宫颈癌筛查妇女高危型人乳头瘤病毒感染现状及影响因素研究:基于成都市45万人群

背景宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,其病因明确,通过规范筛查可以有效降低宫颈癌发病率。人乳头瘤病毒(HPV)检测是WHO推荐的首选宫颈癌筛查方法,了解成都市高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)感染状况,对优化成都市宫颈癌筛查方案具有重要意义。目的分析成都市35~64岁参加宫颈癌筛查人群的hrHPV感染现状和宫颈病变患者的hrHPV亚型感染分布情况,探讨hrHPV阳性检出率的相关影响因素。方法从“成都市育龄妇女生殖健康数据库”收集2023年参加成都市免费宫颈癌筛查的459433例个案数据,分析不同hrHPV基因型感染总体分布情况以及宫颈病变患者的hrHPV亚型感染分布情况,比较不同特征人群hrHPV感染情况,并构建多水平Logistic回归模型分析hrHPV检出阳性情况的相关因素。结果459433例中,hrHPV阳性检出率为11.65%(53509/459433),hrHPV感染随年龄的增长呈上升趋势(χ_(趋势)^(2)=1501.082,P<0.001)。82.39%(131/159)的宫颈癌患者感染HPV 16或18亚型,以单纯感染HPV 16亚型为主(52.20%,83/159)。多水平Logistic回归分析结果显示,年龄、文化程度、婚姻状况、绝经状态、避孕方式、妊娠次数、分娩次数为hrHPV阳性检出情况的影响因素(P<0.05)。结论成都市女性hrHPV阳性检出率略低于全国平均水平。在筛查过程中,要重视健康教育与随访工作,特别是对HPV 16或18亚型阳性者的后续随访工作。开展宫颈癌筛查宣传工作时应特别关注年长者、文化程度较低者、未婚或离异/丧偶者、已绝经者、未避孕或采用避孕套外的其他避孕方式者、妊娠或分娩2次以上者等重点人群,加强宫颈癌防治核心知识、生殖健康知识等的宣传,提高妇女健康素养。

人乳头瘤病毒11型E6的原核表达

目的 构建、克隆人乳头瘤病毒 11型 (HPV11)E6蛋白基因 ,并进行表达、纯化和鉴定。方法 用PCR法 ,从尖锐湿疣 (CA)标本中扩增出HPV 11型E6蛋白基因 ,与 pET3 2a载体连接成重组表达质粒pET3 2a/E6;重组质粒转入BL2 1大肠杆菌 ,经诱导表达硫氧还蛋白E6融合蛋白 (Trx E6) ;该蛋白经 3SNTAResin纯化柱纯化 ,SDS PAGE和WesternBlotting检测鉴定。 结果 经酶切及序列分析鉴定 ,重组质粒 pET3 2a/E6成功构建 ,诱导后高表达Trx E6融合蛋白 ,WesternBlotting鉴定证实表达蛋白分子量为 3 60 0 0D的Trx E6融合蛋白。结论 获得高表达、高纯度的HPV11E6蛋白 ,为该蛋白的功能及免疫学分析及CA的疫苗研究打下了基础。

人乳头瘤病毒16型和11型L1基因双价重组杆状病毒转移质粒的构建及鉴定

目的 :构建人乳头瘤病毒 16型与 11型 L 1基因双价重组杆状病毒转移质粒并对其进行鉴定。方法 :采用 PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒 11型晚期基因 L 1,并对其进行克隆测序 ;利用基因重组技术将人乳头瘤病毒 16型和 11型 L 1晚期基因共同装入杆状病毒转移载体中 ,分别位于强启动子 Ppolh和弱启动子 P10之下 ;利用酶切和 PCR技术对双价重组杆状病毒转移质粒进行鉴定。结果 :PCR扩增法获得尖税湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒 11型的 L1基因 ,得到人乳头瘤病毒 16型 L1和 11型 L1基因双价重组杆状病毒转移质粒 ,经酶切电泳鉴定验证重组成功。结论 :本研究成功构建了双价重组杆状病毒转移质粒 ,为进一步构建双价 L 1蛋白表达系统进而建立双价基因工程亚单位疫苗打下基础。

