β_(2)-肾上腺素能受体与神经丝在山羊脾中的分布和共定位研究

为探讨肾上腺素能神经与脾功能联系,用免疫组织化学SP法和免疫荧光双标记法观察β_(2)-肾上腺素能受体(β_(2)-AR)和羊脾神经丝(NFs)在山羊脾中的表达分布特点。结果显示,β_(2)-AR免疫反应阳性产物在山羊脾中分布广泛,白髓、红髓、中央动脉、被膜、小梁、边缘区均有不同程度的着色,白髓中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于红髓(P<0.01),极极显著高于边缘区和被膜(P<0.001);红髓中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于边缘区和被膜(P<0.01);NFs免疫反应阳性产物在山羊脾中红髓、被膜、小梁、小血管、白髓和边缘区均有不同程度的着色,红髓中免疫组化染色阳性相对表达量显著高于白髓(P<0.05),极显著高于边缘区(P<0.01);被膜中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于边缘区和白髓(P<0.01)。共定位研究表明β_(2)-AR和NFs在3个区域存在共定位关系,在平滑肌细胞构成的被膜和小梁中存在,在富含平滑肌细胞的小血管(如中央动脉)中存在,在T、B淋巴细胞丰富区域(如白髓、红髓和边缘区)存在。表明交感-肾上腺素能神经系统对机体免疫具有调控作用。β_(2)-AR和NFs共定位结构证明脾受到交感-肾上腺素能神经的调控,交感神经纤维通过释放神经递质-去甲肾上腺素,作用于脾上的肾上腺素能受体实现功能调控。

β_2-肾上腺素能受体基因多态性与重庆汉族儿童哮喘关联的初步研究

目的 探讨β２－肾上腺素能受体（β２－ＡＲ）第１６、２７位点基因多态性与重庆汉族儿童哮喘的关联。方法 采用ＰＣＲ－限制性核酸内切酶分析法对５０例哮喘儿童缓解期β２－ＡＲ１６、２７位基因多态性进行检测，并与５０例健康儿童及５０例健康成人进行对照。结果①健康人群对照组β２－ＡＲ第１６、２７位点突变纯合子频率为０．１９、０．１２，突变等位基因频率为０．４２、０．３０。②哮喘组儿童β２－ＡＲ第１６、２７位点突变纯合子频率为０．２２、０．０８，突变等位基因频率为０．４９、０．２８，与健康人群对照组比较差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）。③β２－ＡＲ第１６位突变纯合子及突变等位基因频率在重度组为０．６７、０．７８，分别与轻度（０．０７、０．３０）、中度（０．１２、０．５０）哮喘组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论 β２－ＡＲ第１６、２７基因多态性与本研究范围内哮喘儿童发病无关联，但１６位点基因多态性与哮喘病情严重度相关联。

β_2-肾上腺素能受体基因多态性与儿童哮喘的关系

目的从分子水平探讨喘息性支气管炎和小儿支气管哮喘的相关性。方法采用PCR-限制性核酸内切酶法对β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因多态性进行分析,用ELISA法检测血浆总IgE,对217例小儿哮喘,119例喘支和50例健康儿童进行比较分析。结果①三组β2-AR基因16位点多态性分布差异无统计学意义(P>0.05);②β2-AR基因27位点多态性中谷氨酸/谷氨酸基因型频率在哮喘组明显低于对照组(P<0.05),喘支组与对照组比较差异无统计学意义,与哮喘组比较差异也无统计学意义(P>0.05);哮喘组谷氨酸等位基因频率明显低于对照组,谷氨酰胺等位基因频率高于对照组(P<0.05)。③β2-AR基因16位点各基因型间的血清总IgE水平差异无统计学意义(P>0.05);哮喘和喘支组27位点中谷氨酰胺纯合子基因型的总IgE水平明显高于杂合子及谷氨酸纯合子(P<0.05),谷氨酸纯合子和杂合子基因型的IgE水平差异无统计学意义。结论在β2-AR基因27位点喘息性支气管炎与支气管哮喘有相关性,尤其是具有谷氨酰胺/谷氨酰胺基因型且血浆总IgE增高的喘支与哮喘的关系更为密切。

