液基薄层细胞学检查联合人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中的价值分析

目的探讨薄层液基细胞学检查(thinprep cytology test,TCT)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV) E6/E7mRNA检测在宫颈疾病筛查中的应用效果。方法选取538例患者作为研究对象,所有患者均行TCT、HPV E6/E7检测和阴道镜下宫颈多点活检,比较单独使用TCT或HPV E6/E7 mRNA以及联合TCT和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中的诊断价值。结果以病理学检查作为检测金标准,TCT和HPV E6/E7这两种检测方法对于宫颈病变均具有一定的筛检率,TCT检测的灵敏度66.56%,特异度为53.57%,HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏度74.84%,特异度为77.68%,TCT联合HPV E6/E7mRNA检测的灵敏度和特异度分别为99.68%和39.29%。结论 TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中可大幅度提高灵敏度,降低临床漏诊率,具有临床筛查价值。

信号诱导增殖相关蛋白1和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:Western blot检测宫颈癌C33A、HT3、SiHa、HeLa和CaSki细胞株中HPV16/18E6和SIPA1蛋白表达;免疫组织化学Envi-sion法检测正常宫颈组织(40例)和宫颈癌组织(174例)石蜡标本中HPV16/18E6和SIPA1蛋白;分析SIPA1和HPV16/18E6相互之间及其与宫颈癌盆腔淋巴结转移之间的关系。结果:宫颈癌细胞系中SIPA1与HPV16/18E6表达呈负相关。SIPA1在正常宫颈组织和宫颈癌组织中阳性率分别为87.5%和58.6%,差异有高度统计学意义(χ2=11.78,P=0.001);SIPA1蛋白在有和无盆腔淋巴结转移时阳性率分别为19.0%和71.2%,差异有高度统计学意义(χ2=21.45,P=0.000),且SIPA1阴性者发生淋巴结转移风险高于阳性者(OR=5.011,95%CI2.311～10.866,P<0.01)。HPV16/18E6在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的阳性率分别为30.0%和79.3%,差异有高度统计学意义(χ2=37.72,P=0.000);HPV16/18E6在有和无淋巴结转移时阳性率分别为97.6%和73.5%,差异有高度统计学意义(χ2=11.31,P=0.001),HPV16/18E6阳性者淋巴结转移风险高于阴性者(OR=14.794,95%CI1.960～111.634,P<0.01)。宫颈癌组织中SIPA1与HPV16/18E6蛋白呈负相关(r=-0.249,P<0.001)。结论:SIPA1蛋白表达与HPV感染有关,HPV16/18E6有抑制SIPA1表达的作用,SIPA1在抑制宫颈癌的淋巴结转移中发挥着重要作用,可作为宫颈癌盆腔淋巴结转移的早期预测因子。

16型人乳头瘤病毒E6、E7蛋白和端粒酶在宫颈上皮内瘤变发展中的表达及意义

目的研究16型人乳头瘤病毒(HPV16)E6、E7蛋白和端粒酶在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织的表达,探讨其与宫颈癌前病变恶性进展间的关系,为寻找预测宫颈癌前病变转归方向的分子指标做一探索。方法采用免疫组织化学EnVision二步法检测30例原发性浸润性宫颈癌(ICC组,n=30)、CIN[CINⅠ-Ⅱ组,n=60;CINⅢ(含原位癌)组,n=30]、正常宫颈组织标本(正常组,n=10)中HPV16E6、E7蛋白和端粒酶的表达。结果 HPV16E6、E7蛋白和端粒酶在正常组、CINⅠ-Ⅱ组、CINⅢ组和ICC组中的阳性表达均呈逐级增高趋势。HPV16E6蛋白的表达:ICC组高于正常组,CINⅢ组高于正常组、CINⅠ-Ⅱ组,差异均有统计学意义(P<0.05);HPV16E7蛋白的表达:ICC组、CINⅢ组高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);端粒酶的表达:ICC组高于CINⅢ组,CINⅢ组高于CINⅠ-Ⅱ组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HPV16E6与HPV16E7蛋白、HPV16E6蛋白与端粒酶、HPV16E7蛋白与端粒酶的表达呈正相关(r=0.272,P<0.05;r=0.279,P<0.05;r=0.376,P<0.01)。结论 HPV16E6、E7蛋白和端粒酶随宫颈病变CIN的升级其阳性表达率、表达强度呈逐渐递增趋势。在宫颈癌变过程中HPV16E6、E7蛋白和端粒酶的阳性表达均呈正相关。HPV16E6、E7蛋白和端粒酶作为CIN的预后因子还尚待进一步研究。