人乳头瘤病毒11型L2NE7E6融合蛋白的原核表达及其诱发的T细胞免疫反应

目的:在原核表达系统中表达人乳头瘤病毒11型(HPV11)L2NE7E6融合蛋白,纯化蛋白后免疫小鼠,检测其诱发的T细胞免疫水平,并筛选HPV11 E6、E7特异的T细胞表位肽。方法:用重叠PCR方法构建HPV11L2NE7E6融合基因并插入原核表达质粒,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达融合蛋白L2NE7E6,用SDS-PAGE和West-ern印迹鉴定融合蛋白的表达。Q柱纯化蛋白后免疫C57BL/6小鼠,分别用覆盖HPV11 E6和E7蛋白序列的肽库,采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测其诱发的E7、E6特异的T细胞免疫反应,并筛选E7、E6特异的T细胞表位肽。结果:在原核表达系统中有效表达了HPV11 L2NE7E6融合蛋白,蛋白纯化后免疫C57BL/6小鼠,分别能检测到针对HPV11 E6、E7肽库刺激产生的特异性T细胞免疫反应。经肽池筛选到1条强的E6 T细胞表位肽E6aa41-55(AEI-YAYAYKNLKVVW);而E7只筛选到2条弱的T细胞表位肽,分别为E7aa53-67(QILTCCCGCDSNVRL)和E7aa73-87(DGDIRQLQDLLLGTL)。结论:HPV11 L2NE7E6融合蛋白能诱发小鼠产生E6、E7特异性细胞免疫反应,可作为尖锐湿疣免疫治疗候选疫苗。

人乳头瘤病毒11型早期蛋白E6和E7基因的克隆及序列分析

目的:从尖锐湿疣(CA)标本中克隆出人乳头瘤病毒11型(HPV11)早期蛋白E6、E7基因,并进行序列测定及编码氨基酸序列分析,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研究奠定基础。方法:用PCR法,从CA标本中扩增出HPV11E6、E7基因,与载体pGEX-6P-1连接成重组质粒pGEX-6P-1E6、pGEX-6P-1E7,酶切鉴定及双脱氧法测序观察其变异状况。结果:克隆出HPV11早期蛋白E6、E7基因,成功构建重组质粒pGEX-6P-1E6、pGEX-6P-1E7。本研究克隆出的HPV11E7基因与GenBank标准株序列完全相同,E6基因有两个位点的变化。结论:本研究克隆出的HPV11E6、E7基因与标准株基本相同,这将为进一步研究E6、E7基因的表达、免疫活性及流行病学奠定基础。

人类疱疹病毒6型和人乳头瘤病毒在宫颈癌患者中的表达及临床检测意义

目的探讨人类疱疹病毒6型(HHV-6)和人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌患者中的表达及临床检测意义。方法选择86例疑似宫颈癌患者,检测其HHV-6与HPV表达情况。以阴道镜病理活检结果为金标准,分析HPV-DNA与HHV-6DNA检测诊断宫颈癌的一致性。比较HPV-DNA与HHV-6 DNA检测对宫颈癌的诊断效能。结果86例疑似宫颈癌患者经阴道镜病理活检确诊71例。κ检验分析结果显示,HPV-DNA、HHV-6 DNA检测诊断宫颈癌与阴道镜病理活检结果存在高度一致性(P<0.05)。HPV-DNA、HHV-6 DNA检测诊断宫颈癌的灵敏度(91.55%vs.88.73%)、特异度(86.67%vs.80.00%)与准确度(90.70%vs.87.21%)比较均无统计学差异(P>0.05)。结论HHV-6与HPV在宫颈癌患者宫颈组织中多呈现阳性表达,对宫颈癌患者行HHV-6与HPV检测可提高疾病筛查准确率。

