人乳牙牙髓基质干细胞的研究进展

人乳牙牙髓基质干细胞(SHED)的研究刚刚处于起步阶段,但其本身具有的多向分化潜能有着非常重要的研究价值。本文通过参考相关文献,结合诸多学者的研究成果,从人乳牙牙髓基质干细胞的研究基础、体外实验方法及牙髓基质干细胞生物学特性等方面对人乳牙牙髓基质干细胞的研究进展进行综述。

研磨处理可注射牙髓细胞外基质促进牙髓再生

背景:可注射细胞外基质材料用于牙髓组织再生时,首先需要经过胃蛋白酶消化,再与其他基质成分如水凝胶结合使用,而这也意味着天然细胞外基质材料所保留的微环境遭到破坏。目的:探讨研磨处理条件下制备的可注射牙髓细胞外基质材料用于牙髓组织再生的效果。方法:(1)将获取的猪牙来源牙髓组织经过脱细胞处理后制备成牙髓脱细胞基质材料,经过液氮冷冻、高速研磨处理后,制备成可注射牙髓细胞外基质材料,比较可注射牙髓细胞外基质材料和天然牙髓细胞外基质在细胞黏附效率和微结构方面的差异,免疫组化分析可注射牙髓细胞外基质中的细胞外基质蛋白质成分;(2)将接种有牙髓干细胞的可注射牙髓细胞外基质材料注入到牙本质基质材料构建的牙髓腔中,植入裸鼠皮下1,3,5周后取材,观察可注射牙髓细胞外基质材料的体内改建速率及其在裸鼠皮下的异位牙髓组织再生能力。结果与结论:(1)与天然牙髓细胞外基质相比,可注射牙髓细胞外基质材料显著提高了细胞黏附率,并保留了与天然牙髓细胞外基质相似的多孔胶原结构;(2)与天然牙髓细胞外基质相比,免疫组化染色显示可注射牙髓细胞外基质材料中层粘连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和整合素β1的表达没有显著变化,而纤连蛋白的表达显著下降;(3)体内实验显示,可注射牙髓细胞外基质材料具有优异的成血管能力,并促进了牙髓样组织的形成。结果表明,研磨处理的可注射牙髓细胞外基质材料可促进牙髓再生。

光交联复合水凝胶支架中人牙髓干细胞的成骨/成牙分化能力

背景:甲基丙烯酸酐改性明胶(gelatin-methacryloyl,Gel-MA)与经处理牙本质基质(treated dentin matrix,TDM)在一定比例下经过紫外线交联后形成的复合水凝胶支架具有良好的孔隙率、机械性能、溶胀性能及生物降解率,这为临床上年轻恒牙的牙髓再生提供了新的思路和方法。目的:探究1∶2质量比Gel-MA/TDM复合光交联水凝胶支架对人牙髓干细胞增殖能力及成骨/成牙本质分化能力的影响。方法:将第3代牙髓干细胞接种至1∶2质量比Gel-MA/TDM复合水凝胶支架中,采用CCK-8实验检测人牙髓干细胞在复合水凝胶支架中的增殖能力。将第3代牙髓干细胞接种至1∶2质量比Gel-MA/TDM复合水凝胶支架中并进行成骨诱导,采用碱性磷酸酶染色及茜素红染色观察矿化结节的形成情况,采用RT-PCR检测成牙相关因子(牙本质基质蛋白1、牙本质涎磷蛋白)和成骨相关因子(骨钙素、Runt相关转录因子2)的基因表达。结果与结论:①CCK-8检测结果显示,前7 d的牙髓干细胞增殖能力明显升高,第10天时速度减缓;②碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,Gel-MA/TDM复合水凝胶组牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性及矿化结节生成强于单纯Gel-MA水凝胶组(P<0.05);③RT-PCR结果显示,Gel-MA/TDM复合水凝胶组牙髓干细胞中牙本质基质蛋白1、牙本质涎磷蛋白、骨钙素、Runt相关转录因子2的基因表达量明显高于单纯Gel-MA水凝胶组(P<0.05),且14 d基因表达量明显高于7 d(P<0.05)。结果表明,培养在1∶2 Gel-MA/TDM复合水凝胶支架上的牙髓干细胞表现出较好的增殖能力,能够强化牙髓干细胞的成骨、成牙本质分化能力。

