<0.05);ZBCF222感染BK细胞后宿主因子表达水平与ZBatt感染差异均不显著(P>0.05)。本研究结果表明,亲本强毒株ZBCF222对天然宿主来源细胞具有强致病力,弱毒疫苗ZBatt则不具有致病力,豚鼠可作为试验动物替代牛用于ZB病毒毒力差异评价。

马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株及其亲本驴强毒株长末端重复序列(LTR)的启动子活性比较

将马传染性贫血病毒驴强毒(donkey adaptedequineinfectiousanemiavirus,D AEIAV)、马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒(donkeyleukocyteattenuatedEIAV,DLAEIAV)及EIAVWyoming株的全长长末端重复序列(LTR)分别克隆到报告基因载体pCAT Basicvector中,获得重组质粒p D A LTR CAT、p DLA LTR CAT及p Wyo LTR CAT。将这3个重组质粒分别体外转染EIAV阴性健康驴的白细胞,比较这三者LTR启动报告基因CAT表达的基础活性和在tat pcDNA3共转染条件下激活活性的差异。结果表明:在驴白细胞中,DLAEIAVLTR启动CAT表达的活性略高于D AEIAVLTR;而与EIAVWyoming株LTR比较,DLAEIAV与D AEIAV二者LTR启动CAT表达的活性都较低。在有共转染重组表达质粒tat pcDNA3条件下,D AEIAV、DLAEIAV及EIAVWyoming株LTR起始CAT表达的活性都得到提高,分别提高了4 8倍、6 0倍和3 2倍。上述结果提示,LTR可能是体现DLAEIAV驴白细胞适应性的因素,不一定是影响其毒力减弱的根本原因。