细粒棘球绦虫亲肌肉抗原重组蛋白诱导小鼠免疫应答的研究

目的探讨细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)亲肌肉抗原重组蛋白诱导ICR小鼠产生的免疫应答及其对Eg原头节攻击感染的保护性作用。方法 36只雄性ICR小鼠随机分为A(重组蛋白免疫组)、B(空质粒蛋白免疫组)和C(PBS对照组)等3组,每组12只。3组小鼠分别经皮下注射重组蛋白(10μg/只)、空质粒蛋白(10μg/只)和PBS(100μl/只),第2和4周同法加强免疫2次。末次免疫后2周,每只小鼠腹腔接种细粒棘球蚴原头节50个进行攻击感染。感染后20周,剖杀小鼠,分离并称重细粒棘球蚴组织,计算囊重减少率。取脾脏,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾脏CD4+T和CD8+T淋巴细胞亚群百分比。脾细胞体外经脾细胞悬液、Eg粗抗原(EgAg)和伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激培养4～5 h后,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测T淋巴细胞增殖情况。结果感染后20周,A组小鼠包囊质量[(0.019±0.036)g]明显低于C组[(0.058±0.057)g](P<0.05),囊重减少率为69.1%;CD4+T和CD8+T细胞亚群百分比分别为(29.7±0.9)%和(9.7±0.8)%,均高于C组[(11.6±1.4)%和(7.8±0.2)%](P<0.01和P<0.05),CD4+/CD8+比值(3.061±0.015)也显著高于C组(1.487±0.106)(P<0.01)。未经刺激时,A组小鼠脾T淋巴细胞增殖水平(0.237±0.009)高于C组(0.159±0.005)(P<0.01);用EgAg和ConA刺激后,A组小鼠脾T淋巴细胞增殖水平[(0.283±0.008)和(0.325±0.025)]均高于C组[(0.203±0.002)和(0.244±0.006)](P<0.01)。结论棘球蚴亲肌肉抗原重组蛋白可诱导免疫小鼠脾脏T淋巴细胞增殖,CD4+T细胞亚群在重组蛋白诱导的小鼠抗Eg原头节攻击感染的保护性免疫机制中起一定作用。