脱矿牙本质基质对人牙髓干细胞体外增殖、牙向分化能力的影响

目的观察脱矿牙本质基质(demineralized dentin matrix,DDM)与人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDP-SCs)的生物相容性及其作为支架材料的牙向诱导作用。方法体外分离培养DPSCs,分别用四唑盐比色法(MTS)、茜素红染色法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法观察DDM生物材料对DPSCs增殖活性和牙向分化能力的影响。结果 DDM显著地刺激体外培养的DPSCs增殖,诱导了细胞的矿化和提高细胞ALP活性。RT-PCR结果显示DDM诱导后细胞mRNA水平表达牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白(dentin matrix protein1,DMP-1)。结论体外培养条件下,DDM与DPSCs有良好的生物相容性,作为支架材料对于DPSCs有较好牙向诱导作用。

人乳牙牙髓基质细胞的分离培养与牙再生能力

背景：在牙组织工程和牙再生的研究中,寻找合适的种子细胞是当前的中心和热点。目的：分离培养儿童乳牙牙髓基质细胞,比较研究矿化诱导前后牙本质涎磷蛋白表达的差异。设计、时间及地点：观察性实验,于2006-12/2007-12在大庆油田总医院中心实验室完成。对象：选择8-10岁儿童8名,男4名,女4名,排除传染病及内分泌疾病史,乳牙排除牙体牙髓牙周疾病。牙髓取材于颌外门诊拔除的滞留乳磨牙。方法：通过组织块贴壁法获得乳牙牙髓基质细胞,并在含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基中原代培养14d,消化传代后用添加有10-8mol/L地塞米松,50μmol/L左旋抗坏血酸,10nmol/L维生素D3,10mmol/Lβ-磷酸甘油钠的DMEM/F12培养基诱导培养14d,用不含添加成分的完全DMEM培养基培养作对照。主要观察指标：显微镜下观察细胞形态变化和生长规律。免疫细胞化学染色比较诱导前后牙本质涎磷蛋白的表达差异。结果：乳牙牙髓基质细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,经矿化诱导14d后多数细胞由梭形转变成多角形和柱型,胞核大而圆,80%以上细胞的细胞质牙本质涎磷蛋白表达阳性。而未经诱导的细胞仍为梭形,仅有2%的细胞牙本质涎磷蛋白染色呈阳性。结论：乳牙牙髓基质细胞经矿化诱导培养后具有向成牙本质细胞分化的潜能,可以尝试作为牙再生研究新的种子细胞来源。

处理牙本质基质浸提液对牙髓干细胞成牙分化的影响

目的:观察处理牙本质基质(TDM)浸提液对牙髓干细胞(DPSC)成牙分化的诱导作用及可能机制。方法:取健康离体牙,采用梯度脱矿法制备TDM并收集TDM浸提液。将分离培养的DPSC分为2组,分别用正常培养基(正常对照组)和TDM浸提液(TDM组)培养7 d。采用Western blot法检测2组细胞中成牙相关蛋白(DSPP、DMP-1、Runx2、ALP),GSK3β,磷酸化GSK3β(Ser9)及活化的β-catenin蛋白的表达,采用免疫荧光染色定位活化的β-catenin。结果:与正常对照组比较,TDM组成牙相关蛋白表达均升高,GSK3β磷酸化水平与活化的β-catenin蛋白表达升高(P<0.05);免疫荧光染色结果显示活化的β-catenin定位在细胞核中,且TDM组活化的β-catenin荧光强度强于正常对照组。结论:TDM浸提液可以促进DPSC成牙分化,其机制可能与抑制GSK3β、激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