糖尿病大鼠胃肠功能紊乱时β_2-肾上腺素能受体与5-羟色胺受体表达的变化

目的 探讨糖尿病胃肠功能紊乱大鼠胃肠道自主神经病变的靶位。 方法 应用四氧嘧啶 糖尿病大鼠模型 ,对其胃肠道多个部位的 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)与 5 羟色胺受体 (5 HTR)的数量进行免疫组化检测。 结果 糖尿病大鼠胃窦与结肠的 5 HTR显著增多 ;糖尿病大鼠黏膜内分泌细胞的 β2 AR在肠道均有减少。 结论 胃肠道的 β2 AR与 5 HTR的数量在糖尿病胃肠功能紊乱时发生了改变 ,这种改变很可能是糖尿病胃肠功能紊乱的发病基础。

猪β_2-肾上腺素能受体基因的克隆与鉴定

β2 肾上腺素能受体 (β2 adrenergicreceptor ,β2 AR)是 β AR的一种亚型。本研究根据猪的 β2 ARcDNA序列设计了 1对引物 ,以肝脏基因组DNA为模板 ,经PCR获取了一约 1 3kb目的基因片段。将该片段克隆入 pMD18 T载体 ,构建猪 β2 AR基因重组质粒 pMDAR。经PCR反应、酶切鉴定和序列分析证实 β2 AR基因已成功克隆。为进一步研究β2 AR的功能、调控 β2 AR和研制 β2 AR型基因工程疫苗奠定了基础。

上海市哮喘儿童与β_2-肾上腺素能受体基因多态性的关系

目的探讨β2-肾上腺素能受体(β2AR)基因多态性与上海市儿童哮喘的关系。方法2005年11月-2007年1月本院儿科住院及门诊哮喘患儿57例。男34例,女23例;年龄(4.98±2.78)岁。根据哮喘发作程度分为间歇和轻度发作组(36例)、中重度发作组(21例)。同期门诊健康体检儿童62例为健康对照组。男30例,女32例;年龄(5.30±3.40)岁。抽取各组儿童清晨空腹肘静脉血3mL。应用序列特异引物PCR(SSP-PCR)技术,对哮喘组和健康对照组儿童β2AR精氨酸(Arg)16甘氨酸(Gly)和谷氨酰胺(Gln)27谷氨酸(Glu)位点基因多态性进行分析,采用化学发光免疫方法测定各组儿童血清总IgE水平。应用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果1)哮喘和健康对照组儿童Arg16Gly位点等位基因、基因型频率(χ2=0.449,1.396Pa>0.05)及Gln27Glu位点等位基因、基因型频率(χ2=1.315,1.544Pa>0.05)比较差异均无显著性意义。2)16位点Gly16纯合子在中重度哮喘中的分布显著高于间歇和轻度发作组(χ2=7.049P<0.05);27位点各基因型在间歇和轻度发作组与中重度发作组中的分布比较无显著差异(χ2=1.265P>0.05)。3)哮喘组各位点基因型血清总IgE水平比较差异无显著性意义(F=0.105,0.10Pa>0.05)。结论β2ARGly16纯合子基因型与上海市儿童哮喘的严重程度相关,可能是严重哮喘的重要遗传因素。

