血清Ⅱ型胶原交联C-末端肽和软骨寡聚基质蛋白在老年膝关节炎中的表达及意义

目的探讨Ⅱ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅱ)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)在不同严重程度老年膝关节骨性关节炎患者血清中的表达情况及变化规律。方法 60例老年膝关节骨性关节炎患者按照Kellgren and Lawrence(K-L)分级综合评估患者双侧膝关节严重程度并进行分组。A组:左膝K-L分级+右膝K-L分级≤2;B组:左膝K-L分级+右膝K-L分级>2≤4;C组:左膝K-L分级+右膝K-L分级>4≤6;D组:左膝K-L分级+右膝K-L分级>6≤8。收集患者血清,利用ELISA法检测各组患者血清CTX-Ⅱ、COMP表达水平并进行统计学分析。结果血清CTX-Ⅱ表达水平:A、B、C组呈上升趋势,A、B组差异有显著性(P=0.024),B、C组差异无显著性(P=0.792),C、D组差异有显著性(P=0.018),呈现下降趋势;血清COMP表达水平:A、B、C组呈上升趋势,A、B组差异有显著性(P=0.041),B、C组差异无显著性(P=0.565),C、D组差异有显著性(P=0.003),呈现下降趋势。结论血清CTX-Ⅱ、COMP表达水平随着膝关节骨性关节炎加重逐渐升高,软骨退变快速进展期达到最高,膝关节关节炎晚期下降,可作为潜在的评估老年膝关节骨性关节炎严重程度的生物学指标。

联合重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗活动性强直性脊柱炎继发骨质疏松症的临床效果观察

目的观察联合重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗活动性强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)继发骨质疏松症(osteoporosis,OP)的临床效果。方法选取活动性AS继发OP 68例,采用随机数字表法随机将其分为观察组和对照组两组各34例,研究过程中对照组脱落1例。观察组在常规治疗基础上给予注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白,对照组给予常规治疗,疗程均为24周。比较两组治疗前和治疗24周后炎性指标和Bath AS疾病活动性指数(BASDAI)评分,治疗24周后AS 20%改善程度(ASAS 20)达标率,治疗前和治疗24周后骨代谢标志物和双侧股骨颈、腰1~腰4骨密度(BMD),以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗前,两组炎性指标及BASDAI评分、骨代谢标志物、双侧股骨颈和腰1~腰4 BMD比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗24周后,两组炎性指标和BASDAI评分、Ⅰ型胶原交联C末端肽(CTX-Ⅰ)低于治疗前,观察组血清碱性磷酸酶(ALP)和两组双侧股骨颈、腰1~腰4 BMD高于治疗前;观察组炎性指标和BASDAI评分、CTX-Ⅰ低于对照组,ASAS 20达标率和双侧股骨颈、腰1~腰4 BMD高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗期间,两组均未发生明显不良反应。结论联合重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗活动性AS继发OP可控制炎症,抑制破骨细胞活性,提升BMD,显著改善AS继发OP。