细胞外基质PDMS硬度对牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响

目的:研究细胞外基质聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)硬度对牙髓干细胞(DPSCs)增殖和成骨分化的影响及其机制。方法:收集南京医科大学附属常州市第二人民医院因正畸而拔除的前磨牙作为实验材料,分离、培养DPSCs,制作PDMS基质。根据不同硬度,将PDMS基质分为A组(基料/固化剂=10∶1,硬度135 kPa)、B组(基料/固化剂=20∶1,硬度54 kPa)和C组(基料/固化剂=30∶1,硬度16 kPa),另设不含PDMS基质的对照组,在各组基质上培养DPSCs细胞,采用CCK-8法检测各组DPSCs细胞培养至1、3、5、7天时的增殖率,采用茜素红染色鉴定各组DPSCs细胞成骨效果,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组DPSCs细胞中骨钙素(OCN)、RUNX2、细胞外因子1(Wnt1)、β连环素(β-catenin)蛋白表达量。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:茜素红染色结果显示,A组DPSCs细胞形态发生明显变化,排列具有明显方向性,由多角形、梭形逐渐变为方形,出现钙化小结节,B组钙化小结节明显少于A组,C组钙化小结节明显少于B组,对照组钙化小结节极少。B组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量均显著低于A组(P<0.05),C组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量显著低于B组(P<0.05),对照组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量显著低于C组(P<0.05)。结论:较硬细胞外基质可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进牙髓干细胞增殖和成骨分化,这可为牙周组织工程新材料的研发提供理论基础。

骨形态发生蛋白4调节人牙髓干细胞在脱细胞的牙髓基质中促进成骨/成血管分化的研究

目的探究骨形态发生蛋白4(BMP4)与脱细胞人牙髓细胞外基质是否共同调节人牙髓干细胞(hDPSCs)介导的成骨/成血管分化。方法从健康的人第三磨牙中分离出牙髓,改良组织块法培养hDPSCs并进行鉴定,用十二烷基硫酸钠(SDS)和Triton X-100制作脱细胞化细胞外基质(dECM),电子显微镜观察其结构,Cell Counting Kit-8分析细胞增殖生长曲线。使用重组腺病毒BMP4感染hDPSCs。HE和DAPI染色后,当看不到完整的细胞核时,分别在dECM和三维(3D)VitroGel系统中培养细胞,并通过碱性磷酸酶染色(ALP)与实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)评估骨/牙本质/血管生成标记的表达。结果提取hDPSCs并完成鉴定,制作脱细胞牙髓细胞外基质并于镜下观察无细胞核存在。Cell Counting Kit-8分析结果表明,dECM可以支持hDPSCs的生长和增殖且没有明显的细胞毒性。ALP染色结果显示,BMP4和dECM协同促进hDPSCs成骨分化。qRT-PCR结果显示,成骨和成血管细胞基因的表达增加。结论dECM可促进hDPSCs增殖,而BMP4+dECM促进hDPSCs在体外成骨和成血管分化。

改良富血小板血浆促进乳牙牙髓干细胞增殖的最佳浓度

背景:课题组前期实验发现用液氮冻融激活的改良富血小板血浆可以促进骨髓间充质干细胞和牙髓干细胞的增殖,且这种促增殖作用具有浓度特异性。目的:体外研究不同浓度的改良富血小板血浆对人乳牙牙髓干细胞增殖的影响。方法:利用全自动血细胞分离机制备血小板浓缩物,反复冻融法激活,获得改良富血小板血浆;以α-MEM作为基础培养基,分别加入体积分数为2%,5%,10%,20%4种不同浓度改良富血小板血浆或者体积分数10%胎牛血清进行培养,观察细胞增殖差异。结果与结论:不同浓度的改良富血小板血浆均能够促进乳牙牙髓干细胞增殖,体积分数2%改良富血小板血浆与体积分数10%胎牛血清促进乳牙牙髓干细胞增殖作用接近。提示体积分数2%改良富血小板血浆可以促进乳牙牙髓干细胞的增殖,有可能代替胎牛血清用于乳牙牙髓干细胞的体外扩增。