宫颈高危型人乳头瘤病毒感染患者中医体质类型分布研究

目的:分析宫颈高危型人乳头瘤病毒(high risk human papilloma virus,HR-HPV)感染患者中医体质类型分布特点,为中医药调理体质防治宫颈HR-HPV感染提供依据。方法:选择2019年1月至2020年12月就诊于河南中医药大学第一附属医院妇科门诊及体检中心的420例宫颈HR-HPV感染者作为观察组,选择420例同时段宫颈HR-HPV检测阴性者为对照组。分析两组中医体质类型分布情况、观察组不同年龄段中医体质类型分布情况、观察组不同HR-HPV基因型别中医体质类型。结果:观察组中医体质分布依次为:痰湿质(30.50%)>湿热质(19.00%)>平和质(15.50%)>阳虚质(14.80%)>气虚质(10.00%)>阴虚质(5.90%)>瘀血质(2.70%)>气郁质(1.70%);对照组中医体质分布依次为:平和质(73.30%)>湿热质(8.40%)>阴虚质(5.70%)>痰湿质(4.50%)>气虚质(4.30%)>阳虚质/瘀血质(1.80%)>气郁质(0.20%)。两组中医体质类型比较,差异具有统计学意义(P<0.05),其中,痰湿质、湿热质、阳虚质、气虚质,两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.001)。观察组体质类型居前三位的是痰湿质、湿热质、阳虚质,占全部体质类型的64.30%。对照组平和质324例,占比73.50%,观察组平和质81例,占比15.50%,两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.001)。观察组中,痰湿质、阳虚质、阴虚质主要见于46~55岁,湿热质、气虚质、气郁质主要见于36~45岁,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组宫颈HR-HPV16、18型和非16、18型中医体质比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:痰湿质、湿热质、阳虚质为宫颈HR-HPV感染人群的易感体质;痰湿质、湿热质、阳虚质与年龄具有相关性,痰湿质多见于36~45岁,湿热质、阳虚质多见于46~55岁,HR-HPV基因型别与中医体质类型之间无明显相关性。

保妇康栓联合臭氧治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的应用效果

目的观察宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染采用保妇康栓联合臭氧治疗的应用效果。方法选取2018年3月至2020年12月在南昌大学第四附属医院妇科检查中HPV检测为阳性的120例患者作为研究对象,根据随机数字表法分为试验组(60例)和对照组(60例)。对照组采用保妇康栓治疗,试验组采用保妇康栓联合臭氧治疗,两组共治疗3个疗程。比较两组患者的临床疗效、HPV转阴率、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,白细胞介素-6(IL-6)水平、转化生长因子-β(TGF-β)水平和不良反应总发生率。结果试验组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组HR-HPV转阴率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组治疗后TNF-α、TGF-β水平低于对照组,IL-6水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对宫颈HR-HPV患者采用保妇康栓联合臭氧治疗,效果确切,能够提高HPV转阴率,且安全性较高,值得临床推广应用。

