Genistein对人乳腺癌细胞株BCaP-37的体外抑制作用

目的 :观察Genistein对乳腺癌细胞的抑制作用。方法 :采用MTT法、克隆形成实验、3 H TdR掺入实验测定Genistein对人乳腺癌细胞株BCaP 3 7的生长、克隆形成和DNA合成能力的抑制作用。结果 :Genistein能明显抑制BCaP 3 7细胞的生长、克隆形成和DNA合成 ,呈明显的剂量 效应关系 ,随作用时间延长其效果明显增强。结论 :Genistein通过抑制人乳腺癌细胞株BCaP 3 7DNA合成而降低其生长和繁殖能力。

维生素E琥珀酸酯联合阿霉素对乳腺癌细胞株Bcap-37的生长抑制作用

目的检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞生长抑制作用。方法以VES联合ADM作用于人乳腺癌Bcap-37细胞24h和36h,VES浓度为5、10、20mg/L,ADM的浓度分别为0.25、1、2mg/L。采用MTT法测定对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞仪分析药物联合作用前后乳腺癌细胞凋亡率的变化和对细胞表面Fas表达的影响。结果VES联合ADM对乳腺癌Bcap-37细胞具有显著的生长抑制和凋亡诱导作用。流式细胞仪分析细胞周期,Bcap-37细胞的自然凋亡率为0.7%,5mg/L和20mg/LVES作用24h后凋亡率分别为10.1%和19.2%,1mg/L和2mg/LADM作用24h后的凋亡率分别为16.0%和23.3%。5mg/LVES联合1mg/LADM以及20mg/LVES联合2mg/LADM作用24h后的凋亡率分别升高至31.1%和40.7%。VES联合ADM作用24h后Bcap-37细胞表面Fas表达增强。结论VES联合ADM对乳腺癌Bcap-37细胞具有显著的生长抑制作用,其机制可能与细胞表面Fas表达上调有关。

蒺藜皂苷对乳腺癌细胞Bcap-37的体外抑制作用

采用生长曲线法、MTT法、蛋白质含量测定以及形态学方法观察了蒺藜皂苷(STT)对于体外培养Bcap-37细胞抑制作用,结果显示:STT对于Bcap-37细胞增殖有较强的抑制作用,且呈明显的剂量与时间依赖关系,经STT作用后,细胞形态学表现为细胞变圆、皱缩,核固缩、浓聚。

苦参碱对乳腺癌Bcap-37细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨苦参碱对乳腺癌Bcap-37细胞增殖和凋亡的影响。方法 2 mg/mL苦参碱处理Bcap-37细胞后,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡,免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、c-Myc、生存素(Survivin)、p53蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53mRNA表达。然后,在苦参碱作用基础上以p53抑制剂Pifithrin-α处理Bcap-37细胞后,RT-PCR及Western blot检测p53表达水平,MTT法、流式细胞仪、Western blot检测细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达。结果苦参碱处理Bcap-37细胞后,细胞OD值、Cyclin D1、c-Myc、Survivin蛋白相对表达量显著降低(P <0. 05),凋亡率、p53蛋白相对表达量显著升高(P <0. 05)。加入Pifithrin-α后,与单用苦参碱比较细胞OD值、Cyclin D1、c-Myc、Survivin蛋白相对表达量显著上调(P <0. 05),细胞凋亡率、p53蛋白相对表达量均显著下降(P <0. 05)。结论苦参碱可抑制乳腺癌Bcap-37细胞增殖,并促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调p53基因表达有关。

沙棘籽渣黄酮类化合物诱导人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的研究

探讨了沙棘籽渣黄酮类化合物(flavonoids from seed residues of Hippophae rhamnoidesm L.FHR)对人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的影响和其作用机制.采用MTT法、Wright染色法、流式细胞术及免疫细胞化学等方法,观察在不同浓度和作用时间时,FHR对Bcap-37细胞生长抑制和细胞凋亡效应.结果显示FHR在10～1000μg/mL等浓度范围内可以诱导人乳腺癌细胞Bcap-37产生典型的凋亡形态学变化;1000μg/mL FHR处理24 h、48 h和72 h后使Bcap-37细胞周期S期减少,G0/G1期增加;FHR处理实验组p53蛋白表达较对照组明显增加,bcl-2蛋白表达较对照组降低.提示FHR对人乳腺癌Bcap-37细胞的生长抑制主要通过诱导细胞凋亡,且p53蛋白的增加和bcl-2蛋白的减少是其诱导细胞凋亡的机制之一.