低浓度β-甘油磷酸钠培养牙髓干细胞向成牙本质细胞分化及相关因子的表达

背景:以往研究用来诱导成牙本质细胞分化的培养基普遍借鉴成骨细胞的诱导浓度,其他浓度的诱导情况尚无相关研究。目的:观察在低浓度β-甘油磷酸钠条件培养下,牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中,牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况。方法:分离培养人牙髓干细胞,用不同浓度的诱导液诱导牙髓干细胞分别向脂肪细胞,成骨细胞分化,证实其多向分化能力。用5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养牙髓干细胞向牙本质细胞分化,分别在培养第7,14,21,28天提取各组细胞RNA,反转录PCR检测牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况;诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化形成的矿化结节用Alizarin Red S法检测。结果与结论:人牙髓干细胞经过诱导可证实其成功分化为脂肪细胞和成骨细胞;反转录PCR结果显示,5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠培养牙髓干细胞在培养7,14,21 d,各组细胞牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白的mR NA表达增加,伴随细胞外基质磷酸糖蛋白表达下调;培养至28 d,行矿化结节检测发现牙髓干细胞向成牙本质细胞成功矿化,可见红染的矿化结节。结果证实,5 mmol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养的牙髓干细胞可成功分化为成牙本质细胞,并下调细胞外基质磷酸糖蛋白mR NA的表达,同时上调牙本质基质蛋白1及牙本质涎蛋白mR NA的表达。

SDF-1对静脉移植骨髓基质干细胞归巢作用的影响

目的观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)对静脉移植的骨髓基质干细胞(BMSCs)归巢作用的影响。方法取小鼠基质ST2细胞系进行CD29、CD34、CD44、CD45表面分子鉴定,确认该细胞系为小鼠BMSCs。取BMSCs加入携带绿色荧光蛋白的慢病毒载体悬液转染8 h,获得GFP+的BMSCs细胞,将其注入小鼠尾静脉。将小鼠随机分成SDF-1组和对照组各15只,于背部制备皮下囊袋。SDF-1组向皮下囊袋内置入含SDF-1胶原支架的牙根,对照组置入含空白胶原支架的牙根。3周后处死小鼠,取出牙根,多聚甲醛溶液固定、EDTA脱钙。采用HE染色法对两组根管进行组织学观察,测算新生血管率;于倒置荧光显微镜下观察GFP+的BMSCs,计算GFP+细胞归巢数目。结果SDF-1组新生血管率为5.48%±1.02%,高于对照组的1.58%±0.40%;SDF-1组归巢细胞数为(5 777±426)个,高于对照组的(1 812±145)个(P均<0.05)。结论SDF-1能够增强静脉移植的BMSCs归巢,并产生类牙髓样新生组织。

缺氧诱导因子1α基因修饰牙髓干细胞的体外成骨及成血管分化

背景:如何有效地修复和重建临界骨缺损是临床医学的难题。牙髓干细胞作为转基因靶细胞修复受损组织或器官具有一定优势。目的:探究缺氧诱导因子1α对牙髓干细胞体外成骨及成血管的作用。方法:选取临床上12-18岁患者因正畸治疗需要拔除的健康、完整双尖牙的牙髓组织分离、培养牙髓干细胞,实验组将缺氧诱导因子1α基因转染至牙髓干细胞,对照组不做任何处理,采用qPCR检测缺氧诱导因子1α的基因表达以及Western blot检测成骨及成血管因子的蛋白表达。结果与结论:(1)牙髓干细胞为短梭形的成纤维样细胞,细胞呈集落式生长。(2)缺氧诱导因子1α基因稳定转染至牙髓干细胞内,随着时间延长缺氧诱导因子1α基因表达逐渐增高,至14 d达到高峰,21 d明显降低。(3)与对照组相比,实验组的成血管相关因子表达水平更高。转染后1 d,血管内皮生成因子、基质细胞衍生因子1、促血管生成素2、胎盘生长因子蛋白表达明显增高,4 d达到高峰,随后实验组成血管相关蛋白表达虽略有降低,但与对照组相比明显增高。(4)与对照组相比,实验组的成骨相关因子表达水平更高。转染后1 d,人骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、Runt相关转录因子2蛋白表达明显增高,4 d达到高峰。(5)结果表明,缺氧诱导因子1α能够促进牙髓干细胞成骨及成血管因子的表达。