宫颈锥切术联合三元融合蛋白治疗宫颈HSIL合并高危型人乳头瘤病毒感染的临床疗效

目的:探讨宫颈锥切术联合三元融合蛋白(MBP-SERPINA-IFNκ,MSIK)治疗宫颈高级别鳞状上皮内病变(high-grade cervical lesions,HSIL)合并高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的临床效果。方法:选取2019年08月至2021年07月我院收治的186例HSIL患者,采用随机数字表法分为MSIK组(n=93)和对照组(n=93),两组均接受宫颈锥切术治疗,对照组术后非经期阴道推入干扰素α-2β凝胶,隔日一次,10次/疗程,MSIK组术后非经期阴道推入MSIK,14 d/疗程,均治疗3个疗程。比较两组患者治疗前后不同时间点TCT异常率及HR-HPV转阴率,比较两组治疗前后临床症状评分改变、治疗期间不良反应,比较两组治愈率及复发率。结果:随访期间两组HR-HPV转阴率呈升高趋势,且随访9、12个月两组HR-HPV转阴率均较随访3个月时升高(P<0.05);随访3、6、9、12个月时,MSIK组HR-HPV转阴率均高于对照组(P<0.05)。随访3、6、9、12个月,两组TCT异常率均明显低于治疗前,且MSIK组低于对照组(P<0.05)。治疗后两组临床症状评分较治疗前降低,且MSIK组更低(P<0.05)。MSIK治疗期间不良反应发生率为3.23%,低于对照组的10.75%(P<0.05)。MSIK组治愈率为97.85%,高于对照组的81.72%(P<0.05);随访12个月MSIK组无复发情况,与对照组复发率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈锥切术联合MSIK治疗HSIL合并HR-HPV感染可有效提高转阴率,且治疗效果确切、复发率低,值得临床推广。

荧光定量PCR技术检测生殖道人乳头瘤病毒6,11型结果分析

目的:了解人乳头瘤病毒6,11型(HPV6,11)的检出情况。方法:采用荧光定量PCR法对125例患者进行HPV6,11 DNA定量检测。结果:HPV6,11阳性率为32.00%(44/125);男性和女性阳性率分别为62.50%和6.56%;21～40岁年龄段患者占90.91%;2009年、2010年和2011年阳性检出率分别为55.56%、40.00%和27.78%,有下降趋势。结论:加强患者人乳头瘤病毒6,11型的检测,对其防治有重要意义。

连云港地区女性人乳头瘤病毒感染情况及基因型分布研究

目的分析连云港地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及基因型分布特点,以期为疫苗接种、宫颈癌防治提供参考。方法选取2020年1月至2022年12月在东海县人民医院妇科门诊就诊的8981例女性,均进行HPVDNA分型检测,分析HPV感染情况及基因型分布特点。结果连云港地区HPV总感染率为25.71%,高危型HPV感染率为21.01%,单一HPV感染率高于多重HPV感染率。高危型HPV基因型前5位分别为HPV16(5.78%)、HPV52(4.81%)、HPV58(3.29%)、HPV53(2.65%)、HPV51(2.09%),低危型HPV基因型以HPV42(2.41%)为主,其次是HPV81(2.07%)。年龄≤20岁和51~60岁年龄段中出现感染率峰值。结论连云港地区女性HPV感染以单一HPV感染为主,其中以HPV16和HPV52高危型HPV基因型为主。

高危型人乳头瘤病毒感染的宫颈病变患者治疗前后阴道微生态变化情况分析

目的:探讨宫颈病变患者治疗前后阴道微环境变化情况。方法:选取2021年9月-2022年12月于郑州大学第二附属医院就诊的确诊为高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染,阴道镜下宫颈活检结果为LSIL或HSIL,活检前及治疗后6个月均行阴道微生态及HPV检测的患者共194例,其中LSIL患者100例,HSIL患者94例。LSIL组患者采用干扰素药物治疗,HSIL组采用宫颈锥切术治疗。另选取同期于就诊的HPV检测及宫颈薄层液基细胞学检查(TCT)结果均为阴性者188例,作为对照组。分析治疗前后阴道微生态指标的变化情况和相关性。结果:治疗前LSIL组清洁度、白细胞数量、优势菌、Nugent评分异常率高于对照组(P<0.05),治疗后清洁度、白细胞数量、优势菌、Nugent评分、白细胞酯酶的异常率较治疗前均降低(P<0.05);治疗前HSIL组菌群密集度、菌群多样性、优势菌、Nugent、pH值异常率均高于对照组(P<0.05),治疗后菌群多样性、优势菌、pH值、白细胞酯酶的异常率较治疗前均明显降低(P<0.05);治疗后LSIL组HR-HPV转阴32例(32.0%),HSIL组HR-HPV转阴76例(80.9%);治疗后HR-HPV阳性组优势菌、Nugent评分、pH值、过氧化氢的异常率均高于转阴组(P<0.05)。结论:阴道微生态与宫颈病变的发生、发展及转归密切相关。

宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的中医证候特征研究

【目的】探究宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染者中医证候特征,为临床辨证论治提供参考。【方法】收集2020年9月至2022年10月于天津中医药大学第二附属医院妇科就诊行HPV检测确诊为宫颈HR-HPV感染者进行中医证候调查,总结其病位、病性特点及证型分布。【结果】宫颈HR-HPV感染者的临床特征主要以阴道分泌物异常为主,占63.40%。病位证素为胞宫、脾、肝、肾、经络、胃、心神、心,其中以胞宫、脾、肝最多见,分别占67.00%、58.80%和55.80%。病性证素为湿、热、气滞、血瘀、气虚、阳虚、阴虚、痰、寒,其中以湿、热、气滞、血瘀最多见,分别占66.40%、56.60%、36.00%和31.80%。各年龄段病位证素均以胞宫为主,病性证素均以湿、热为主。双病位证素以胞宫-脾最常见,三病位证素以胞宫-脾-肝最常见。双病性证素以湿-热最常见,三病性证素以湿-热-血瘀最常见。根据聚类分析结果,结合临床实际,发现宫颈HR-HPV感染者的主要证型分布为湿热瘀阻、肝郁气滞、心肾不交、脾胃阳虚。【结论】宫颈HR-HPV感染者的中医病位证素主要在胞宫,兼脾、肝、肾多脏腑合病;病性证素以湿、热为主,呈现虚实错杂的特点;中医证型主要是湿热瘀阻、肝郁气滞、心肾不交、脾胃阳虚。

潍坊地区18237例女性人乳头瘤病毒感染情况及不同年龄感染者病毒基因型分布特点

目的探讨潍坊地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及不同年龄感染者病毒基因型分布特点,为该地区女性优化宫颈癌筛查和防控提供依据。方法选取潍坊市某三甲医院进行HPV检测的18237例女性作为研究对象,其中≤25岁1684例,26~35岁5374例,36~45岁组4629例,46~55岁组4459例,>55岁组2091例。采用PCR-反向点杂交分型技术进行HPV型别检测,分析HPV感染情况和基因型的分布,比较各年龄组女性HPV感染率差异。结果HPV总感染率为25.09%,其中单一感染和多重感染分别占70.65%和29.35%。高危型HPV(HR-HPV)的感染率为21.43%,占HPV感染者的85.42%,检出率居前5位的依次为HPV16(4.33%)、HPV52(4.30%)、HPV58(2.93%)、HPV53(2.67%)和HPV51(2.32%);低危型HPV(LR-HPV)的感染率为6.97%,检出率较高的为HPV81(2.36%)、HPV42(2.05%)和HPV43(1.45%)。不同年龄组HPV总感染率、HR-HPV和LR-HPV的感染率比较均存在统计学差异(P均<0.05)。各年龄组HPV感染率呈“U”型分布,≤25岁组感染率最高,其次是>55岁组。10种主要HR-HPV基因型中,有9种感染率在各年龄组间比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论潍坊地区女性HPV感染率以单一感染、HR-HPV基因型感染为主,常见的5种HR-HPV基因型为HPV16、HPV52、HPV58、HPV53和HPV51;不同年龄HPV感染者具有不同的基因型分布特点。

