HPLC法同时测定不同栽培年限亳芍中芍药苷和芍药内酯苷的含量

为了探讨栽培年限对亳芍中芍药总苷类成分含量的影响,为亳芍规范化栽培、质量评价提供依据,本文建立同时测定亳芍中芍药苷和芍药内酯苷含量的高效液相色谱检测方法,采用Lanbo Service 4000高效液相色谱仪、Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;以乙腈：0.1%磷酸溶液梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长230 nm;柱温30℃。结果表明,芍药苷和芍药内酯苷色谱峰分离度较好,分别在0.1250~2.5000μg和0.0225~0.4500μg呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9960和0.9994,加样回收率（n=6）分别为100.56%、101.30%。该方法用于安徽亳州地区人工栽培1至7年的亳芍中芍药苷及芍药内酯苷的测定,发现不同年栽培年限亳芍中均含有芍药苷和芍药内酯苷,二者的含量存随年份变化表现出一定差异,其中以3年株龄亳芍中芍药苷含量最高,以2年株龄亳芍中芍药内酯苷含量最多。研究结果对亳芍临床用药有一定参考价值。

亳芍总生物碱提取及抑菌活性的研究

为了探讨亳芍总生物碱提取条件及其抑菌活性,在前期研究基础上,通过单因素和正交实验对亳芍总生物碱的提取条件进行了研究。采用滤纸片法对亳芍总生物碱提取物对大肠杆菌、金色葡萄球菌酵母菌及黑曲霉菌的体外抑菌活性进行初步测定。结果表明,亳芍总生物碱最佳提取条件为:乙醇浓度为60%,提取时间为3 h,提取温度为60℃,料液比为1∶20。此条件下,测得亳芍总生物碱的含量为0.58‰,提取的总生物碱对大肠杆菌、金色葡萄球菌及酵母菌、黑曲霉菌均有抑制作用,但抑菌效果不同,抑菌作用顺序为:金色葡萄球>酵母菌>黑曲霉菌菌>大肠杆菌。

亳芍生物碱提取及含量测定

目的探讨亳芍生物碱提取、定性鉴别及含量测定方法。方法 95%乙醇提取亳芍干粉,总提物回收乙醇后盐酸酸化,二氯甲烷萃取除杂,加氨水中和至弱碱性后氯仿萃取获总生物碱提物,薄层色谱检测,改良碘化铋钾等显色,酸碱滴定法测定总生物碱含量。结果总生物碱提取物经薄层色谱展开后,改良碘化铋钾显色,可检测到4个橙红色斑点;浓硫酸显色,其中2个斑点呈紫红色;甲醛浓硫酸显色,可见4个紫黑色斑点;以浓硝酸及茚三酮显色未见明显色斑。亳芍总生物碱含量约为0.079%。结论亳芍中含有生物碱,其中可能包含乌头碱类生物碱。

不同栽培年限亳芍多糖与微量元素动态积累规律研究

对采自安徽亳州地区人工栽培1~7年亳芍样品,水提醇沉法提取多糖,蒽酮-硫酸法和原子吸收光谱法(FAAS)分别测定样品中多糖及微量元素含量,探讨多糖、微量元素在亳芍中的动态积累规律,为亳芍采收、品质评价与规范化栽培提供依据。结果表明,栽培年限对亳芍多糖和微量元素的积累有显著影响:株龄1~7年的亳芍,多糖的含量分别为(2.06±0.12)%、(3.59±0.17)%、(4.66±0.26)%、(3.14±0.19)%、(2.44±0.03)%、(2.49±0.12)%和(2.32±0.20)%;株龄1~7年的亳芍铜元素、铅元素、铬元素、镁元素、钙元素、钠元素、锌元素和钡元素的平均质量分数分别为(3.28±0.63)、(3.16±0.63)、(1.69±0.09)、(300.17±13.64)、(1476.66±57.49)、(71.88±2.26)、(8.58±0.56)和(369.51±26.68)mg/kg(DW);3种有害微量元素含量未超过5.0 mg/kg(DW)限量指标,均在规定限度范围内。上述结果显示,株龄3年亳芍多糖含量最高,亳芍中含丰富的人体必需微量元素,重金属限量指标整体上是安全的,微量元素的含量与多糖的含量存在相关性。

