基于FCM技术对喉癌细胞最佳X射线剂量的研究

目的:本文采用Annexin V-FITC/PI双染色、激光流式细胞术(Annexin V-FITC/PI-FCM)对经过不同剂量X射线(X-ray)辐照后的人上皮样喉癌细胞(Hep-2)继续培养48h时的凋亡情况进行了研究。观察受到不同剂量X-ray辐照后细胞活性的变化,探索Hep-2细胞的最佳X-ray放射剂量,进而为临床探索X-ray放射治疗喉癌的最佳剂量提供试验上的初步参考。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染色、激光流式细胞术对受不同剂量X-ray辐照后的人上皮样喉癌细胞继续培养48h时进行研究,观察细胞形态、活性的变化,探索不同剂量组细胞的凋亡率。结果:试验结果表明,X-ray的辐照明显地引起了癌细胞的凋亡。总体上讲,细胞的凋亡率与X-ray的辐照剂量成一定的依赖关系,但并非线性。在所设定的剂量组中以12Gy剂量组细胞的凋亡率(20.793±1.133)%(P<0.01,n=5)为最高,2Gy～8Gy之间的剂量组Hep-2细胞凋亡率变化不够显著(P>0.05,n=5)。单位剂量凋亡率(凋亡率/辐照剂量)以2Gy组的(4.887±0.211)%(P<0.05,n=5)为最高。结论:经综合分析得出初步结论,对Hep-2细胞进行X-ray辐照,单次辐照剂量2Gy,周累计辐照剂量8Gy,对抑制Hep-2细胞的增殖效果有望更好。

X射线照射HEp-2细胞的FTIR光谱研究

通过对不同剂量X射线照射的人上皮样喉癌细胞（HEp-2）的傅里叶变换红外（FTIR）光谱研究发现：不同剂量组HEp-2细胞受到的影响存在较大差异。与对照组相比,HEp-2细胞内部的蛋白质、核酸和脂类的含量在较大剂量组大幅减少;随照射剂量的逐渐增大,部分谱线位置频移较明显,如3314cm^-1谱线逐渐红移3～16cm^-1,1454cm^-1谱线逐渐蓝移3cm^-1,1400cm^-1谱线逐渐红移3cm^-1,2847cm^-1谱线逐渐蓝移4～8cm^-1,表明这些谱线对应的基团内部构象发生变化。另外,从相对峰强比I1654/I1542,I1454/I1400,I2958/I2847随照射剂量的变化关系发现,同对照组相比,HEp-2细胞在8Gy组内部蛋白质、核酸、脂类的含量和构象改变最为明显,癌化程度最弱,说明在所设定剂量组中8Gy X射线照射对HEp-2细胞的影响相对最好,这为将来进一步寻找射线作用于癌细胞的最佳剂量提供了一定的实验依据。

X射线照射Hep-2细胞对其培养基吸收光谱的影响

采用分光光度计分别测量了受不同剂量X射线照射后继续培养48h时的人上皮样喉癌细胞株Hep-2的培养基RPMI1640的紫外吸收光谱,分析了该培养基中蛋白质的紫外吸收特性。结果发现:各组培养基的吸收光谱存在明显的差别,新鲜培养基RPMI1640(10%胎牛血清)233nm处的吸收峰在细胞生长过程中位移至235nm,275nm处的吸收峰位移至278nm。反映出各组培养基中芳香族氨基酸中各种氨基酸如色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸的含量的变化,说明癌细胞在生长过程中对这几种氨基酸的改变不是按等量比的。实验还发现细胞培养基的吸收光谱强度与各剂量组细胞数基本成正相关,进而与细胞所受X射线照射的剂量有内在的联系。这些结果将为利用光谱技术研究人喉癌最佳X射线放射剂量奠定基础。

X射线照射对Hep-2细胞吸收光谱的影响

本文采用分光光度法研究了不同剂量X射线照射人上皮样喉癌细胞株(Hep-2)后对其吸收光谱的影响。旨在能为临床X射线放射治疗喉癌提供最佳剂量的参考。通过对六个剂量组与空白对照组吸收光谱的研究,发现不同剂量组的Hep-2细胞内蛋白质及核酸所受伤害与修复的程度不同,且发现癌细胞所受照射的剂量与其生长所受抑制程度、吸收光谱之间有一定的联系。为下一步用光谱技术的研究喉癌X射线放射最佳剂量的问题奠定了基础。