儿童β_2-肾上腺素能受体基因多态性与哮喘及吸入治疗疗效的关系

目的探讨汉族儿童中β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因多态性对哮喘儿童发病和对长效β2受体激动剂(LABA)吸入疗效的影响。方法采用DNA直接测序法,分别检测212例哮喘儿童和52例健康体检儿童的β2-AR的16位点、27位点和164位点的基因多态性分布,分析基因多态性和哮喘发病的关系。筛选其中5～11岁共89例中度持续性哮喘儿童,采用前瞻性的药物基因学研究,予以吸入沙美特罗替卡松干粉剂治疗12周,并于治疗前后分别进行常规通气肺功能检测,分析β2-AR基因多态性对哮喘儿童吸入LABA后肺功能的影响。结果哮喘组Arg16Gly中具有G等位基因的频率高于正常对照组(分别为38.7%和31.7%,P<0.01)。哮喘组Gln27Glu中具有G等位基因的频率高于正常对照组(分别为7.1%和0,P<0.01)。164位点基因的多态性在哮喘组和正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,哮喘儿童的控制率为69.66%,肺功能明显好转,第1秒用力呼出气量(FEV1),用力肺活量(FVC),呼气峰流速(PEF),呼出25%、50%、75%肺活量时的呼气流速(FEF25、50、75)均有明显改善。结论 16位点和27位点的多态性可能和汉族儿童哮喘发病有关;β2-AR基因164位点的基因多态性和哮喘无关,β2-AR基因16位点和27位点的多态性不影响哮喘患儿LABA治疗的疗效。

骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松模型大鼠血清中瘦素、白细胞介素6、前列腺素E_2及骨组织中β_2-肾上腺素受体的影响

目的:观察骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松(OP)模型大鼠血清中瘦素(LEP)、白细胞介素6(IL-6)、前列腺素E_2(PGE_2)及骨组织中β_2-肾上腺素受体(ADRB2)的影响。方法:采用双侧卵巢切除法复制OP大鼠模型;造模12周后以双能X线法检测骨矿物质密度(BMD),确定OP模型是否复制成功;用药12周后应用酶联免疫法检测血清中LEP、IL-6和PGE_2的浓度,免疫组化法检测大鼠骨组织中ADRB2的表达。结果:造模12周后,模型组与假手术组相比,多个部位BMD显著下降(P<0.01),提示OP模型复制成功。用药12周后模型组LEP、IL-6和PGE_2较假手术组均有显著增高(P<0.05);骨碎补总黄酮组LEP和IL-6较模型组有明显降低(P<0.01),PGE_2无显著差异(P>0.05);模型组ADRB2表达与假手术组和给药组间比较有显著差异(P<0.05),假手术组和给药组间比较无显著差异(P>0.05)。结论:去卵巢OP大鼠血清LEP、IL-6、PGE_2和骨组织ADRB2表达升高;而骨碎补总黄酮能降低去卵巢OP大鼠血清中LEP、IL-6水平和骨组织ADRB2表达,抑制骨吸收,这可能是骨碎补总黄酮防治OP的作用机制之一。

COPD患者early-EPCsβ_2-肾上腺素受体的表达及其对细胞迁移的影响~

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中的早期内皮祖细胞(early-EPCs)是否表达β2-肾上腺素受体(β2AR)及其对细胞迁移的影响。方法:晨起从COPD患者与对照组抽取20 mL静脉血,用Ficoll密度梯度+磁珠分离法提取CD34^+细胞。通过Western blotting、RT-PCR及流式细胞术测定early-EPCs的β_2AR表达。体外培养early-EPCs,应用β_2AR的激动剂、抑制剂及下调β_2AR的表达量,通过Transwell法测定early-EPCs的迁移能力。结果:来自COPD患者的early-EPCs可见β_2AR mRNA及蛋白的表达强于对照组细胞(P<0.01)。两组细胞均表达β2AR,但COPD组明显高于对照组,流式细胞术分析两组的β2AR阳性细胞分别是82.9%和55.7%。外源性β2AR抑制剂、β2AR抗体及下调β_2AR的表达均可改善COPD患者early-EPCs的迁移能力。结论:β_2AR在COPD患者及对照组外周血中的early-EPCs均有表达。降低β_2AR的表达可影响COPD患者early-EPCs的迁移功能。