马源人乳头瘤病毒115型E6基因的遗传变异分析

乳头瘤病毒(PV)是人类和动物的一种重要病原体,具有严格的宿主特异性。已报道14种PV可以感染马,其中在我国新疆地区发现马携带马乳头瘤病毒1型(EcPV-1)、人乳头瘤病毒18型(HPV-18)和HPV-23。为进一步调查新疆地区马匹携带PV的类型,本研究利用高通量测序和病毒宏基因组学技术检测伊犁、昌吉3个规模化马场和乌鲁木齐1个马术俱乐部395份样品(205份鼻拭子、140份粪便样品及50份马流产胎儿肺组织样品)携带PV的类型。病毒组学分析显示,马可能携带HPV-115。根据注释到的HPV-115 E6基因序列,设计特异性引物,对所有马及人鼻拭子样品进行E6基因的PCR检测,结果显示,伊犁地区B场马鼻拭子样品中的HPV-115阳性率为7.3%(6/82),其他马场及马术俱乐部的纯血马和汗血马均为阴性,表明HPV-115可以跨种感染马。另外该病毒在B场马流产胎儿肺组织样品中的阳性率为46%(23/50),表明马感染HPV-115可能导致流产。进一步调查显示,HPV-115在马场工人和有阳性马场接触史的人群鼻拭子样品中的阳性率为59.5%(25/42),而无马匹接触史人员鼻拭子样品则呈阴性(0/20),表明该马源HPV-115有经马感染人的风险。同源性分析结果显示本研究测序获得的11株HPV-115 E6基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.0%~100%、98.1%~100%;与人源HPV-115参考株GC02 E6基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.4%~99.0%、97.1%~99.0%;与EcPV E6基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为32.4%~43.8%、34.6%~45.4%。E6基因的遗传进化分析显示本研究鉴定的11株马源和人源HPV-115形成独立进化分支。本研究首次报道HPV-115可能导致马流产,且其具备经马感染人的风险,该结果为马源HPV感染的防制提供了参考依据。

高危型人乳头瘤病毒感染与宫颈癌患者临床特征、免疫组化指标及预后的关系

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染与宫颈癌患者临床特征、免疫组化指标及预后的关系。方法选取120例宫颈癌患者,其中HR-HPV阴性40例,HR-HPV阳性80例。比较HR-HPV阴性和HR-HPV阳性宫颈癌患者的临床特征、免疫组化指标(p16、Ki-67、p53)及预后。结果HR-HPV阴性和HR-HPV阳性宫颈癌患者的年龄、病理类型、淋巴结转移情况、分化程度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。HR-HPV阴性宫颈癌患者p16、Ki-67阳性率及5年生存率均低于HR-HPV阳性患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论相较于HR-HPV阳性宫颈癌患者,HR-HPV阴性宫颈癌患者发病年龄更低、腺癌比例更高、更容易发生淋巴结转移、分化程度更低、p16和Ki-67阳性率更低、预后更差。

皮肤科门诊男性患者人乳头瘤病毒感染情况及分型

目的分析皮肤科门诊男性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及基因亚型分布,为防治男性HPV感染提供参考。方法回顾性调查2022年1月-2023年3月在某院皮肤科门诊就诊并进行HPV检测的男性患者,并将全部受检患者分为5组:病毒性疣组、皮炎皮疹组、泌尿道感染组、包皮阴茎炎组、无症状组。统计分析患者年龄组成、临床诊断、症状类型与基因型分布之间的关系。结果共有1035例男性患者进行了HPV检测,567例检测阳性,阳性率54.78%。其中病毒性疣组286例,皮炎皮疹组164例,泌尿道感染组6例,包皮阴茎炎组109例,无症状组470例。21种HPV亚型均被检出,检出率位于前3位的亚型依次是6型(17.97%)、11型(12.37%)、52型(8.70%)。单一型HPV感染阳性率为29.86%,占54.50%。不同年龄组的感染阳性率、低危感染阳性率和多重混合型感染阳性率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。<20岁年龄组感染阳性率高于20~<30岁组、30~<40岁组和40~<50岁组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。阳性患者中199例(35.10%)无临床症状,368例(64.90%)有临床症状,主要表现为病毒性疣(40.74%,231例)。病毒性疣组中HPV阳性患者以低危型为主,占80.95%;包皮阴茎炎组中HPV阳性患者以高危型为主,占84.78%;无症状组中HPV阳性患者以高危型感染为主,占86.43%。结论皮肤科门诊男性HPV感染以单一型感染为主,低危型感染临床诊断主要表现为病毒性疣,高危型感染主要表现为包皮阴茎炎,无症状组中阳性感染者以高危型为主。