参芪排毒汤对宫颈癌组织人乳头瘤病毒E6/E7、P53和PRb基因蛋白表达的影响

目的:研究参芪排毒汤对宫颈癌组织人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA、肿瘤抑制基因(P53)、视网膜母细胞瘤蛋白(PRb)表达水平的影响与意义。方法:选取112例宫颈癌患者进入研究,按随机数字表划分成对照组与治疗组,两组均给予新辅助化疗联合腹腔镜宫颈癌根治术治疗,治疗组在新辅助化疗的同时给予参芪排毒汤口服;术前评估两组临床疗效,统计不良反应发生情况,术中取癌旁健康组织与病灶病理组织样本检测HPV E6和E7 mRNA表达水平并计算E6/E7比值,检测样本中P53、PRb表达水平;随访至少3年,比较两组患者的3年无病情进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS),分析新辅助化疗后病理组织中HPV E6/E7、P53、PRb表达水平对PFS、OS的预测价值。结果:治疗组缓解率为83.93%,对照组为62.50%,治疗组缓解率高于对照组(P<0.05);治疗组不良反应发生率为12.50%,对照组为17.86%,差异比较无统计学意义(P>0.05);化疗后两组患者癌旁组织中HPV E6/E7比值比较,差异无统计学意义(P>0.05),病理组中HPV E6/E7表达高于治疗组(均P<0.05),两组癌旁与病理组织中P53、PRb比较,差异有统计学意义(均P>0.05);化疗后宫颈癌组织中HPV E6/E7、P53、PRb表达水平对于患者无病情进展生存时间PFS、OS均具有较高预测价值(AUC>0.9,P<0.05);治疗组患者PFS、OS均长于对照组(均P<0.05)。结论:在腹腔镜宫颈癌根治术前新辅助化疗中联合应用参芪排毒汤,能够提高术前疗效,抑制宫颈癌组织中HPV E6/E7表达、提升P53、PRb表达水平,从而起到延长患者无病情进展生存时间与总生存时间,改善预后的作用。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA联合薄层液基细胞学检测对宫颈癌前病变筛查的临床价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)E6/E7 mRNA联合薄层液基细胞学(TCT)检测对筛查宫颈癌前病变的效果。方法选择1 543例接受宫颈癌前病变筛查的受试者,分别采用全自动核酸检测系统及TCT检测宫颈标本的HR-HPV E6/E7 mRNA及癌前病变,分析两种方法筛查宫颈癌前病变的检出率和一致性;以病理学活检为金标准,对比两种方法筛查宫颈癌前病变的效果。结果两种方法的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05),但两种方法的一致性一般(P<0.05)。两种联合检测的灵敏度高于单独TCT检测,而特异度低于两者单独检测。联合检测的阴性预测值增高,而阳性预测值降低。结论 HR-HPV E6/E7 mRNA检测联合TCT检查筛查宫颈癌前病变的价值更高。

配对盒家族基因1甲基化与人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测在子宫颈病变患者诊断中的应用

目的:分析配对盒家族基因1(PAX1)甲基化检测与人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在子宫颈癌及癌前病变患者诊断中的临床应用价值。方法:回顾性分析2018年3月至2019年9月在郑州大学第一附属医院就诊的子宫颈病变406例患者。根据病理检查结果分为4组:子宫颈炎组(145例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组(76例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(119例)和子宫颈癌组(66例)。所有患者均行PAX1甲基化检测,其中同时行HPV E6/E7mRNA检测的患者有159例,比较两种检测方法在诊断子宫颈癌及癌前病变(高级别子宫颈上皮内瘤变)患者中的诊断效能。结果:子宫颈炎组、LSIL组、HSIL组、子宫颈癌组的PAX1甲基化率分别为10.3%、13.2%、39.5%、83.3%,HPV E6/E7mRNA阳性率分别为50.0%、68.6%、84.0%、87.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。两种方法单独用于诊断子宫颈癌及癌前病变时,HPV E6/E7mRNA的敏感度为86.36%,特异度为43.01%;PAX1甲基化的敏感度为55.14%,特异度为88.69%;两者联合检测时敏感度为80.30%,特异度为88.18%。结论:PAX1甲基化在诊断子宫颈癌及癌前病变患者中具有较高的特异度,且在联合HPV E6/E7mRNA检测时具有更高的临床应用价值。