β_2-肾上腺素受体在新生大鼠心肌成纤维细胞中的分布及其促增殖作用

为了明确 β 肾上腺素受体 (AR)亚型在新生大鼠心肌成纤维细胞中的分布及其在成纤维细胞增殖反应中的作用 ,采用放射配体结合实验和 [3H] thymidine掺入法检测了新生大鼠心肌成纤维细胞的 β AR密度和DNA合成速率。结果显示 ,在培养心肌细胞和心肌成纤维细胞中 β AR密度 (Bmax)和解离常数 (KD)无显著性差异 ;竞争抑制曲线分析结果提示 ,心肌成纤维细胞对CGP 2 0 712A和ICI 1185 5 1单位点拟合均显著优于两位点拟合 (P <0 0 1) ,表现为对选择性 β1 AR拮抗剂CGP 2 0 712A的低亲和性 (IC50 值 :10 1μmol/L)和对选择性 β2 AR拮抗剂ICI 1185 5 1的高亲和性(IC50 值 :0 147μmol/L)。异丙肾上腺素 (ISO)促心肌成纤维细胞增殖作用可被ICI1185 5 1和心得安 (非选择性 β AR拮抗剂 )完全抑制 ,而CGP 2 0 712A则无此作用。上述结果提示 ,在培养心肌成纤维细胞中β2 AR亚型占绝对优势 ,并且ISO引起的心肌成纤维细胞增殖反应是由 β2

β_2-肾上腺素能受体基因+46位多态性与新疆哈萨克族人超重肥胖的关系

目的:通过观察β2-肾上腺素能受体基因(β 2-adrenergic receptor, β 2-AR、ADRB2)+46A→G (Arg16/Gly)多态性与体重指数(BMI)的关系,研究其与哈萨克族人超重肥胖的关系.方法:采集120例35～65岁哈萨克族人的遗传标本,按WHO超重和肥胖划分标准以BMI<25 kg/m 2、25～29.9 kg/m 2、≥30 kg/m 2 将人群划分为正常、超重及肥胖3组,采用allele-specific PCR方法检测和分析该人群β 2-AR基因+46A→G多态性,观察各基因型和等位基因频率在不同BMI水平的分布及其与超重肥胖的关系. 结果:该人群β 2-AR+46位基因型频率为AA 0.39,AG 0.37,GG 0.24;A等位基因频率为0.58,G等位基因频率为0.42;3组间相应AA、AG、GG及A、G基因型和等位基因频率分别为0.37、0.39、0.24、0.56 、0.44;0.47、0.33、0.20、0.63、0.37和0.29、0.38、0.33、0.48、0.52,3组基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论:哈萨克族人群β 2-AR基因存在+46 A→G (Arg16/Gly)多态性,但该位点多态性与哈萨克族人群超重肥胖无关.

β_2肾上腺素受体通过HIF-1α调控NNK诱导的胰腺癌细胞进展

目的探讨β_2肾上腺素受体在4-甲基亚硝氨基-3-吡啶-1-丁酮(NNK)诱导胰腺癌细胞进展中的具体作用机制。方法采用NNK干预胰腺癌MIA PaCa-2和BxPC-3细胞,通过HIF-1α-shRNA稳定转染胰腺癌细胞及运用ICI118551,以NNK组作为对照,Transwell小室侵袭试验检测各组胰腺癌细胞的侵袭能力,Western blot检测HIF-1α、Cyclin D1和VEGF蛋白表达水平。流式细胞技术检测各组细胞周期变化。结果 NNK能够显著上调MIA PaCa-2和BxPC-3细胞HIF-1α水平及促进胰腺癌细胞的增殖及侵袭能力;β_2肾上腺素受体抑制剂ICI 118551及sh-HIF-1α能够显著下调NNK所诱导的MIA PaCa-2和BxPC-3细胞HIF-1α水平,以及抑制胰腺癌细胞的增殖及侵袭能力。另外,运用CoCl2上调HIF-1α表达水平后能够逆转ICI 118551对NNK效应的抑制作用,重新上调胰腺癌细胞的侵袭能力。结论β_2肾上腺素受体通过HIF-1α来介导NNK诱导的胰腺癌细胞增殖及侵袭。

β_2-肾上腺素能受体激动剂福莫特罗的合成工艺研究

设计了一条合成新型 β2 肾上腺素能受体激动剂福莫特罗的新路线 ,该路线较文献路线简捷方便 ,且后处理简单 ,由原料 1 (4 苄氧基 3 硝基苯基 ) 2 溴乙酮出发 ,总收率为 13 4% .适于实验室制备和工业化生产 .

