高效液相色谱法测定人体血浆中尿酸的浓度

目的建立一种测定人体血浆中尿酸浓度的高效液相色谱法。方法采用Agilent HPLC系统；色谱柱：Dikma·C18（5μm，4．6×150mm）。流动相为乙酸缓冲液（20mmol／L，pH4．0）：甲醇=99：1，流速1．0mL／ndn，λ：288nm。结果尿酸线性关系为Y=9．3537X＋74．97（n=7，r=0．9993），线性范围为0．83～25mg／L；最低检测浓度为0．02mg／L；平均提取回收率为83％；日内、日间RSD分别小于2．98％，9．75％；测定30个血样，尿酸浓度为41．92-72．44mg／L。结论本文建立的HPLC法可以简便、准确、灵敏地测定血样中尿酸的浓度，为临床上以尿酸为诊断标准的检验提供可靠的分析手段。

高效液相色谱电化学法检测人体血浆中芹菜素和相关黄酮类化合物

建立了同时检测人体血浆中芹菜素等5种黄酮类化合物含量的反相高效液相色谱法。血浆样品经固相萃取柱提取后，用HypersilC18色谱柱分离样品，流动相为甲醇／磷酸水溶液（V/V，2／3，pH2．25），等度洗脱，流量为1mL／min，柱温为40℃，用电化学检测器在直接模式下，1100mV分析检测待测物，内标法定量。对于全部待测组分r均大于0．99；槲皮素、毛地黄黄酮、山奈酚、芹菜素和异鼠李黄素线性范围分别为3～7000、3～5900、3～7000、5～7000和3～7400nmol／L；检出限为1．4～4．8nmol／L。方法的实际样品加标回收率为86．8％～102．9％；相对标准偏差（RSD）低于7．4％（n=3）。方法简便、快速、准确，可用于芹菜素等黄酮类化合物在人体内的生物利用度及膳食干预研究。

RP-HPLC法测定人体血浆中吉西他滨的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中吉西他滨血药浓度的高效液相色谱方法。方法:取血浆样品1 mL,加内标100μL(含氟脲苷0.8μg·mL-1),混匀,加甲醇-乙腈(1:9)3 mL混匀,放置5 min,离心(3500 r·min-1,10 min),取上清液于60℃水浴放置,氮气吹干,残渣用0.5 mL流动相溶解,离心(15000 r·min～1,10 min),取上清液,进样50μL。色谱柱:Lichrospher 5-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:40 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(用醋酸调节pH=5.5)-乙腈(97.5:2.5),流速:0.8 mL·min～1,检测波长:268 nm,柱温:25℃。结果:本方法线性范围0.20—10.0μg·mL～1,r=0.9999,方法检测限为0.10μg·mL-1(S/N>4),定量限为(0.21±0.02)μg·mL-1(S/N>10);方法回收率为100.1%-106.6%(n=21),日内RSD为2.3%-4.0%(n=21),日间RSD为3.2%-5.2%(n=21)。结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,可用于人体血浆中吉西他滨浓度的测定及药动学研究。

液质联用检测人体血浆中的阿奇霉素

采用高效液相色谱串联质谱技术（HPLC—MS／MS）测定人体血浆中阿奇霉素的浓度．选用LichrospherCN柱，流动相为V（乙腈）：V（水）=40：60（水中含体积分数为0．1％的甲酸和质量分数为0．1％的醋酸铵），电喷雾离子源正离子方式检测．该方法在2．34—600ng/mL范围内线性关系良好，定量下限为2．34ng/mL（S／N〉10），回收率94．13％～97．42％，基质效应92．50％～107．87％，日内和日间测定药物浓度的相对标准偏差（RSD）均小于10．O％．用该方法测定了24名男性健康志愿者单剂量口服500mg阿奇霉素试剂和参比制剂于192h内的血药浓度，并进行了生物等效性研究．

大豆蛋白对人体血浆胆固醇的影响及机制探讨

目的观察大豆蛋白对正常人体血浆胆固醇浓度的影响并探讨其作用机制。方法选择健康大学生30名,男女各半,按血浆总胆固醇浓度、体重和性别均衡的原则,分为3组,在统一食谱、集中就餐的基础上,每天分别另外摄入30g酪蛋白,30g大豆分离蛋白,30g酪蛋白加880mg钙,共14d。实验开始和结束时,测量身高和体重;采血,测定血浆总胆固醇浓度。实验结束前,收集3d粪便,测定粪脂肪、钙、磷、镁和胆汁酸的排出量。结果(1)同实验开始时比,酪蛋白组血浆胆固醇浓度显著升高,而大豆蛋白组和酪蛋白加钙组血浆胆固醇浓度升高不明显。(2)同酪蛋白组比,大豆蛋白组粪钙、磷和镁的排出量均显著增加;粪脂肪和胆汁酸排出量分别增加33.6%和45.3%。(3)粪胆汁酸排出量与粪钙、磷、镁和脂肪的排出量呈显著性正相关。血浆胆固醇浓度随粪胆汁酸排出量增加呈下降的趋势。结论大豆蛋白降低血浆胆固醇浓度的机制可能是由于增加粪胆汁酸的排出量而导致肝脏中由胆固醇合成胆汁酸的增加,从而使血浆胆固醇浓度下降。