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA bDNA检测在宫颈疾病筛查中的应用

目的:评价人乳头瘤病毒E6/E7mRNA bDNA检测在宫颈疾病筛查中的应用价值。方法:本文拟选取宫颈癌筛查中疑似宫颈疾病患者,对其均进行人乳头瘤病毒E6/E7mRNA bDNA检测和TCT检测以及宫颈病理学检查,以病理学结果分为正常组、CIN1、CIN2、CIN3、宫颈癌共五组,对比HPV E6/E7mRNA bDNA、TCT两种检测方法在该五组中的准确度及假阳性率。结果:人乳头瘤病毒E6/E7mRNA bDNA检测在对宫颈癌筛查中准确度较TCT检测方法均高(P<0.05),假阳性率亦低于TCT检测方法(P<0.05),均有统计学意义。结论:人乳头瘤病毒E6/E7mRNA bDNA检测是目前宫颈癌筛查中较好的方法,具有较好的准确度,假阳性率亦低,可能更能评估宫颈癌的发病风险。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7感染与宫颈病变组织中P16、ki67的相关性研究

目的探讨宫颈病变组织中P16、ki67蛋白表达与高危型人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA的关系。方法收集上海市嘉定区妇幼保健院经活检或手术切除取得的874例宫颈病变患者组织,其中宫颈癌6例、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)46例、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)199例、宫颈炎症223例。定性检测各基因亚型、HPV E6/E7 mRNA及组织P16、ki67蛋白表达。结果宫颈炎症、LSIL、HSIL及宫颈癌患者中HPV E6/E7 mRNA表达阳性率、P16、ki67蛋白表达阳性率及HPV感染阳性率均随宫颈病变进展呈上升趋势(P<0.05)。LSIL、HSIL患者中HPV E6/E7 mRNA与P16、ki67蛋白表达均呈正相关(r=0.221、0.332;0.490、0.526,P<0.05)。P16阳性、ki67阳性是HPV E6/E7 mRNA阳性的独立危险因素(P<0.05)。结论HSIL、LSIL患者中P16、ki67蛋白表达与HPV E6/E7 mRNA呈显著相关性。

肿瘤抑制基因p16/增殖细胞核抗原Ki67双染人乳头瘤病毒E6/E7及液基薄层细胞学联合检测在宫颈癌早期筛查中的价值

目的探讨肿瘤抑制基因p16(p16)/增殖细胞核抗原Ki67(Ki67)双染、人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7及液基薄层细胞学(TCT)联合在宫颈癌早期筛查中的价值。方法选取2019年3月—2021年3月在杭州市萧山区第三人民医院就诊的宫颈病变患者457例,其中包括宫颈炎315例,CIN 112例,宫颈癌30例。采用自动制片机TCT检查,全自动免疫组织化学染色仪检测p16/Ki-67双染,全自动分子诊断仪进行HPV E6/E7 mRNA检测。结果CIN患者p16/Ki-67双染、HPV E6/E7及TCT阳性表达高于宫颈炎患者(χ^(2)=86.427、65.569、199.481,均P<0.05);宫颈癌患者p16/Ki-67双染、HPV E6/E7及TCT阳性表达高于CIN患者(χ^(2)=59.877、48.058、13.256,均P<0.05)。宫颈癌患者p16/Ki-67双染、HPV E6/E7及TCT阳性表达高于宫颈炎患者(χ^(2)=200.45、150.538、156.718,均P<0.05)。CIN、宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA表达均高于宫颈炎患者;宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA表达高于CIN患者(F=84.164,P<0.05)。与p16/Ki-67双染、HPV E6/E7及TCT相比,3项联合对宫颈癌的筛查价值较高(χ^(2)=3.742,P<0.05)。结论p16/Ki-67双染、HPV E6/E7及TCT 3项联合检测具有较高的灵敏度、特异度,提高早期宫颈癌筛查价值。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA联合液基细胞学检查在宫颈病变诊断中的应用