β_2-肾上腺素能受体基因Arg16/Gly多态性与原发性高血压的关系

目的检测贵州汉族人群β2-肾上腺素能受体基因Arg16/Gly多态性,并研究其与原发性高血压(EH)及其它心血管病危险因素的关系。方法选择131例EH患者及40个正常人为研究对象,通过特异性等位基因聚合酶链反应确定其基因型,并测定每个对象的体重指数、腰围/臀围、空腹血甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇以及脂蛋白(α)值等指标。结果(1)Arg16/Gly多态性的基因型和等位基因频率EH组和对照组间差异无显著性(P>0.05);(2) Arg16/Gly多态性与体重指数、腰围/臀围、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白以及脂蛋白(α)等指标无关联(P>0.05)。结论β2-AR基因Arg16/Gly多态性与EH及心血管病危险因素无关。

心脏抗β_2-肾上腺素能受体自身抗体的产生与心肌重构的关系

目的研究心肌重构和心脏抗β2-肾上腺素能受体(β2-AR)自身抗体产生的关系。方法制备大鼠心衰模型(心梗模型组),测定心衰不同时期大鼠血液中抗β2-肾上腺素能受体自身抗体的滴度及阳性率,同时研究其心功能的变化情况。结果①大鼠心梗模型中,术后4周抗β2-AR自身抗体的阳性率为46.8%,显著高于伪手术组的16.0%(P<0.05);术后12周抗β2-AR自身抗体阳性率为56.3%,显著高于伪手术组的15.4%(P<0.05),同时也高于手术前的水平17.6%(P<0.05)。手术组不同时间段抗体阳性率间差异有统计学意义(P<0.01);但手术组和伪手术组组间及两组组内抗体滴度差异均无统计学意义。②抗β2-AR自身抗体的高峰出现于术后4周,而心功能的改变出现于手术后1～2周,从出现时间上看,自身抗体出现晚于心功能的改变。结论①大鼠心梗模型中,术后4周抗β2-肾上腺素能受体自身抗体阳性率显著增高。②抗β2-肾上腺素能受体自身抗体的出现于心功能改变之后,可能是继发于心脏的病理损伤,二者之间存在一定的相关关系。

β_2-肾上腺素能受体基因多态性与支气管哮喘分期关系的研究

目的探讨β2-肾上腺素能受体(β2-AR)16、27位点基因多态性与支气管哮喘分期的关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应方法,对36例支气管哮喘急性期患者、38例缓解期患者进行β2-AR基因多态性检测。结果急性期组与缓解期组β2-AR16位点基因型频率分别为:精氨酸/甘氨酸50.0%、44.7%,甘氨酸/甘氨酸33.3%、36.9%,精氨酸/精氨酸16.7%、18.4%;27位点分别为:谷氨酰胺/谷氨酸55.6%、47.4%,谷氨酰胺/谷氨酰胺33.3%、36.8%,谷氨酸/谷氨酸11.1%、15.8%,两组比较,差异均无显著性意义。结论β2-AR16、27位点基因多态性与支气管哮喘分期无关联。