亳芍药材适宜产区区划研究

采用中药材产地适宜性分析地理信息系(TCMGIS-I),以安徽亳州亳芍种植基地为分析基点,选取温度、海拔、土壤、降水量等影响亳芍生长发育的关键生态因子,对亳芍在中国的生态适宜性及其道地产区安徽省的生态适宜性进行了分析。结果表明:中国亳芍适宜产区面积很大,14个省份均可生长,相似度为90%～100%时亳芍在全国8个省市的适宜区分布面积理论值可达111 410km^2,以山东和河南2个省分布范围最大,面积可达到20000km^2以上,其次是河北、辽宁和江苏等省。相似度为90%～100%时河南省内亳芍的适宜区域集中在永城、虞城和开封等县。

亳州市亳芍种植情况调查分析

为了给大宗药材亳芍的合理种植、生产提供依据,通过到企业基地进行实地考察和走访农户的方式,了解亳州市亳芍的种植现状、繁殖方式、病虫害及田间管理等生产现状,并对调查信息进行整理和分析。结果表明,亳芍的种植存在种质混乱、品种退化、病虫害防治不及时及种植不规范等问题,建议规范亳芍的种质来源和质量标准,进一步加大规模化种植,采取有效的措施防治病虫害,保障亳芍的产量和质量。

碳源及植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响

[目的]研究不同碳源和植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响。[方法]以亳芍根茎为外植体,改变培养基中碳源(蔗糖、果糖、葡糖糖、麦芽糖、可溶性淀粉)和植物生长调节剂种类(6-BA、NAA、2,4-D),考察亳芍愈伤组织增长量和芍药苷积累量。[结果]碳源中,对亳芍愈伤组织的增长量以蔗糖最高,葡糖糖最有利于芍药苷积累;组合使用植物生长调节剂6-BA、NAA和2,4-D比单独使用6-BA更有利于愈伤组织生长和芍药苷积累,但高浓度的2,4-D抑制愈伤组织生长和芍药苷积累。[结论]确定了亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的最佳碳源和植物生长调节剂组合,为葡萄糖30 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L。

亳芍的物流问题与对策分析

亳芍作为一种大宗药材,供应链关系复杂,传统的种植、采收、加工、储存、运输和销售方式均不能适应现代中药材物流的发展要求。文章基于调研中白芍物流存在的问题,从种植与采收的集中化、产地加工和包装的合理化、产地销售和运输的精简化、仓储管理的专业化、交易活动的信息化等方面提出亳芍的物流改进对策。

亳芍内生真菌的分离与鉴定

目的对亳芍内生真菌进行分离鉴定,旨在丰富其内生真菌资源种类。方法利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行亳芍内生真菌的分离、尖端菌丝挑取法进行纯化,利用分子生物学方法对其进行鉴定。结果从亳芍中分离出24株内生真菌,初步鉴定为9属13种,分别为Fusarium,Talaromyces,Dactylonectria,Myxocephala,Llyonectria,Penicillium,Alternaria,Rhexocercosporidium,Lopadostoma。主要为镰刀属(占33%)。结论本研究首次从亳芍中分离出内生真菌,呈多样性分布,丰富了芍药内生真菌的种质资源。

亳芍茎尖组织培养的研究

选取亳芍茎尖为试验材料,探究不同培养条件对亳芍组织培养的影响,结果表明:亳芍茎尖在1/2MS+6-BA 1.0 mg/L培养基上培养39 d后,茎尖分化出芽的同时也形成较多的丛生芽;丛生芽在1/2MS+6-BA1.0mg/L培养基上增殖速度最快;来自不同启动培养基上的丛生芽在相同培养基上,接种15 d后观察,不同来源的丛生芽长势不同,30 d后仍存在一定的差异;幼苗在1/2MS+IBA 0.1生根效果最好。

