组蛋白精氨酸甲基化酶在人体外受精发育阻滞胚胎中的功能研究

目的探究组蛋白精氨酸甲基化酶(PRMT)在体外受精的人类胚胎发育阻滞中的作用。方法收集丢弃的70枚体外受精人类胚胎,选取12枚正常发育的胚胎为正常组,12枚发育阻滞胚胎为阻滞组。蛋白印迹和免疫荧光检测2组组蛋白精氨酸甲基化酶6(PRMT6)蛋白质水平,蛋白印迹检测组蛋白H3在精氨酸2的二甲基化(H3R2me2)和组蛋白H3在赖氨酸4的三甲基化(H3K4me3)水平。敲除46枚发育阻滞胚胎中的PRMT6(PRMT6敲除组,n=46),qPCR和蛋白印迹检测阻滞组和PRMT6敲除组的PRMT6 RNA、PRMT6蛋白、H3R2me2和H3K4me3水平,多能性标记Oct4、Nanog和Sox2,观察阻滞组和PRMT6q敲除组胚胎培养7 d的情况。结果与正常组相比,阻滞组的PRMT6蛋白质水平显著增加[(1.160±0.054)比(1.530±0.13)],H3R2me2升高[(1.340±0.019)比(1.710±0.011)],H3K4me3水平下降[(1.650±0.030)比(1.220±0.015)],差异有统计学意义(P<0.05)。与阻滞组比较,PRMT6敲除组PRMT6 RNA[(1.660±0.029)比(1.230±0.017)]、PRMT6蛋白[(1.400±0.030)比(1.050±0.058)]及H3R2me2蛋白水平显著下调[(1.410±0.011)比(1.340±0.019)],而H3K4me3水平升高[(1.710±0.011)比(1.340±0.019)];多能性标记Oct4[(1.710±0.016)比(1.160±0.049)]、Nanog[(1.690±0.089)比(1.260±0.051)]和Sox2[(1.680±0.091)比(1.310±0.057)]的水平被下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论敲除PRMT6可以挽救部分发育阻滞的胚胎,甚至单个发育受阻的胚胎也可以发育成融合胚胎。敲除PRMT6可促进人体外受精发育阻滞胚胎的发育。