超高效液相色谱-串联质谱法快速测定人体血清中12种全氟烷基和多氟烷基物质的含量

传统和新型全氟烷基和多氟烷基物质(PFASs)是一类持久性有机污染物,由于其会对人类产生潜在的健康风险而引起越来越多的关注,因此提出了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中7种全氟羧酸类化合物、3种全氟磺酸类化合物和2种新型PFASs替代品[全氟(2-甲基-3-氧杂己酸)(HFPO-DA),6∶2氯代多氟醚基磺酸(6∶2 Cl-PFESA)]含量的方法。健康人血清样品经解冻后,加入混合内标溶液和体积比1∶1的乙腈-甲醇混合溶液,超声混匀后于-20℃冷冻1 h,于4℃高速离心,上清液经真空冷冻挥干后复溶于体积比的3∶7甲醇-水混合溶液中,冰浴中涡旋混匀、超声,于4℃高速离心后,上清液上机测定。12种PFASs在Phenomenex Kinetex F5色谱柱上以不同体积比的2 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液和甲醇的混合液梯度洗脱分离,电喷雾离子源负离子模式电离,多反应监测模式检测,以胎牛血清为基质进行内标法定量。结果显示:12种PFASs质量浓度和内标的质量浓度比值与其峰面积比值均在一定范围内呈线性关系,检出限(3S/N)为0.005~0.01μg·L^(-1);在3个浓度水平进行加标回收试验,回收率为88.5%~112%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.20%~8.7%;方法用于20份健康人血清样品的分析,9种PFASs检出率为100%(包括一种新型PFASs替代品6∶2 Cl-PFESA)。

气相色谱-三重四极杆质谱法测定人体血清中新型溴代阻燃剂

新型溴代阻燃剂(NBFRs)作为多溴二苯醚(PBDEs)的替代品,具有优良的防火性能.但有研究发现,NBFRs可能存在神经毒性和发育毒性等作用,从而对人体造成潜在的健康风险.血清作为人体内暴露的重要生物标志物,对评估健康风险具有重要意义.目前关于人体血清中NBFRs的健康风险研究较少,且血清中NBFRs含量低,前处理程序繁琐,基质复杂,给NBFRs的分析检测带来了很大困难.本研究建立并优化了人体血清中五溴苯(PBBz)、五溴甲苯(PBT)及十溴二苯基乙烷(DBDPE)等9种NBFRs的前处理,及气相色谱-三重四极杆质谱检测方法.血清样品经乙酸乙酯提取后,再经HLB固相萃取柱和弗罗里土-硅胶复合柱净化.采用电子轰击离子源(EI)和多反应监测(MRM)模式进行仪器分析.实验结果表明,血清样品中9种NBFRs的平均加标回收率在74%—136%之间,相对标准偏差小于21%.实际血清样品测试发现,内标物的回收率稳定在72%—126%之间,具有良好的检测效果.该方法前处理流程简单、稳定性好、灵敏度高,能广泛用于人体血清中NBFRs的分析.

番茄红素及运动对人体血清自由基代谢的影响

目的:研究补充番茄红素及运动对人体血清自由基代谢的影响。方法:将28名体育学院男生随机分为4组(每组7人):E1,E2,C1和C2,四个组再进一步分为两个组,即实验组E1和E2,对照组C1和C2。其中实验组以中等剂量补充番茄红素胶囊14天(每天摄入番茄红素25mg),对照组服用安慰剂14天,检测每组受试者在服药前及服药2周后,血清SOD、GSH-PX、T-AOC和MDA等指标的均值,然后所有受试者在服药14天后在Monark功率自行车上进行急性大强度运动,C1和E1的运动强度为90%VO_2max,C2和E2组全力骑功率自行车30s×3/间歇3 min,负荷为0.075kg/kg体重。运动后即刻,再次抽血检测受试者血清SOD、GSH—PX、T-AOC和MDA等指标的变化状况。结果:中等剂量(25mg/d)服用番茄红素胶囊14天,可以显著提高机体血清内抗氧化酶的活性,并减少脂质过氧化物MDA的浓度。急性大强度运动不论是有氧运动还是无氧运动,运动后即刻都可以使人体血清内自由基产生增多、抗氧化酶活性降低。预先补充番茄红素,可以使人体内血浆番茄红素浓度升高,从而降低急性大强度运动后人体血清脂质过氧化物MDA增高的幅度,并减少抗氧化酶的消耗。结论:中等剂量服用番茄红素胶囊14天,可以提高人体的抗氧化能力并降低急性大强度运动后人体血清脂质过氧化物MDA增高的幅度、减少抗氧化酶的消耗。