依降钙素干预膝骨关节炎模型大鼠软骨下骨的变化

背景:骨关节炎存在软骨下骨吸收和骨形成失去平衡,课题组前期研究发现膝骨关节炎大鼠关节软骨改变前软骨下骨就已经发生改变。目的:通过观察膝骨关节炎大鼠膝关节软骨下骨的变化,探讨依降钙素对软骨下骨p38 MAPK表达及软骨下骨吸收的影响。方法:雌性3月龄SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=6)不切除卵巢,切除同卵巢等体积大小的脂肪组织,切开双侧膝关节,但不损伤交叉韧带;模型组(n=6)切除双侧卵巢后,再切断双侧膝关节前交叉韧带,建立卵巢切除+前交叉韧带切断模型,不进行药物干预;依降钙素组(n=6)建立卵巢切除+前交叉韧带切断模型后,依降钙素5 IU/kg,每周2次肌肉注射。12周后分析软骨下骨的骨密度、软骨下骨p38蛋白表达水平以及血清Ⅰ型胶原交联C-末端肽、Ⅱ型胶原交联C-末端肽、白细胞介素1、白细胞介素6、骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶5b水平。实验方案经南华大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)依降钙素组软骨下骨的骨体积分数、骨小梁数量显著高于模型组(P<0.05),骨小梁分离度显著低于模型组(P<0.05);(2)模型组的骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度显著低于假手术组(P<0.01或<0.05)、骨小梁分离度显著高于假手术组(P<0.01);(3)依降钙素组血清Ⅰ型胶原交联C-末端肽、白细胞介素1、白细胞介素6、抗酒石酸酸性磷酸酶5b显著低于模型组(P<0.05),模型组Ⅰ型胶原交联C-末端肽、Ⅱ型胶原交联C-末端肽、白细胞介素1、白细胞介素6、抗酒石酸酸性磷酸酶5b明显高于假手术组(P<0.05);(4)软骨下骨p38蛋白表达水平依降钙素组显著低于模型组(P<0.01)、模型组显著高于假手术组(P<0.01);(5)结果说明,依降钙素可能通过下调p38MAPK表达,抑制骨关节炎促炎因子分泌及软骨下骨吸收。

联合检测软骨代谢生物标志物在膝骨关节炎早期诊断中的应用

目的评估软骨合成降解中的生物标志物在膝骨关节炎(OA)早期诊断和疾病进展中的临床意义。方法收集神木市医院门诊及住院部确诊的膝OA患者227例作为膝OA组,选取同期健康体检者178例作为对照组。酶联免疫吸附法检测血清ⅡA型前胶原N端前肽(PⅡANP)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和尿Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)水平,双膝X线正侧位片和SF-36简明健康调查问卷分别评估膝OA受累程度和生活质量。结果1)与对照组相比,膝OA组血清PⅡANP水平降低,血清COMP、MMP-3和尿CTX-Ⅱ水平均升高(P<0.05);2)中晚期膝OA组血清PⅡANP低于早期膝OA组及对照组(P<0.05),血清COMP、MMP-3(P<0.05)和尿CTX-Ⅱ均高于早期膝OA组及对照组;3)膝OA组血清PⅡANP水平与K-L分级呈反相关(P<0.05),血清COMP和MMP-3水平与K-L分级呈正相关(P<0.05),血清COMP水平还与年龄呈正相关(P<0.05)。血清PⅡANP水平与精神健康呈反相关(P<0.05);血清COMP水平与生理功能呈反相关(P<0.05),与精神健康呈正相关(P<0.05)。结论血清PⅡANP、COMP、MMP-3和尿CTX-Ⅱ在膝OA中表达异常,并随疾病严重程度增加而变化,可作为膝OA诊断和疾病进展的参考指标。

注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎患者血清DKK-1及骨代谢指标的影响

目的:观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者血清Dickkopf-1蛋白(DKK-1)及骨代谢指标的影响。方法:选取2016年12月至2018年6月华中科技大学同济医学院附属普爱医院诊治的40名AS患者为AS组,另选取同期40名健康体检者为对照组,所有AS患者均接受注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白25 mg、每周2次皮下注射治疗,疗程24周。比较2组患者外周血清DKK-1、骨代谢指标[骨钙素(osteocalcin, OC)、Ⅰ型胶原氨基端前肽(aminoterminal propeptide of type 1 collagen, PINP)、Ⅰ型胶原交联C端肽(C-terminal cross-linking telopeptide of type 1 collagen, CTX-1)]、红细胞沉降率(ESR)和C-反应蛋白(CRP)水平。比较AS组患者治疗前及治疗24周后疾病活动度、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、DKK-1、骨代谢指标、ESR及CRP水平。分析AS组患者DKK-1及骨代谢指标与疾病活动度、ESR及CRP的关系。结果:AS组患者血清DKK-1水平明显低于对照组(P<0.01),CTX-1、OC及PINP水平高于对照组(P<0.01)。AS组患者治疗24周后,CTX-1、TNF-α、BASDI、ESR及CRP水平均较治疗前明显下降(P<0.01),而DKK-1、IL-6、OC及PINP变化不明显(P>0.05)。AS组患者血清CTX-1水平与ESR、CRP、 BASDI水平呈正相关关系,而DKK-1、OC、PINP水平与ESR、 CRP、 BASDI水平无相关性。结论:AS患者存在骨代谢的紊乱;DKK-1参与AS新骨形成;注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白能有效控制AS炎症,改善骨代谢,但不能上调DKK-1的表达。