目的探讨高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA(HR-HPV E6/E7 mRNA)联合液基细胞学检查(TCT)在宫颈病变诊断中的应用价值。方法选择2015年6月至2016年5月在台州市第一人民医院妇科进行宫颈病变检查的280例女性为研究对象,其中炎症组183例,宫颈上皮内瘤变Ⅰ(CINⅠ)组42例,CINⅡ组33例,CINⅢ组15例和宫颈癌(SCC)组7例,并进行HR-HPV E6/E7 mRNA、高危型人乳头瘤病毒DNA(HR-HPV DNA)检测和病理活检,以病理活检为金标准,比较各组间HR-HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV DNA的阳性检出率。用SPSS 16.0统计软件进行分析,组间比较用χ~2检验或Fisher确切概率法检验。结果 CIN组和SCC组HR-HPV E6/E7 mRNA、HR-HPV DNA阳性率(CINⅠ组分别为52.38%和64.29%,CINⅡ组分别为84.85%和87.88%,CINⅢ组分别为93.33%和93.33%,SCC组分别为100.00%和100.00%)均显著高于炎症组(分别为14.75%和34.97%),CINⅡ、CINⅢ和SCC组阳性率显著高于CINⅠ组,差异均有统计学意义(P<0.05)。炎症组HR-HPV DNA阳性率显著高于HR-HPV E6/E7 mRNA,差异有统计学意义(P<0.05)。HRHPV E6/E7 mRNA特异度和阳性预测值显著高于HR-HPV DNA,差异有统计学意义(P<0.01)。单独使用HR-HPV E6/E7mRNA检测宫颈病变灵敏度为73.20%,单独使用TCT检测灵敏度为81.44%,两者串联检测灵敏度为92.78%,显著高于单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HR-HPV E6/E7 mRNA检测在CINⅡ、CINⅢ和SCC组中具有较高的敏感度和特异度,HR-HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测可提高宫颈病变检出率。

人乳头瘤病毒E6、E7基因致癌机制及临床应用进展

寓颈癌足妇科最常见的恶性肿瘤之一，其发病率仪次于乳腺癌而他居第2位。高危人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的持续感染是发展成宫颈癌的主要因素。其中，HPV E6、E7基因的表达是一个始发因素，当其表达失去抑制后，将逐步导致宫颈癌。

Aptima法人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在子宫颈癌筛查中的流行病学分析及其诊断价值

目的通过Aptima法检测人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA,研究其分型和定量检测结果在不同年龄和子宫颈活检中的分布情况,探讨其在子宫颈病变中的诊断价值。方法选取2019年1月至2020年1月于郑州大学第三附属医院行HPV E6/E7 mRNA检测的患者为研究对象,收集HPV E6/E7 mRNA阳性患者的年龄、子宫颈液基细胞学(TCT)以及活检结果。统计学分析HPV E6/E7 mRNA分型以及定量检测结果。结果在11 051例行HPV E6/E7 mRNA检测的患者中,阳性率为16.5%。不同型别间E6/E7 mRNA的表达量存在统计学差异(P<0.0001),其中以HPV16/18/45型感染表达量最高。不同TCT结果组间比较HPV E6/E7 mRNA表达量差异有统计学意义(P<0.0001)。随着子宫颈病变严重程度的增加,E6/E7 mRNA表达量无明显增加趋势。结论 HPV E6/E7mRNA定量检测结果与HPV感染型别有关,以HPV16、18/45型感染为主,且以16/18/45型混合感染后E6/E7mRNA表达量更高,但其表达量对诊断子宫颈高级别病变的准确率不高,纠正了目前临床上对HPV E6/E7 mRNA定量检测结果与子宫颈病变级别之间的误区。

