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基于荧光定量PCR扩增反应的SNP测定法
被引量:
5
1
作者
单志新
谭虹虹
+1 位作者
余细勇
林秋雄
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期827-830,共4页
建立一种利用荧光定量PCR扩增反应进行单核苷酸多态性(SNP)快速测定的方法.以人β肾上腺素受体2基因中的Arg16Gly为研究对象,利用荧光染料SYBRGreenⅠ标记定量PCR产物,通过PCR生长曲线和融解曲线分析结果进行SNP分型.为提高SNP测定的特...
建立一种利用荧光定量PCR扩增反应进行单核苷酸多态性(SNP)快速测定的方法.以人β肾上腺素受体2基因中的Arg16Gly为研究对象,利用荧光染料SYBRGreenⅠ标记定量PCR产物,通过PCR生长曲线和融解曲线分析结果进行SNP分型.为提高SNP测定的特异性,分别在野生型和突变型等位基因的特异性引物3′端倒数第3个碱基位置,引入了一个人为错配碱基,使引物的错误延伸率显著降低,大大提高了SNP分析的准确性.通过DNA测序验证荧光定量PCR对β肾上腺素受体2基因中Arg16Gly分型结果的准确率.实验结果表明,所建立的方法操作简便,结果准确,适合进行大规模样品的SNP检测工作.
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关键词
单核苷酸多态性
实时聚合酶链反应
等位基因特异性延伸反应
人为错配碱基
下载PDF
职称材料
题名
基于荧光定量PCR扩增反应的SNP测定法
被引量:
5
1
作者
单志新
谭虹虹
余细勇
林秋雄
机构
广东省人民医院医学研究中心
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期827-830,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30300421)~~
文摘
建立一种利用荧光定量PCR扩增反应进行单核苷酸多态性(SNP)快速测定的方法.以人β肾上腺素受体2基因中的Arg16Gly为研究对象,利用荧光染料SYBRGreenⅠ标记定量PCR产物,通过PCR生长曲线和融解曲线分析结果进行SNP分型.为提高SNP测定的特异性,分别在野生型和突变型等位基因的特异性引物3′端倒数第3个碱基位置,引入了一个人为错配碱基,使引物的错误延伸率显著降低,大大提高了SNP分析的准确性.通过DNA测序验证荧光定量PCR对β肾上腺素受体2基因中Arg16Gly分型结果的准确率.实验结果表明,所建立的方法操作简便,结果准确,适合进行大规模样品的SNP检测工作.
关键词
单核苷酸多态性
实时聚合酶链反应
等位基因特异性延伸反应
人为错配碱基
Keywords
single nucleotide polymorphism (SNP), real-time polymerase chain reaction, allele-specific amplification, artificial mismatch base
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于荧光定量PCR扩增反应的SNP测定法
单志新
谭虹虹
余细勇
林秋雄
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
5
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职称材料
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