关节制动对大鼠膝关节软骨缺损修复的影响

背景:关节制动是骨科中常用来治疗关节疼痛以及关节损伤的一种方法,制动和其他治疗方法相比能减少受损滑膜关节的疼痛,避免受损关节面间的接触应力以及摩擦力。但是制动常常会引起一些不良并发症如关节挛缩、关节周围骨质疏松以及软骨退变。目的:观察关节制动对大鼠膝关节软骨损伤修复的影响。方法:36只SD大鼠麻醉后,在一侧股骨髁间窝使用角膜环钻钻出直径2.5 mm及深2.0 mm的全层软骨缺损,而后随机分为制动组和对照组,每组18只,对照组单纯造模后不作任何处理,而制动组造模后立即采用经设计和改良的小动物外固定架伸直位进行跨关节制动。结果与结论:(1)软骨缺损修复速度:制动组与对照组的软骨缺损修复速度差异无显著性意义;(2)组织学染色:两组再生组织主要为纤维细胞,术后8周,制动组的Wakitani评分和Mankin评分高于对照组(P<0.05);(3)软骨代谢标志物检测:与对照组相比,制动组大鼠干预8周后尿样中Ⅱ型胶原交联C末端肽水平显著提高(P<0.05);(4)结果说明:持续制动可造成大鼠膝关节软骨退行性病变,不利于软骨缺损修复。

补肾活血方对Wnt/β-catenin信号通路介导的人滑膜细胞与正常软骨细胞共培养体系的调控作用

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎发病中的作用,观察补肾活血方对异常的滑膜-软骨微环境的调控作用,初步阐释补肾活血方治疗骨关节炎的分子作用机制。方法:构建β-catenin过表达慢病毒载体转染正常人滑膜细胞,Transwell小室共培养人滑膜细胞与正常人软骨细胞模拟滑膜软骨关节体系内环境;各时间点不同浓度药物干预共培养体系,Western bolt方法检测补肾活血方对滑膜细胞β-catenin蛋白表达的影响;ELISA方法检测补肾活血方对共培养体系中滑膜细胞、软骨细胞培养上清液基质金属蛋白酶-7(MMP-7),人Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅱ),软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达的影响。结果:Western blot检测发现β-catenin过表达慢病毒转染正常人滑膜细胞后滑膜细胞胞浆及胞核中β-catenin表达明显上调(P<0.01),补肾活血方能够明显下调共培养滑膜细胞中β-catenin蛋白的表达(P<0.01);同时,ELISA法检测发现补肾活血方能够明显下调滑膜细胞与软骨细胞培养上清液中MMP-7,CTX-Ⅱ,COMP的表达(P<0.01)。结论:β-catenin过表达慢病毒转染正常人滑膜细胞可成功激活Wnt/β-catenin信号通路,Wnt/β-catenin信号通路激活后共培养体系中MMP-7,CTX-Ⅱ,COMP的水平明显上升;补肾活血方可以抑制滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,下调共培养体系中MMP-7,CTX-Ⅱ,COMP的表达,减轻异常滑膜细胞对软骨细胞的损害,减缓软骨基质的降解,有利于骨关节炎的缓解和恢复。