硬膜外麻醉对人体血浆cAMP、β—EP的影响

硬膜外麻醉是我国普遍采用的一种麻醉方法。一股认为它对手术创伤所致应激反应的抑制效应强于全麻,但临床实践表明,上腹部手术采用硬膜外麻醉尚存在一些缺陷,就应激反应而言,有资料表明硬膜外麻醉状态下,上腹部或下腹部手术对血浆儿茶酚胺、肾素—血管紧张素、cAMP含量无明显影响;但也有资料提示:上腹部手术时采用硬膜外麻醉仍有明显的内分泌激惹现象。

衍生化β-环糊精液相色谱手性固定相拆分和测定人体血浆中卡维地洛对映体

以有序介孔SBA-15为基质,通过"点击化学"反应制备一种二硝基苯醚化β-环糊精键合SBA-15液相色谱手性固定相(NESP)。在极性有机溶剂模式下,成功地实现了β-受体阻滞剂卡维地洛对映体的快速手性分离,较详细地考察了流动相中甲醇含量、冰醋酸与三乙胺的浓度和温度等因素对手性分离的影响。在流动相组成为乙腈/甲醇/冰醋酸/三乙胺(91/9/1.0/1.0,v/v/v/v),流速为1.0mL·min^(-1),柱温为20℃,进样量为20μL,检测波长为285nm的色谱条件下,卡维地洛对映体在较短的时间(<15min)内达到基线分离,分离度为1.62。血液样品用叔丁基甲醚提取,以S-噻吗洛尔为内标,采用HPLC-MS选择离子[M+H]+407.30和317.20分别监测卡维地洛和内标S-噻吗洛尔,建立了一种测定血浆中卡维地洛对映体含量的新方法。卡维地洛两对映体在10~200ng·mL-1的浓度范围呈良好的线性关系(r=0.9992~0.9994),采用标准添加法测得两对映体在血浆中的回收率为88.60%~95.44%。血浆样品测定结果的日内和日间RSD分别≤1.73%和≤3.84%(n=5)。按三倍噪声推算出最小检测浓度为2.5ng·mL^(-1)。测定了健康人口服外消旋的卡维地洛后血浆中对映体的含量,发现卡维地洛的总含量和S-/R-对映体比例存在一定的差别,这与个体的差异和对映体生物利用度的不同有关。实验结果表明,所建立的分析方法灵敏、准确、简便、快速,自制的环糊精手性柱可大大降低测试成本,适用于人体血浆中卡维地洛对映体的测定及药代动力学研究。

LC-APCI-MS法同时分离测定人体血浆中的精氨酸及二甲基精氨酸的含量

建立了简单、灵敏和快速分离测定人体血浆中 L-精氨酸 ( ARG)、不对称二甲基精氨酸 ( ADMA)和对称二甲基精氨酸 ( SDMA)的等度高效液相色谱 -质谱联用方法 .采用选择性离子检测 ( SIM)和大气压化学电离离子化 ( APCI) ,L-高精氨酸作内标 ,整个方法测定时间在 5 min以内 . ARG,ADMA和 SDMA的分析限均为 0 .2 μmol/ L,日间和日内测定的精密度分别为 2 .9%～ 6.7%和 2 .1 %～ 5 .2 % ,标准加入回收率为94.0 %～ 1 0 5 .0 % .采用上述方法测定人体血浆中的精氨酸及二甲基精氨酸的含量 ,结果令人满意 .

高效液相色谱-荧光检测法测定人体血浆中格列本脲的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中格列本脲浓度的高效液相色谱法,并对供试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法:血样处理采用固相萃取方法,萃取小柱用甲醇活化后加入血浆1.5mL 及内标地西泮溶液20μL,过柱后用含20%甲醇的水溶液1.0mL 洗涤,洗涤液弃去,再用甲醇1.0mL 洗脱收集,收集液于60℃水浴挥干,最后用甲醇100μL溶解,取20μL进样。色谱条件:色谱柱为 ODS C_(18)柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为0.01moL·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(用磷酸调 pH 为6.1)-乙腈(43∶57);流速为1.0mL·min^(-1);荧光检测波长为λ_(ex)=235nm,λ_(em)=354nm。人体药代动力学试验采用双周期交叉设计方案,将18名志愿受试者随机分为两组,分别口服格列本脲供试片和参比片2.5mg。结果:本方法线性范围为2～128ng·mL^(-1),r=0.9991,最低检测限为2ng·mL^(-1),方法回收率为97.6%～98.5%,日内、日间 RSD 均小于10%,供试制剂与参比制剂主要药代动力学参数经统计学分析无显著性差异。结论:本方法灵敏度高,特异性强,重复性好,供试制剂与参比制剂具有生物等效性。