基质胶在乳牙牙髓植入牙半空根管中的实验研究

目的:评价基质胶对乳牙牙髓异体移植的作用。方法:制备恒牙半空根管(SEC)并分为3组(n=12)。提取乳牙牙髓,植入SEC中,再植入裸鼠皮下。A组:乳牙牙髓+Matrigel+SEC,B组:乳牙牙髓+SEC,C组:SEC。4周后行HE组织化学及免疫组化检查。结果:A组中10例、B组中5例牙根内可见成纤维细胞以及血管,两组人源性及鼠源性CD31抗体染色阳性。C组未见成纤维细胞。A、B、C组SEC中牙髓存活例数分别为10、5和0(P<0.05)。结论:Matrigel对于乳牙牙髓移植后牙髓活性具有明显促进作用。

牙本质生物活性材料的相关性能及对牙髓干细胞周期及形态的影响

目的 探讨经冷冻干燥处理的牙本质生物活性材料(FD)的生物、力学性能以及该材料对牙髓干细胞(DPSCs)细胞周期及形态特征的影响。方法 制备FD,检测FD、未冻干处理牙本质(D)、羟基磷灰石/磷酸三钙(HA)三组材料的挠曲强度及弹性模量;HE法观察材料的组织结构;ELISA法检测材料Ⅰ型胶原(COL-1)的释放量。将DPSCs分别培养于FD、D、HA及玻片四组材料表面,流式细胞术检测材料表面DPSCs周期,免疫荧光检测材料表面DPSCs的骨架特征。结果 挠曲强度D组为(194.1 ± 24.3)MPa,FD组为(166.1 ± 57.5)MPa,HA组为(6.2 ± 0.2)MPa;弹性模量D组为(5.8 ± 2.1)GPa,FD组为(4.7 ± 1.5)GPa,HA组为(0.05 ± 0.01)GPa。FD组和D组的挠曲强度及挠曲弹性模量差异无统计学意义( P >0.05),而HA组的平均值显著低于其他两组,且差异具有统计学意义( P <0.01)。组织学结果显示,冻干处理后牙本质小管形态较完整;FD组、D组二者COL-1释放差异无统计学意义( P >0.05);FD组与D组DPSCs细胞周期分布中各相细胞百分率无明显差异,HA表面DPSCs活性最低;荧光染色显示两个牙本质组表面DPSCs细胞骨架结构优于HA组及盖玻片/α-MEM组。结论 经冷冻干燥处理的牙本质生物活性材料具有与未冻干处理牙本质相似的力学性能和组织结构,对DPSCs周期分布及细胞骨架结构有积极作用。

人类牙髓细胞中基质细胞衍生因子-1α/CXCR4轴的调控(英)

引言尽管有报道认为间质细胞性因子（SDF）-1α/CXCR4轴存在于牙髓组织中,但关于牙髓干细胞（DPSCs）中该轴的调控知之甚少。本研究目的就是要搞清炎症或组织缺氧状态对牙髓细胞中的SDF-1α/CXCR4轴是否有调控作用。

牙髓干细胞诱导iPS细胞的无饲养细胞培养条件研究

目的研究适合牙髓干细胞诱导iPS细胞的无饲养细胞培养条件与方法。方法分离牙髓干细胞,慢病毒介导Lin28、Nanog、Oct4和Sox2因子重编程获得iPS细胞。在不同浓度及不同处理时间的基质胶(Matrigel)上传代培养iPS,检验iPS的单细胞生长密度,比较不同基质胶培养方法对iPS生长的影响。结果 DPSC iPS在60ug/cm2浓度的基质胶上生长密度最高;基质胶覆盖2小时后应用可以获得最好的DPSC iPS生长密度。。结论应用60ug/cm2浓度的基质胶覆盖培养板2小时是DPSC iPS无饲养细胞培养的最佳条件。

牙髓干细胞的研究进展及应用(综述)