三种藻胆蛋白对人乳腺癌Bcap-37细胞的光动力杀伤效果

从高等红藻坛紫菜中提取R-藻红蛋白(R-PE)、R-藻蓝蛋白(R-PC),从低等蓝藻钝顶螺旋藻中提取C-藻蓝蛋白(C-PC).研究10、25、50和100μg/mL的R-PE、R-PC和C-PC介导的光动力效应对乳腺癌细胞Bcap-37的生存率的影响,MTT法测定结果,探讨这三种藻胆蛋白对癌细胞的光动力杀伤效应与其光敏性质差异的相关性.三种藻胆蛋白的光动力作用对Bcap-37细胞具有显著杀伤并显示出剂量效应,质量浓度在25μg/mL以上时,杀伤效果依次为:R-PE>R-PC>C-PC;仅用激光处理(497nm,632.8nm),Bcap-37细胞的生存率达到88.6%和91.3%;仅用藻胆蛋白处理,培养24h后,R-PE<25μg/mL,R-PC、C-PC<50μg/mL时,对Bcap-37细胞具有一定的促进生长作用,R-PE≥25μg/mL,R-PC、C-PC≥50μg/mL时,抑制细胞生长.

大豆异黄酮抑制BCap-37乳腺癌细胞增殖的作用研究

采用二羟异黄酮、三羟异黄酮处理BCap - 37细胞 1～ 4d后 ,以生长曲线、3 H -TdR掺入试验反映其增殖活力 ,用流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。结果显示 :1～ 9×10 5mol/L三羟异黄酮处理BCap - 37细胞 3～ 4d后 ,对BCap -37细胞有增殖抑制作用 ,且与剂量及培养时间成正相关 ,而在相同剂量条件下二羟异黄酮对BCap - 37细胞生长无抑制作用。三羟异黄酮处理BCap - 37细胞 4d后 ,BCap - 37细胞的增殖指数明显下降 ,细胞主要阻滞于G1期。提示 :三羟异黄酮对BCap -

亚硒酸钠对Bcap-37人乳腺癌细胞体外增殖及3种酶细胞化学的影响

目的 观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap 37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。 方法 在体外培养Bcap 37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠 ,常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和非特异性酯酶活性。 结果 2 μmol L的亚硒酸钠对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用 ,而 10 μmol L、5 0 μmol L的亚硒酸钠具有一定的细胞毒性。Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、非特异性酯酶活性随着硒浓度的加大 ,培养时间的延长呈下降趋势 ,并且10 μmol L、5 0 μmol L亚硒酸钠培养 2d后 ,3种酶的活性完全消失。 结论 硒对肿瘤细胞的生长和酶的活性都具有抑制作用 ,并且两者之间存在着一致性。