超高效液相色谱-串联质谱技术分析人体血浆中硫酸吲哚酚及硫酸对甲酚含量

建立了超高效液相色谱-串联质谱法检测人体血浆中硫酸吲哚酚(IS)和硫酸对甲酚(p-CS)。血浆加入内标(p-CS-d7和IS-d4)后用乙腈稀释10倍,经涡旋、沉淀及离心后取上清液,再将上清液用超纯水稀释10倍。经Waters UPLC~? HSS T3色谱柱(100×2.1mm,1.8μm)分离,以甲醇-5mmol/L乙酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离,负离子模式下,以多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。p-CS和IS在5.0～100.0μg/L范围内线性关系良好,在1.0、5.0和10.0μg/mL 3个加标浓度水平下,p-CS和IS的回收率在95.3%～98.5%之间。该方法灵敏度高,定量准确,应用于分析23位血液透析患者血浆中p-CS和IS含量,取得了满意的结果。

人体血浆中奥硝唑的HPLC测定

目的 建立高效液相色谱法 (HPLC)测定人体血浆中奥硝唑浓度方法。方法 以C1 8柱 ( 4 .6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,甲醇 水 ( 3 0∶70 )为流动相 ,血浆样品用乙腈沉淀蛋白。结果 人体血浆中的内源物质不干扰奥硝唑的测定 ,奥硝唑在 2 .0～ 2 5 μg/ml浓度范围内峰面积与浓度线性关系良好 (r =0 .9998) ,最低检测限为 0 5 μg/ml。平均回收率为( 99.87± 0 .46) %,高、中、低 3种浓度的日内差 (RSD)≤ 2 43 %,日间差 (RSD)≤ 3 18%。结论 本方法简便、快速、准确 ,重现性好 。

固相萃取-高效液相色谱法测定人体血浆中阿奇霉素的浓度

目的:建立人体血浆中阿奇霉素 HPLC 测定法。方法:血样采用固相萃取方法,即2.0 mL 血浆过柱抽干后,用1.0 mL双蒸水连续淋洗2次,淋洗液弃去,再用1.0 mL 甲醇洗脱回收,回收液于60℃水浴挥干,最后用100 μL流动相溶解残渣,取30 μL进样。流动相为0.03 mol·L^(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH=4.5)-甲醇-乙腈(72:18:10);流速为1.0 mL·min^(-1);色谱柱为 C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温为室温;检测波长为210 nm。结果:阿奇霉素在0.01～1.44 mg·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9994),最低检测浓度为0.008 mg·L^(-1),方法回收率在98.6%～104.4%,日内、日间 RSD 均小于5.6%。结论:该方法快速、灵敏、准确,可用于人体血浆中阿奇霉素浓度的测定。

热应激对人体血浆脂质过氧化和中分子物质浓度的影响

为探索人体热暴露过热时血浆脂质过氧化（ＬＰ）和中分子物质（ＭＭＳ）含量的变化及其相互关系，对１８名健康男子，于早餐后进行热暴露２ｈ导致体温升高，当时平均Ｔｒ：３８．６３±０．２４℃，ＨＲ：１２６．６±１７．１ｂｐｍ，ＳＶ：０．８７３±０．３０７ｋｇ，ＰＳＩ：２．２８８，经汗的失水量占体重的１．３１％，尿ＶＭＡ浓度增高２３．１％，２４ｈ尿ＶＭＡ排出量为４７．６±１０．８μｍｏｌ，超过正常范围。但血浆ＭＭＳ浓度几乎无变化，血浆ＭＤＡ浓度增高６．２％，而血浆ＧＳＨ－ｐｘ浓度增高４６．１％（Ｐ＜０．０１），ＧＳＨ－ｐｘ／ＭＤＡ比值增高３５．８％（Ｐ＜０．０５）。实验显示，早餐后的热暴露未能如晚餐后热暴露明显提高血浆ＭＭＳ浓度和防止过热组织过度的ＬＰ。

高效毛细管电泳法分离检测人体血浆中盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因

建立毛细管区带电泳同时测定人体血浆中盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因含量的方法.在75μm I.D×60cm未涂层石英毛细管中,以30mmol/L Tris-HCl为电泳缓冲溶液,分离电压为22kV时,两种被测组分在5min内达到基线分离.盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因的检出限分别为0.50、0.30μg/mL,样品加标回收率在88%～95%之间,相对标准偏差(RSD)均小于5%.该方法简便、快速、准确,并成功用于人体血浆样品的分析.