新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中乳头瘤病毒16型E6基因的克隆和序列分析

为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其进行基因全序列分析 .PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为 82 35 % (14/17) ;测序结果显示 ,新疆株HPV16E6基因全长 45 6bp ,大小与德国标准株一致 .E6基因的第 2 47位碱基发生T→G突变 ,并由此引起所编码的氨基酸亦发生改变 .上述结果表明 ,中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中HPV16E6的基因结构与德国标准株HPV16E6基因之间存在差异 .

人乳头瘤病毒16型E6、E7反义RNA对人宫颈癌SiHa细胞的恶性逆转作用

背景与目的:人乳头瘤病毒16型(humanpapillomavirus16,HPV16)的早期基因E6、E7可分别诱导p53的泛素化降解和pRb的高磷酸化失活,与宫颈癌的发生发展关系密切。本研究通过真核表达载体介导HPV16型E6、E7基因反义RNA在SiHa细胞中的表达,探讨反义RNA能否降低E6、E7基因的表达和诱导细胞凋亡。方法:利用pEGFP构建HPV16型E6、E7基因反义RNA的真核表达载体并转染SiHa细胞,利用RT-PCR和Westernblot技术检测转染后E6、E7基因的mRNA和蛋白的变化,利用MTT法检测SiHa细胞转染后细胞增殖活性,利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡情况。结果:转染携带HPV16型E6、E7反义基因的质粒后,SiHa细胞的E6、E7基因的mRNA和蛋白表达均明显下调;MTT结果显示转染后细胞的增殖活性(0.50±0.05)与转染空载体细胞(1.01±0.06)和未转染细胞(1.28±0.06)比较明显降低(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示转染后细胞凋亡率(59.3±11.3)%与转染空载体细胞(9.4±1.8)%和未转染细胞(2.1±0.4)%比较有显著性差异(P<0.05)。激光共聚焦显微镜结果示转染后细胞凋亡明显增多。结论:HPV16型E6、E7基因反义RNA可降低宫颈癌细胞中E6、E7癌基因的表达,诱导宫颈癌细胞凋亡。

干扰素联合解毒祛湿汤外洗对高危型人乳头瘤病毒感染患者自然转归、阴道局部免疫状态的影响

目的:探讨干扰素(INF)联合解毒祛湿汤外洗对高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染女性患者自然转归和阴道局部免疫状态的影响。方法:选取100例HR-HPV感染女性患者为研究对象,根据治疗方式不同分为对照组和研究组,每组各50例。对照组患者给予常规INF治疗;研究组患者给予INF联合解毒祛湿汤外洗治疗,疗程均为3个月。比较两组患者临床疗效、中医证候评分、HR-HPV转阴率、病毒载量水平、炎性因子[白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)]水平、阴道灌洗液人防御素5(HD-5)、人防御素2(HBD-2)水平及不良反应发生情况。方法:研究组患者临床有效率为高于对照组的(92.00%vs.76.00%,P<0.05)。治疗3个月后,研究组患者带下量多、体倦乏力、带下质稀积分低于对照组(P<0.05);HR-HPV转阴率高于对照组(82.00%vs.56.00%,P<0.05);病毒载量水平低于对照组(P<0.05);两组患者IL-12、IFN-γ水平均升高(P<0.05),且研究组高于对照组(P<0.05);IL-4、HD-5、HBD-2水平均降低(P<0.05),且研究组低于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:INF联合解毒祛湿汤外洗治疗HR-HPV感染患者效果好,能促进病毒的清除,改善患者的自然转归,并有助于恢复患者阴道局部免疫状态,减轻炎症反应。