亳芍产芍药苷内生真菌的筛选

[目的]筛选亳芍产芍药苷内生真菌。[方法]采用组织块法从亳芍的根部分离内生真菌;从内生真菌发酵液中抽提芍药苷;然后通过薄层层析、高效液相色谱分析和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对内生真菌所产芍药苷进行鉴定。[结果]从亳芍中分离到22株内生真菌,其中1株为产芍药苷内生真菌,经形态学初步鉴定为细脚棒束孢种(Isaria tenuipes)。[结论]从亳芍中分离到了一株产芍药苷内生真菌R12,可作为芍药苷药物工业化生产的候选菌株。

高效液相色谱法测定亳芍中芍药苷的含量研究

建立亳芍中芍药苷含量的HPLC测定方法。方法:采用岛津VP-ODS C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈(80∶20,V/V),流速为1.0mL/min,检测波长为230nm,柱温为室温。结果:在0.028mg/mL～0.142mg/mL范围内芍药苷的量与其峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.3%。结论:采用HPLC测定亳芍中芍药苷的含量简便、准确、选择性好,可用于亳芍中芍药苷的含量测定。

亳芍高效栽培技术

介绍亳芍的高效栽培要点

亳芍多糖的积累规律及其单糖组成GC-MS分析

目的:揭示亳芍多糖的动态积累规律,为亳芍的科学采收、质量评价及临床用药提供依据。方法:采用蒽酮比色法,以葡萄糖为标准对照品,检测波长628 nm,测定亳芍多糖的含量;亳芍多糖溶于0.5 mol·L^(-1)盐酸甲醇溶液,80℃水浴酸解16 h,氮气吹干后加入吡啶-六甲基二硅胺烷-三甲基氯硅烷(10∶2∶1),80℃水浴反应30 min,氮气吹干,残渣溶于正己烷,采用TG-5熔融石英毛细管柱、1.0 m L·min^(-1)氦气为载气、电子电离离子源(EI)、质量扫描范围为50~350 amu、三甲基硅烷(TMS)柱前衍生化-GC-MS分析法测定单糖组成及其含量。结果:栽培年限影响亳芍多糖积累,1~7年亳芍中多糖的含量分别为(2.7±0.03)%、(3.1±0.23)%、(4.1±0.10)%、(2.2±0.33)%、(1.5±0.23)%、(1.6±0.10)%和(1.6±0.07)%;栽培1~7年亳芍多糖均为葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖组成的杂多糖,但比例随栽培年限不同而变化。结论:从多糖含量角度,栽培3年的亳芍多糖含量最高,品质最佳;栽培年限对亳芍多糖的单糖种类没有影响,但对单糖比例及含量产生明显影响,提示不同株龄的亳芍多糖的结构可能不同。

亳芍内生真菌Alternaria alternate次生代谢产物的研究

目的研究亳芍内生真菌Alternariaalternate的次生代谢产物。方法利用硅胶、SephadexLH-20、反相、中压、高效液相制备等多种色谱法分离化合物,采用波谱方法对化合物进行结构鉴定。结果从内生真菌Alternaria alternate次生代谢产物中分离得到15个化合物,分别鉴定为methyl 4-acetamido-3-hydroxybenzoate(1)、(E)-methyl-5-hydroxy-3-methylpent-2-eno(2)、异苯并呋喃酮A(3)、对羟基苯乙酮(4)、6-hydroxy-isosclerone(5)、talaroflavone(6)、7-hydroxy-2-hydroxymethyl-5-methyl-4H-chromen-4-one (7)、 alternarienonicacid (8)、 7-hydroxy-2,5-dimethy-4H-1-benzopyran-4-one (9)、 5-hydroxy-epialtenuene(10)、交链孢醇(11)、methyl 3-hydroxybenzoate(12)、stemphyperylenol(13)、细格菌素(14)、交链孢烯(15)。结论其中化合物1、3、5～10、12～13为首次从内生真菌Alternaria alternate次生代谢产物中分离得到。

亳芍——白术高效栽培技术模式

安徽省亳州市是我国四大药都之一。中国药典以“亳”字命名的中药材之一的亳芍(又称白芍)种植历史悠久,清代文学家刘开就有诗云“小黄城外芍药花,十里五里生朝霞。花前花后皆人家,家家种花如桑麻。”亳芍目前在亳州市种植面积约30万亩,产量占全国总产量的70%,是亳州市主要的地产药材之一。白术是近20年亳州市发展种植的主要药材之一,因产量高、效益好、好管理。