牙齿的再生现在已是国内外专家、学者研究的热门课题,而牙髓干细胞作为牙齿再生的主要种子细胞,对其进行研究有着重要的意义。笔者就牙髓干细胞的研究进展及应用做一综述。牙髓干细胞的提出Gouble用β-磷酸甘油诱导牙髓细胞分化成牙本质细胞,证实了牙髓组织中成牙本质细胞前体的存在。2000年Gronthos利用collagenase type I和dispase消化法,将人的第三磨牙牙髓组织制成单细胞悬液并培养,获得了具有细胞克隆能力和高度增殖能力的细胞,与骨髓基质干细胞相比较有许多相似的地方,将其与羟基磷灰石-磷酸三钙粉末混合并接种于免疫耐受小鼠背部皮下形成了牙髓牙本质复合体样结构,因此提出了牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSCs)的概念。

细胞外基质磷酸化糖蛋白与其多肽链片段的生物学作用

细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原磷酸化糖蛋白,也是一种调磷因子,对磷酸盐代谢紊乱及各种骨组织疾病的成骨细胞增生及牙周组织生理连接的重建有重要作用。dentonin/AC100作为MEPE的一个基因片段,对骨组织形成的作用已成为研究热点。本文就近年来MEPE与其多肽链片段dentonin/AC100的研究进行一综述。

甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质生物活性支架的制备及性能

背景:牙髓-牙本质再生一直是近几年研究的热点及难点,构建复合生物支架材料为牙髓-牙本质再生提供了新的思路与方法。目的:观察甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质支架对人牙髓干细胞增殖、迁移与成骨分化的影响。方法:将不同质量的经处理牙本质基质分散至甲基丙烯酸酐改性明胶溶液中,使甲基丙烯酸酐改性明胶与经处理牙本质基质的质量比分别为2∶1、1∶1、1∶2,采用冷冻干燥法制备甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质支架,检测支架的微观形貌、吸水率及机械性能。采用不同质量比的支架浸提液、DMEM培养基(对照组)分别培养人牙髓干细胞,检测细胞增殖与迁移情况。采用不同质量比的支架浸提液+成骨诱导液、DMEM培养基+成骨诱导液(对照组)分别培养人牙髓干细胞,碱性磷酸酶染色分析成骨能力。结果与结论:①扫描电镜下可见3组支架均具有多孔结构,随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,支架的孔隙率升高,组间两两比较差异有显著性意义(P<0.05);随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,支架的吸水率升高,组间两两比较差异有显著性意义(P<0.05);随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,支架的抗压强度、剪切强度增大。②CCK-8检测显示培养3,5,7 d,2∶1、1∶1、1∶2支架组细胞增殖吸光度值均高于对照组(P<0.05),并且随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,细胞增殖吸光度值升高(P<0.05);细胞划痕实验显示2∶1、1∶1、1∶2支架组细胞迁移率均大于对照组(P<0.05),并且随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,细胞迁移率增大(P<0.05)。③碱性磷酸酶染色显示,2∶1、1∶1、1∶2支架组细胞成骨分化能力均强于对照组,并且随着支架中经处理牙本质基质质量的增加,细胞成骨能力增强。④结果表明,甲基丙烯酸酐改性明胶与经处理牙本质基质质量比为1∶2的支架最适合牙髓干细胞的增殖与分化。

低氧预处理对人牙髓干细胞增殖和表达血管生成因子的影响

目的:研究低氧预处理对人牙髓干细胞(h DPSCs)增殖及表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:体外分离h DPSCs,按常氧组(210 m L/L O2)和低氧组(30 m L/L O2)分别培养,流式细胞术检测细胞表面标志物;MTT检测细胞增殖;Live/Dead染色检测细胞活性;q RT-PCR和ELISA检测VEGF的表达量。结果:h DPSCs间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90表达为强阳性,而造血干细胞表面标志物CD34、CD45及内皮细胞表面标志物CD31表达均为阴性;低氧组与常氧组均未发生细胞坏死现象;低氧组h DPSCs增殖能力和h DPSCs的VEGFm RNA表达量均显著高于常氧组(P<0.05);同时低氧组h DPSCs培养上清中VEGF的浓度也显著高于常氧组(P<0.05);两组h DPSCs的基质细胞衍生因子(SDF-1)m RNA表达量均随时间的延长而增加,但低氧预处理对SDF-1 m RNA的表达无显著影响(P>0.05)。结论:低氧预处理对h DPSCs的细胞活性无明显影响,并且可显著促进h DPSCs的增殖及VEGF的表达。