核转录因子κB家族蛋白及HPV E6/E7 mRNA与早期宫颈癌复发的关系

目的 探讨核转录因子κB(NF-κB)家族蛋白表达及人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA水平与早期宫颈癌复发的关系。方法 收集2017年1月至2020年12月在开滦总医院妇产科接受宫颈癌根治术的163例早期宫颈癌患者的临床资料,设为宫颈癌组;另收集医院同期收治的101例非宫颈癌患者的临床资料,设为非宫颈癌组,根据病理结果分为3个亚组:对照组(子宫肌瘤患者,n=31)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)组(n=26)、高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)组(n=44)。比较宫颈癌组与非宫颈癌组及非宫颈癌3个亚组间宫颈组织中c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA表达情况,分析c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA在不同临床病理特征宫颈癌患者中的差异性表达,采用Kaplan-Meier法分析c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA表达与宫颈癌术后无复发生存的关系,Cox法分析宫颈癌术后复发的影响因素。结果 宫颈癌组c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P<0.05),HSIL组c-Rel、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P<0.05),LSIL组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于对照组(P<0.05)。c-Rel表达与脉管浸润程度有关,p65表达与FIGO分期、宫旁浸润及淋巴结转移有关,p50表达与间质浸润有关,HPV E6/E7mRNA表达与肿瘤直径、宫旁浸润及间质浸润有关(P<0.05)。随访36(12~75)个月期间,163例宫颈癌患者复发率为19.63%(32/163),Kaplan-Meier结果显示,c-Rel、p50阳性患者与阴性患者的无复发生存率差异无统计学意义(LogRankχ^(2)=0.820、3.181,P=0.367、0.075),p65、HPV E6/E7 mRNA阴性患者无复发生存率分别优于阳性患者(LogRankχ^(2)=10.597、4.474,P=0.001、0.034)。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期IIa期、淋巴结转移、p65阳性、HPV E6/E7 mRNA阳性可增加宫颈癌术后复发风险(HR=1.617、1.506、3.180、1.460,P<0.05)。结论 转录因子NF-κB家族核表达、HPV E6/E7 mRNA表达在宫颈病变进展过程中存在差异,其表达水平与早期宫颈癌多种病理特征有关,且p65、HPV E6/E7 mRNA可影响宫颈癌术后复发,可作为评估早期宫颈癌术后复发的可靠参考指标。

HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈高级别病变诊断中的价值分析

目的研究宫颈高级别病变诊断中人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7信使核糖核酸(mRNA)的检测价值。方法3200例进行宫颈癌筛查的患者,随机分为对照组与研究组,每组1600例。对照组行HPV脱氧核糖核酸(DNA)检测,研究组行HPV E6/E7 mRNA检测。比较两组患者的检测结果及病理检查结果。对照组HPV DNA阳性患者与研究组HPV E6/E7 mRNA阳性患者均进行阴道镜检查、病理组织学检查。在对照组及研究组阳性患者中分别抽取185例患者,并分别行HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA检测。比较两种检测方法的检测结果、病理检查结果及诊断高级别宫颈病变的准确率、特异度、灵敏度。结果对照组患者HPV DNA检测结果阳性415例,阳性检出率为25.94%;研究组患者HPV E6/E7 mRNA检测结果阳性400例,阳性检出率为25.00%。两组的阳性检出率比较,不具有统计学意义(P>0.05)。研究组高级别宫颈上皮内病变患者72例,阳性率为4.50%(72/1600);对照组高级别宫颈上皮内病变者76例,阳性率为4.75%(76/1600)。两组高级别宫颈上皮内病变阳性率比较,不具有统计学意义(P>0.05)。370例患者同时进行HPV DNA、HPV E6/E7 mRNA检测及阴道镜、病理组织学检查。阴道镜及病理组织学检查结果显示阳性88例,阴性282例。HPV DNA检测结果显示,阳性188例,阴性182例;HPV E6/E7 mRNA检测结果显示,阳性168例,阴性202例。HPV DNA检测的特异度、灵敏度、准确率分别为56.38%、73.86%、60.54%,HPV E6/E7 mRNA检测的特异度、灵敏度、准确率分别为67.73%、87.50%、72.43%。HPV E6/E7 mRNA检测的特异度、灵敏度、准确率均高于HPV DNA检测,存在明显差异(P<0.05)。结论对于高级别宫颈病变患者而言,HPV E6/E7 mRNA检测诊断效能高于HPV DNA检测,是宫颈癌筛查患者的新型分流方式,为临床中应用价值较高的检查手段。

人乳头瘤病毒6b型E7基因的克隆和表达

目的 克隆人乳头瘤病毒 6b型E7(humanpapillomavirus 6bE7)基因 ,构建原核表达载体 ,并进行蛋白表达和纯化。方法 将HPV 6bE7基因经PCR扩增和亚克隆 ,与GST原核表达载体pGEX 4T 2重组 ,转化E .coliP2 3 92 菌表达蛋白 ,经GlutathioneSepharose 4B亲和层析纯化GST HPV 6bE7融合蛋白。结果 限制性酶切和DNA测序表明 ,HPV 6bE7DNA正确克隆于 pGEX 4T 2多克隆位点。经IPTG诱导表达的GST HPV 6bE7融合蛋白主要存在于可溶性上清。经亲和层析 ,每升诱导菌回收 8.4mg融合蛋白 ,10 %SDS PAGE分析融合蛋白表观分子量约 3 7kDa。结论 成功构建了HPV 6bE7基因原核表达载体 ,并大量表达和纯化了GST HPV