影响人体血浆纤维蛋白原的因素及其临床意义

目的 探讨各种可能影响因素对血浆纤维蛋白原的影响及其临床意义。方法 选择 1 0 5例高纤维蛋白原者作病例 ,按 1 :1配比设置对照 ,,并随访比较高纤维蛋白原组和低纤维蛋白原组人群心血管疾病的发生情况。结果 体重指数、高脂肪饮食、吸烟、体力活动少、高血压、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、一级亲属的血浆纤维蛋白原水平等九个因素进入回归方程 ;高纤维蛋白原组一级亲属纤维蛋白原水平 (6 .1± 0 .8g/L)高于低纤维蛋白原组的一级亲属 (4 .4± 0 .5 g/L) ;血浆纤维蛋白原浓度高者CHD的发病率 (2 4 % )明显高于血浆纤维蛋白原低者的CHD发病率 (1 0 % )。结论 体重指数、高脂肪饮食、吸烟、体力活动少、高血压、甘油三酯、低密度脂蛋白与血浆纤维蛋白原水平呈正相关 ;而高密度脂蛋白与血浆纤维蛋白原水平呈负相关 ;遗传对血浆纤维蛋白原水平有一定的影响 ;

改良HPLC法测定人体血浆氯雷他定水平

氯雷他定为新一代抗组织胺药物，在治疗剂量范围内几乎无明显神经系统毒副作用。目前关于氯雷他定水平的测定方法有放射免疫法、化学发光法、气相色谱法、高效液相色谱法（HPLC）等，但均存在不足之处。2010年1月，我们采用改良HPLC法对人体血浆中氯雷他定质量浓度进行测定，效果满意。现报告如下。

遗传与环境因素对人体血浆纤维蛋白原水平的影响及临床意义

为探讨遗传与环境因素对血浆纤维蛋白原 ( Fg)的影响及临床意义 ,选择 10 5例血浆 Fg升高者 (高 Fg组 )按 1∶ 1配比设置对照 ,随访比较高 Fg(高 Fg组 )和低 Fg(低 Fg组 )患者及其一级亲属冠心病 ( CHD)发生情况。结果体重指数、高脂肪饮食、吸烟、体力活动少、高血压、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及一级亲属血浆 Fg水平等因素进入回归方程 ;高 Fg组一级亲属 Fg水平 [( 6 .1± 0 .8g/ L) ]高于低 Fb组一级亲属 [( 4 .4±0 .5 g/ L) ];血浆 Fg浓度高者 CHD发病率 ( 2 4 % )明显高于低 Fg者 ( 10 % )。提示体重指数、高脂肪饮食、吸烟、体力活动少、高血压、甘油三酯、低密度脂蛋白与 Fg水平呈正相关 ;而高密度脂蛋白与 Fg呈负相关 ;遗传因素对 Fg有一定影响 ;Fg浓度升高是

人体血浆脂蛋白中维生素E的分布

作者用高效液相色谱法(HPLC)检测了健康男性，非妊娠女性，孕妇及脐血之红细胞、血浆、脂蛋白组分中维生素E(a-生育酚)的分布状况，见表一。同时报道了口服右旋-a-生育酚前后，受试者血中浓度的变化，见表二。

采用硫因改性pHEMA膜从人体血浆中去除镉离子

我们制备了载有汽巴蓝F3GA的聚2－羟乙基异丁烯酸（pHEMA)膜并使用它从人体血浆中去除镉离子。在偶氮二异丁腈存在的情况下，通过HEMA的光聚合反应制备了pHEMA膜。然后将活性染料配位体汽巴蓝F3GA共价地附着在膜中。染料的最大负载为1.07μmol/cm^2。然后将硫因吸附在载有汽巴蓝F3GA的膜中。被吸附硫因的最大量为0.9μmol/cm^2。在汽巴蓝F3GA发生衍生作用后没有观察到pHEMA膜的水膨胀特性和接触角（水中的空气）发生变化。我们使用了这些膨胀率为58％（质量分数），载有汽巴蓝F3GA和／或硫因亲水性的膜进行了去除镉离子的研究。附着有汽巴蓝F3GA和附着有汽巴蓝F3GA／吸附有硫因的pHEMA膜从人体血浆中去除镉离子的最大量为1.7μmol。这些新型的亲和金属－缩氨酸pHEMA膜可反复用于吸附和解吸镉离子，而其吸附量没有明显的减少。