目的筛选和鉴定人乳头状瘤病毒11型E7抗原（HPV11E7）HLA-A＊0201限制性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）表位。方法预测HPV11E7抗原HLA-A＊0201限制性CTL表位并合成相对应的表位多肽和四聚体（tetramer），即HPV11E7 ...目的筛选和鉴定人乳头状瘤病毒11型E7抗原（HPV11E7）HLA-A＊0201限制性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）表位。方法预测HPV11E7抗原HLA-A＊0201限制性CTL表位并合成相对应的表位多肽和四聚体（tetramer），即HPV11E7 7-15（TLKDIVLDL）、15-23（LQPPDPVGL）、47-55（PLTQHYQIL）、81-89（DLLLGTLNI）和82-90（LLLGTLNIV）。从健康HLA-A＊0201成人外周血单一核细胞诱导树突状细胞（DC）并负载上述表位多肽，流式细胞技术检测DC成熟分化标记及ELISA法检测DC分泌的IL-12；成熟DC负载各组多肽后观察DC激活T淋巴细胞的效应，ELISA法检测T细胞分泌的IFN-γ；四聚体检测抗原特异性CD8^＋T细胞及乳酸脱氢酶（LDH）释放法评价DC诱导的CTL对靶细胞的特异性体外杀伤效应。结果预测的5条HPV11ET表位多肽均能诱导DC的成熟分化；E77-15、82-90和15-23多肽负载的DC能激活T淋巴细胞分泌高水平IFN-γ；E77-15多肽负载的DC能刺激特异性tetramer^＋CD8^＋细胞增殖且其诱导的CTL对HPV11E7／293细胞产生高效率的特异性杀伤作用（P〈0．05）。结论筛选并鉴定出1条HPV11E7HL-A＊0201限制性CTL表位E77-15（TLKDIVLDL），负载该表位肽的DC体外可诱导高效、特异性的CTL效应，抗原性较强，有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位。展开更多
文摘目的筛选和鉴定人乳头状瘤病毒11型E7抗原（HPV11E7）HLA-A＊0201限制性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）表位。方法预测HPV11E7抗原HLA-A＊0201限制性CTL表位并合成相对应的表位多肽和四聚体（tetramer），即HPV11E7 7-15（TLKDIVLDL）、15-23（LQPPDPVGL）、47-55（PLTQHYQIL）、81-89（DLLLGTLNI）和82-90（LLLGTLNIV）。从健康HLA-A＊0201成人外周血单一核细胞诱导树突状细胞（DC）并负载上述表位多肽，流式细胞技术检测DC成熟分化标记及ELISA法检测DC分泌的IL-12；成熟DC负载各组多肽后观察DC激活T淋巴细胞的效应，ELISA法检测T细胞分泌的IFN-γ；四聚体检测抗原特异性CD8^＋T细胞及乳酸脱氢酶（LDH）释放法评价DC诱导的CTL对靶细胞的特异性体外杀伤效应。结果预测的5条HPV11ET表位多肽均能诱导DC的成熟分化；E77-15、82-90和15-23多肽负载的DC能激活T淋巴细胞分泌高水平IFN-γ；E77-15多肽负载的DC能刺激特异性tetramer^＋CD8^＋细胞增殖且其诱导的CTL对HPV11E7／293细胞产生高效率的特异性杀伤作用（P〈0．05）。结论筛选并鉴定出1条HPV11E7HL-A＊0201限制性CTL表位E77-15（TLKDIVLDL），负载该表位肽的DC体外可诱导高效、特异性的CTL效应，抗原性较强，有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位。