人乳头状瘤病毒16型E6蛋白在食管癌中的表达及与Cyclin D1的关系

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6蛋白在食管癌中的表达及与细胞周期蛋白Cyclin D1的关系。方法采用免疫组织化学法检测50例食管鳞癌组织、30例食管癌旁组织及30例正常食管黏膜组织中HPV 16型E6蛋白的表达情况,采用Western blot方法检测Cyclin D1在HPV 16型E6蛋白阳性及阴性的食管鳞癌组织中的表达水平。结果食管鳞癌组织中HPV 16型E6蛋白的阳性表达率高于正常食管黏膜组织(P<0.05),与食管癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤最大径较大者、肿瘤浸润较深者、淋巴结转移者HPV 16型E6蛋白的阳性表达率均较高(P<0.05)。HPV 16型E6蛋白阳性的食管鳞癌组织中Cyclin D1蛋白表达量高于阴性者(P<0.05)。结论 HPV 16型E6蛋白可能促进了食管癌的生长和恶化,并与Cyclin D1有一定的相关性,可作为食管癌的预后评估因子,为临床治疗提供一定的参考依据。

宫颈组织人乳头状瘤病毒E6/E7 mRNA ATG-12 Tie-1表达情况及与鳞状上皮内病变病理分级的相关性

目的 分析宫颈组织人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA、自噬相关蛋白12(ATG12)、酪氨酸激酶受体1(Tie-1)表达情况,及与子宫颈鳞状上皮内病变(SIL)病理分级的相关性。方法 将2017年1月至2020年12月在南阳市中心医院保存宫颈活检组织或手术切除宫颈组织的228例患者按2014年WHO女性下生殖道肿瘤分类标准分组,分别纳入慢性宫颈炎组(n=34)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组(n=20)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(n=55)、宫颈鳞癌(CSCC)组(n=119)。通过分支DNA杂交实验(bDNA)法检测宫颈组织HPVE6/E7 mRNA表达情况,利用免疫组化法检测宫颈组织ATG12、Tie-1表达情况,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析HPV E6/E7mRNA、ATG-12、Tie-1表达情况对HSIL+(HSIL、CSCC)的筛查价值。结果 HSIL组、CSCC组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于慢性宫颈炎组,ATG-12阳性率及Tie-1阳性率低于慢性宫颈炎组,差异均有统计学意义(P<0.05);LSIL组与慢性宫颈炎组,差异无统计学意义(P<0.05);HSIL组、CSCC组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于LSIL组,ATG-12阳性率及Tie-1阳性率低于LSIL组(P<0.05),CSCC组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于HSIL组,ATG-12阳性率及Tie-1阳性率低于HSIL组(P<0.05);ROC曲线显示,单一HPV E6/E7 mRNA、ATG-12、Tie-1筛查HSIL+时,Tie-1阴性的曲线下面积(AUC)最大,筛查灵敏度为78.16%,特异度为83.33%,3者联合筛查HSIL+的AUC值上升至0.856,灵敏度、特异度分别为89.66%、81.48%,高于HPV-E6/E7 mRNA阳性、ATG-12阴性、Tie-1阴性筛查的AUC值(P<0.05)。结论 不同SIL病理分级的宫颈组织HPVE6/E7mRNA、ATG12、Tie-1阳性表达率存在差异,较单纯HPVE6/E7mRNA筛查HSIL+,联合ATG12或Tie-1检测可提升筛查特异度。