促性腺激素释放激素类似物那法瑞林对人乳腺癌细胞BCaP-37生长的影响

目的：观察促性腺激素释放激素（ＬＨＲＨ）类似物那法瑞林对体外培养的人乳腺癌细胞ＢＣａＰ－３７生长的影响。方法：培养的ＢＣａＰ－３７细胞，经下列条件作用４ｄ后进行细胞计数：（１）加入１０－５～１０－９ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林；（２）加入１０－７～１０－１０ｍｏｌ／Ｌ的雌二醇（Ｅ２）；（３）在含１０－８ｍｏｌ／ＬＥ２的条件下，加入１０－６～１０－８ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林或他莫昔芬；（４）加入１０ｎｇ／ｍｌ或５０ｎｇ／ｍｌ的表皮生长因子（ＥＧＦ）；（５）在含１０ｎｇ／ｍｌＥＧＦ的条件下，加入１０－５～１０－７ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林。结果：那法瑞林在１０－５～１０－９ｍｏｌ／Ｌ浓度下对ＢＣａＰ－３７培养细胞的生长无显著抑制作用，在１０－６～１０－８ｍｏｌ／Ｌ浓度下可拮抗１０－８ｍｏｌ／ＬＥ２对ＢＣａＰ－３７细胞的生长促进作用，对１０ｎｇ／ｍｌＥＧＦ抑制ＢＣａＰ－３７细胞生长的作用无显著影响。他莫昔芬拮抗Ｅ２促进ＢＣａＰ－３７生长的作用与那法瑞林相似。结论：那法瑞林对人乳腺癌细胞ＢＣａＰ－３７体外培养生长无显著抑制作用。

苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响及其作用机制探讨

目的:观察苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTT法检测苦参碱对Bcap-37细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:苦参碱对Bcap-37细胞增殖具有明显抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。与对照组比较,药物作用24、48、72h后,苦参碱组的凋亡率均明显增高(P<0.01),并以作用48h最明显。Caspase-3、Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白降低。结论:苦参碱对Bcap-37细胞生长具有明显抑制作用,其作用机制可能与上调Caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡有关。

沙棘籽渣黄酮诱导人乳腺癌细胞凋亡相关基因的表达谱变化

背景与目的:研究显示,沙棘含有多种黄酮类化合物,具有抗氧化、防辐射等作用。cDNA基因表达谱芯片技术具有高通量、高效、快捷的特点,本实验拟利用cDNA基因表达谱芯片研究沙棘籽渣黄酮(flavonoidsfromseedresiduesofHippophaerhamnoidesL.,FHR)诱导人乳腺癌细胞Bcap鄄37凋亡相关基因的表达谱变化。方法:抽提FHR作用前后的Bcap鄄37细胞总RNA,经逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cDNA探针,与含有13824个cDNA基因的人14K基因表达谱芯片杂交,利用Genespring软件分析实验组和对照组之间差异表达的基因,对所获得的基因进行生物信息学分析。结果:实验组与对照组中表达上调的基因有305条,表达下调的基因有361条。差异表达的与细胞凋亡相关的基因有32条,占芯片基因总数的0.23%,其中表达上调的有25条(平均Ratio值为3.071),下调的有7条(平均Ratio值为0.418)。生物信息学分析表明,FHR在对Bcap鄄37细胞作用的过程中,该32条差异表达基因与Bcap鄄37细胞凋亡有关,其中包括CTNNB1、TSSC3、IGFBP4、IGFBP6、GADD34、TNFRSF10B、Caspase鄄9和PCNA等。结论:FHR诱导Bcap鄄37细胞凋亡的机制是由多基因协同,并通过胞内和胞外信号转导途径共同调节完成。

黄芩苷体外调控乳腺癌细胞表达TI MP2的实验研究

目的:探讨黄芩苷对Bcap37细胞生长及TIMP2表达的影响。方法:体外细胞培养、MTT法测定不同浓度黄芩苷对Bcap37细胞生长曲线的影响,RTPCR、Westernblot方法研究不同浓度黄芩苷对Bcap37细胞TIMP2的影响。结果:黄芩苷对Bcap37细胞的生长抑制呈浓度依赖关系;黄芩苷对Bcap37细胞TIMP2在mRNA水平、蛋白水平呈浓度依赖关系,小剂量上调,高剂量下调。结论:黄芩苷对人乳腺癌Bcap37细胞生长有抑制作用,可能与肿瘤细胞TIMP2的下调有关。

