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hβ_2GPⅠ第一功能区基因单体和二串联体的克隆和表达
1
作者
李明辉
谭岩
+5 位作者
姜艳芳
刘力华
方艳秋
许淑芬
段秀梅
付嘉
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期203-206,共4页
目的:构建h2βGPⅠ(h2βGPI)第一功能区基因单体及二串联体的原核表达载体PQE30-β2GP-ⅠDI和PQE30-β2GPⅠ-DI2,并在大肠杆菌M15中进行高效表达。方法:应用PCR技术扩增hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体β2GPⅠ-DI,并根据同尾酶特性构建hβ...
目的:构建h2βGPⅠ(h2βGPI)第一功能区基因单体及二串联体的原核表达载体PQE30-β2GP-ⅠDI和PQE30-β2GPⅠ-DI2,并在大肠杆菌M15中进行高效表达。方法:应用PCR技术扩增hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体β2GPⅠ-DI,并根据同尾酶特性构建hβ2GPⅠ第一功能区基因二串联体β2GPⅠ-DI2,将获得的单体和二串联体分别与PGEM-T easy载体连接测序,测序正确后分别克隆于原核表达载体PQE30中,构建成重组表达载体PQE30-β2GPⅠ-DI和PQE30-β2GPⅠ-DI2,在大肠杆菌M15中以l mmol.L-1IPTG诱导蛋白表达,经Western blotting鉴定目的蛋白的抗原性。结果:表达了hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体及二串联体的蛋白,相对分子质量约为9 000和17 000,其表达量均可达菌体总蛋白的25%,并具有hβ2GPⅠ的抗原性。结论:成功构建了hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体及二串联体的原核表达载体,并诱导了蛋白的高效表达。
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关键词
人β2gpⅰ
遗传载体
基因表达
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职称材料
题名
hβ_2GPⅠ第一功能区基因单体和二串联体的克隆和表达
1
作者
李明辉
谭岩
姜艳芳
刘力华
方艳秋
许淑芬
段秀梅
付嘉
机构
吉林大学第一医院中心实验室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期203-206,共4页
基金
吉林省科技厅科研基金资助课题(20030419)
国家博士点学科专项基金资助课题(20040183066)
吉林省杰出青年基金资助课题(20050113)
文摘
目的:构建h2βGPⅠ(h2βGPI)第一功能区基因单体及二串联体的原核表达载体PQE30-β2GP-ⅠDI和PQE30-β2GPⅠ-DI2,并在大肠杆菌M15中进行高效表达。方法:应用PCR技术扩增hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体β2GPⅠ-DI,并根据同尾酶特性构建hβ2GPⅠ第一功能区基因二串联体β2GPⅠ-DI2,将获得的单体和二串联体分别与PGEM-T easy载体连接测序,测序正确后分别克隆于原核表达载体PQE30中,构建成重组表达载体PQE30-β2GPⅠ-DI和PQE30-β2GPⅠ-DI2,在大肠杆菌M15中以l mmol.L-1IPTG诱导蛋白表达,经Western blotting鉴定目的蛋白的抗原性。结果:表达了hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体及二串联体的蛋白,相对分子质量约为9 000和17 000,其表达量均可达菌体总蛋白的25%,并具有hβ2GPⅠ的抗原性。结论:成功构建了hβ2GPⅠ第一功能区基因的单体及二串联体的原核表达载体,并诱导了蛋白的高效表达。
关键词
人β2gpⅰ
遗传载体
基因表达
Keywords
h
β2
gp
ⅰ
genetic vectors
gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hβ_2GPⅠ第一功能区基因单体和二串联体的克隆和表达
李明辉
谭岩
姜艳芳
刘力华
方艳秋
许淑芬
段秀梅
付嘉
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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