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在小于30岁宫颈癌筛查中的临床分析

目的分析人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测在小于30岁宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法回顾性分析2020年1月至2021年6月大连市妇女儿童医疗中心(集团)妇产院区330例行薄层液基细胞学检查(TCT)轻度异常<30岁患者的临床资料。其中,行HPV DNA分型检测165例(DNA组),行HPV E6/E7 mRNA检测165例(mRNA组)。比较两组患者宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅱ及以上(CINⅡ+)阳性情况,及不同HPV高危型患者CINⅡ+阳性情况。结果mRNA组HPV高危型阳性率明显低于DNA组[32.7%(54/165)比47.9%(79/165)],差异有统计学意义(χ^(2)=7.87,P<0.01)。DNA组与mRNA组HPV高危型阳性患者CINⅡ+发生率比较差异无统计学意义[45.6%(36/79)和59.3%(32/54),P>0.05]。DNA组与mRNA组HPV 16、18或45型阳性患者CINⅡ+发生率比较差异无统计学意义[38.5%(10/26)和6/10,P>0.05]。mRNA组非HPV 16、18或45型阳性患者CINⅡ+发生率明显高于DNA组[60.9%(28/46)比41.3%(26/63)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论在年轻女性中,HPV E6/E7 mRNA检测在不增加漏诊率的情况下,起到重要的分流作用,且对非HPV 16、18或45感染患者的CINⅡ+预测价值更高。

抗人乳头瘤病毒16型E6基因核酶对宫颈癌CaSKi细胞生长和端粒酶活性的影响

目的研究抗HPV16E6核酶(Ribozyme)对宫颈癌CaSKi细胞生长和端粒酶活性的影响。方法以脂质体法将抗HPV16E6-Ribozyme、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,命名为CaSKi-R和CaSKi-P细胞。点杂交检测核酶在细胞中的表达,northern杂交检测三种细胞中E6基因的表达;细胞生长曲线检测细胞生长的改变;TRAP-Elisa法检测端粒酶活性。结果点杂交证实核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,northern杂交证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P和CaSKi明显降低。CaSKi-R细胞生长速度较CaSKi-P和CaSKi明显减慢(P<0.01);CaSKi,CaSKi-P和CaSKi-R三种细胞的端粒酶活性分别为0.89±0.14,0.90±0.11,0.36±0.06,转染了抗HPV16E6核酶的CaSKi-R的端粒酶活性的抑制率为59.55%。经统计学处理,CaSKi-R的端粒酶活性较CaSKi和CaSKi-P细胞明显下降(P<0.01)。结论转染抗HPV16E6-Ribozyme的CaSKi-R细胞出现一定程度的生长抑制,端粒酶活性较前明显下降。

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA和高危型人乳头瘤病毒检测在绝经女性宫颈筛查的临床研究

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测在液基薄层细胞学检测(TCT)异常的绝经女性宫颈病变筛查中的临床研究。方法本研究为回顾性研究, 选取2019年1月至2021年4月北部战区总医院妇产科收治的502例TCT检查结果异常的患者, 年龄(56.05±8.46)岁, 年龄范围为45~74岁。所有患者进行HPV E6/E7 mRNA、HR-HPV检测及病理检查。结果 502例患者的病理结果中, 正常及炎症102例, 低度鳞状上皮内病变(LSIL)64例, 高度鳞状上皮内病变(HSIL)320例, 宫颈癌16例。HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV在不同病理类型的阳性表达率比较, 差异有统计学意义(P<0.001), 两者在正常及炎症、LSIL中, 差异有统计学意义(P<0.001), 在HSIL中, 差异无统计学意义(P>0.05)。在病理诊断为LSIL及以下中, HPV E6/E7 mRNA的阳性率(53.1%+39.2%)低于HR-HPV(95.3%+66.7%), 差异有统计学意义(P<0.001), 在HSIL及以上病理结果中, HPV E6/E7 mRNA的阳性率(100%+98.1%)高于HR-HPV(100%+95.6%), 差异无统计学意义(P>0.05)。病理诊断在LSIL及以下与HSIL及以上比较, HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率前者低于后者, HR-HPV检测的阳性率前者低于后者, 差异均有统计学意义(P<0.001)。HPV E6/E7 mRNA在病理诊断为HSIL及以上病变的特异度[55.4%(92/166)]、阳性预测值[80.9%(330/408)]、阴性预测值[97.9%(92/94)]均高于HR-HPV[22.3%(37/166)、71.4%(322/408)、72.5%(37/51)], 差异有统计学意义(P<0.05), 灵敏度[98.2%(330/336)]低于HR-HPV[98.8%(332/336)], 差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV E6/E7 mRNA与宫颈病变病理诊断高低有相关性, 联合TCT检测在绝经后女性宫颈病变筛查中有较高诊断价值。