沙棘黄酮类化合物对人乳腺癌细胞生长抑制和凋亡诱导的研究

为研究沙棘籽渣黄酮类化合物(FHR)对人乳腺癌细胞Bcap-37的生长抑制和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用的机制,本项研究应用CCK-8法检测FHR对Bcap-37的生长抑制效应,流式细胞术(FCM)分析细胞周期及凋亡率,透射电镜观察细胞凋亡的超微结构表征,半定量RT-PCR方法和Westernblot方法检测与细胞周期及凋亡调控相关基因的转录和表达的变化。结果表明,FHR可明显抑制Bcap-37的增殖,并呈剂量依赖性;FCM分析发现在FHR1000μg/ml作用24h后能阻断Bcap-37细胞于G2/M期,并伴有少量的亚G1峰出现;TEM观察Bcap-37细胞经FHR作用后具有典型的凋亡形态学特征;半定量RT-PCR结果显示,经1000μg/mlFHR作用24h后,PCNA、Bcl-2转录水平分别下调为对照组的0.26倍和0.66倍,IGFBP4转录水平上调为对照组的1.13倍。Westernblot结果显示p53蛋白表达显著上调,Bcl-2蛋白表达显著下调。本项研究结果提示FHR可能是通过下调PCNA的转录使细胞的增殖被阻断在G2/M期,并通过p53蛋白上调和Bcl-2蛋白的下调诱导Bcap-37细胞凋亡。

不同种植年限的光果甘草对人乳腺癌细胞增殖抑制作用的研究

本文采用MTT法检测不同光果甘草样品的水提物及总黄酮对人乳腺癌BCAP细胞的增殖抑制效应,旨在探明光果甘草抗肿瘤活性成分的最佳的采收时期。研究结果表明光果甘草样品的水提物及总黄酮对人乳腺癌BCAP细胞均具有良好的增殖抑制作用,但以总黄酮的效果更佳;药效最佳的部位为主根和水平根,最佳种植年限为3年。

端粒酶RNA模板定点突变对肿瘤细胞Bcap-37的作用研究

端粒酶在正常体细胞中极少表达,而在大多数人类恶性肿瘤和细胞系中高度表达,这暗示着端粒酶活性可能与肿瘤密切相关。本研究以人乳腺癌细胞株Bcap-37接种裸鼠形成的肿瘤组织块为实验材料,通过检测端粒酶活性、端粒长度及细胞凋亡的情况,观察端粒酶RNA模板定点突变的作用。结果显示:MT-hTER组样本的端粒酶活性低于对照组,端粒长度短于对照组,细胞核形态不够稳定,有较多细胞凋亡的现象,而对照组细胞核形态稳定,较少发生细胞凋亡。以上结果提示着端粒酶RNA模板定点突变在一定程度上改变了人乳腺癌细胞株Bcap-37的端粒酶活性、端粒长度及细胞凋亡发生率。

四种甘草对人乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的比较研究

目的比较新疆四种野生甘草活性成分对人乳腺癌细胞的增殖抑制作用,以期筛选出药效最佳的甘草种类。方法采用MTT法检测不同样品对BCAP-37细胞的增殖抑制作用,Hoechst33258荧光染色法检测各样品诱导BCAP-37细胞凋亡的作用。结果4种甘草的活性成分对人乳腺癌BCAP-37细胞具有显著的增殖抑制与诱导凋亡的作用,且存在显著的种间与产地间差异。结论抗癌药效最佳的甘草种类为阿拉尔甘草。

噬菌体展示技术筛选人乳腺髓样癌细胞特异性结合肽

目的利用噬菌体随机七肽库体外筛选与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞特异性结合的小分子多肽。方法培养人乳腺髓样癌Bcap-37细胞作为靶细胞,人正常乳腺上皮细胞MCF-10A为吸附细胞,将噬菌体展示随机七肽库与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞进行减性体外筛选,用ELISA法鉴定噬菌体对人乳腺癌Bcap-37细胞的亲和力。提取亲和力较高的单克隆噬菌体DNA,测定DNA序列并翻译出相应的氨基酸序列,进行同源性分析。结果利用噬菌体随机七肽库通过4轮减性筛选获得了与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞特异结合的小分子多肽。ELISA法表明,第1,3,5,6,8,12,14,16,17,18和20号单克隆噬菌体与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞有很强的亲和力和特异性。测序结果显示,重复性最高的序列为LXRNTNX。结论利用噬菌体展示技术体外筛选获得了能与人乳腺癌Bcap-37细胞特异性结合的小分子多肽LXRNTNX,经检索该肽段与已知蛋白尚无同源性,因此它很有可能成为乳腺癌的早期诊断和靶向治疗新的靶点。