β_2肾上腺素能受体激动剂/拮抗剂对大鼠OB IGF-Ⅰ受体mRNA表达的影响

目的通过研究β2肾上腺素能受体(ADRβ2R)激动剂/拮抗剂对大鼠成骨细胞(OB)成骨性指标胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达的调控作用,探讨交感神经系统(SNS)对骨代谢影响的分子机制。方法取24 h内出生的新生SD大鼠的颅盖骨OB进行体外培养,通过细胞形态学观察、碱性磷酸酶重氮盐法染色和矿化结节茜素红S染色法来鉴定OB。将传至第三代的OB分成A组(ADRβ2R激动剂)、B组(ADRβ2R拮抗剂)和C组(对照组),分别用不同浓度的ADRβ2R激动剂(salbutamol)或ADRβ2R拮抗剂(ICI-118551)对OB处理24 h、72 h和96 h,检测IGF-ⅠR mRNA的表达变化,观察时间效应和剂量效应的关系。结果 ADRβ2R拮抗剂ICI-118551可以上调OB上IGF-ⅠR mRNA的表达;而ADRβ2R激动剂salbutamol则下调IGF-ⅠR mRNA的表达。两种调节作用均具有时间剂量依赖性。说明β2肾上腺素能受体(ADRβ2R)激动剂/拮抗剂可以通过作用于SD大鼠OB上的ADRβ2R而影响OB的骨形成指标IGF-ⅠR mRNA的表达,间接影响了骨形成因子IGF-Ⅰ的促进骨形成能力,从而调节骨代谢。

β_2-肾上腺素能受体基因+46位多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的关联研究

探讨β2-肾上腺素能受体基因(β2-adrenergicreceptor,β2-AR)+46A→G(Arg16/Gly)多态性在哈萨克族人群的分布及其与原发性高血压(EH)的关系。采集62例EH和61例正常血压哈萨克族人的遗传标本,采用allele-specificPCR方法检测和分析该人群β2-AR基因+46A→G多态性,观察各基因型和等位基因频率在该人群EH和正常血压组的分布。结果该人群β2-AR+46位基因型频率为AA:0.39,AG:0.36,GG:0.25。在EH组相应分别为:0.37、0.37、0.26;在正常血压组中分别为0.41,0.34,0.25。A等位基因频率为0.57,在EH组和正常血压组中分别为0.56,0.58;G等位基因频率为0.43,在EH组和正常血压组中分别为0.44和0.42。两组间均无统计学差异(P>0.05)。说明哈萨克族β2-AR基因存在+46位A→G(Arg16/Gly)多态性,AA、AG、GG的基因型频率分别为AA:0.39,AG:0.36,GG:0.25,A和G等位基因频率分别为0.57、0.43。但该位点多态性在哈萨克族EH和正常血压人群中的分布无统计学差异。

支气管哮喘患者β_2-肾上腺素能受体基因多态性与血清总IgE关系的研究

目的探讨支气管哮喘患者 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR) 16、2 7位点基因多态性与血清总IgE的相关性。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应 (AS PCR)方法 ,对 4 4例支气管哮喘患者进行 β2 AR基因多态性分析 ,并测定其血清总IgE。结果各基因型血清总IgE的值 ,16位点 :精氨酸 /精氨酸为 5 2 5 2 5± 2 2 0 73mmol/L ,甘氨酸 /精氨酸为 4 19 87± 2 6 4 0 8mmol/L ,甘氨酸 /甘氨酸为 5 35 10±2 89 5 1mmol/L ,三者比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;2 7位点 :谷氨酰胺 /谷氨酰胺为 75 6 13±2 2 0 6 3mmol/L ,谷氨酸 /谷氨酰胺为 341 0 0± 136 6 6mmol/L ,谷氨酸 /谷氨酸为 4 2 5 33± 2 74 13mmol/L ;三者比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 β2 AR基因 2 7位点多态性与血清总IgE相关联。

新疆哈萨克族人β_2-肾上腺素受体基因G(-1023)A多态性与高血压的关联分析

目的探讨新疆哈萨克族人β2-肾上腺素受体(β2-AR)基因G(-1023)A多态性与原发性高血压的关系。方法用直接测序法对β2-AR基因进行测序,寻找和验证单核苷酸多态性(SNP)在哈萨克族高血压群体中的存在;应用多聚酶链反应、限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)对新疆哈萨克族人β2-AR基因编码区起始点上游1023(-1023)位点进行基因分型。结果(1)在β2-AR基因调控区-1023位点存在一高频SNP;(2)β2-AR基因-1023位点多态基因型频率在该群体中分布符合Hardy-Weinberg平衡;(3)该位点各基因型频率和等位基因频率在哈萨克族高血压组和正常对照组的分布差异均有统计学意义(P<0.05)。结论β2-AR基因-1023位点多态性可能与新疆哈萨克族人高血压相关。