TAM和MA序贯或联合对乳腺癌Bcap-37细胞生长抑制作用的研究

目的 :通过体外 MA和 TAM单药、不同序贯以及联合对乳腺癌 Bcap- 37细胞生长抑制作用研究 ,以指导临床选择合理的 TAM/ MA治疗方案。方法 :模仿临床而设计了 3个 TAM/ MA联合及两者单药的治疗方案 ,观察其体外对乳腺癌 Bcap- 37细胞的生长抑制作用 ,以 MTT法测定其细胞存活率。结果 :在低浓度时 TAM和MA体外对 Bcap- 37细胞的生长抑制作用相近 ,而 2 .5 mg/ L浓度以后 TAM的生长抑制作用显著高于 MA(P<0 .0 5 )。TAM→ MA序贯各浓度的肿瘤细胞生长抑制作用较 MA→ TAM序贯和 TAM+ MA联合为强 (P<0 .0 5 )。TAM+ MA和 MA→ TAM相比 ,在低浓度 (0 .2 5 m g/ L～ 2 .5 m g/ L)时两者肿瘤生长抑制作用相近。当 MA浓度为5 .0 m g/ L 和 7.5 m g/ L 时 ,联合用药组生长抑制作用更强 (分别为 P=0 .0 5和 P<0 .0 5 )。结论 :在 TAM与 MA不同联合治疗方案中以 TAM→

纳米氧化铈对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的探讨纳米氧化铈(nm-Ce O2)对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为阴性对照组(等体积双蒸水)、阳性药组[九州虫草2 000 mg/(kg·次)]、nm-Ce O2高、中、低剂量组[300、100、33.33 mg/(kg·次)],共5组,各组荷瘤裸鼠均经口灌胃给药,每天1次,共17 d,观察各组裸鼠移植瘤生长情况,计算肿瘤体积(VT)、肿瘤生长抑制率,称量肿瘤重量,观察移植瘤组织病理变化,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(terminal dexynucleotidyl transferase mediated d UTP nick end la beling,TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡率。结果与阴性对照组比较,nm-Ce O2各剂量组均具有抑制人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用,并能促进瘤细胞的变性、坏死和凋亡(P<0.05)。nm-Ce O2高剂量组的肿瘤生长抑制作用低于阳性药组(P<0.05),但nm-Ce O2高、中剂量组促进肿瘤细胞凋亡的作用高于阳性药组(P<0.05)。结论 nm-Ce O2对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤具有显著的生长抑制作用。

冬凌草甲素对人乳腺癌Bcap-37细胞的增殖抑制作用及其机制

目的观察冬凌草甲素对人乳腺癌细胞株Bcap-37细胞的生长抑制作用,初步探讨冬凌草甲素调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法 MTT比色法检测冬凌草甲素对Bcap-37细胞的增殖抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期分布,RT-PCR检测p21、cdc2和cyclin B1 mRNA表达。结果冬凌草甲素对Bcap-37细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖趋势(P<0.01);处理后的Bcap-37细胞发生明显的形态改变;作用24h后,Bcap-37细胞在G2/M期阻滞;冬凌草甲素作用Bcap-37细胞后,p21 mRNA水平的表达增加,而cdc2、cyclin B1 mRNA的表达降低(均P<0.05)。结论冬凌草甲素可抑制乳腺癌细胞的增殖,该作用可能与p21 mRNA表达上调及cdc2、cyclin B1 mRNA表达下调有关。