高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐酸肾上腺素

研究发现,盐酸肾上腺素在碱性条件下能显著增强铁氰化钾-鲁米诺化学发光强度.基于此建立了新的测定肾上腺素的方法.本方法以C18 反相键合相为色谱柱,用 0.01 mol/L邻苯二甲酸氢钾-甲醇(92∶ 8 , V/V)为流动相,实现了对人体血清及尿样中盐酸肾上腺素的分离与测定.在最适宜条件下,方法的线性范围为 10～5000 μg/L;检出限为 4.0×10-6g/L;相对标准偏差为 3.0%(n=11).

人体血清中的多溴联苯醚、邻苯二甲酸酯和双酚A的连续在线分离及气相色谱-质谱测定

建立了人体血清中多种环境雌激素:多溴联苯醚、邻苯二甲酸酯和双酚A的快速可靠的连续在线分离及在气相色谱-质谱上的分析方法。血清样品经过浓盐酸使蛋白质变性,用乙醚萃取,经硅胶柱分离出多个族组分:多溴联苯醚(Polybrominated diphenyl ethers,PBDEs)、邻苯二甲酸酯(Phthalate esters,PAEs)和双酚A(Bisphenol A,BPA),最后由气相色谱-质谱的选择离子检测测定。PBDEs,PAEs和BPA标准曲线回归方程拟合度R2均大于0.99,表明在测试的浓度范围内线性关系良好。PBDEs目标化合物的检出限为0.005～0.048μg/L,PAEs目标化合物的检出限为0.103～0.833μg/L,BPA的检出限是0.035μg/L。标准样品重复样中,PBDEs的RSD(relative standard deviation)值分别为2.8%～10.9%;PAEs的RSD值为5.6%～9.9%;BPA的RSD值为3.0%。实际血清样品中,PBDEs的加标回收物PCB209(Polychloride diphenyl ether 209)的回收率范围是74.8%～88.5%;PAEs中的加标回收物DBP-D4(Dibutyl phthalate-Deutorium 4)的回收率范围为78.7%～97.0%;BPA中的加标回收物BPA-D16(Bisphenol A-Deutorium 16)的回收率范围是76.3%～93.1%。本方法检测血液中多种环境雌激素灵敏度高、重现性和回收率均良好。

人体血清中原卟啉Ⅸ自体荧光光谱研究

通过对人体血清样品和模拟人体生理条件下原卟啉Ⅸ和牛血清白蛋白混合溶液的荧光光谱测定和分析,表明人体血清中原卟啉Ⅸ的自体荧光光谱主要来自于原卟啉Ⅸ和血清白蛋白的结合形式。此外,还考察了血清白蛋白和原卟啉Ⅸ对原卟啉Ⅸ荧光发射峰的影响。和不含有白蛋白的原卟啉Ⅸ溶液相比较,白蛋白不但使原卟啉Ⅸ产生的荧光峰发生红移,而且具有很强的增敏效应。在白蛋白存在条件下,当原卟啉Ⅸ浓度值小于0.8×10-5mol·L-1时,随着它的浓度增加,原卟啉Ⅸ的荧光发射峰稍有红移;而当原卟啉Ⅸ浓度值大于0.8×10-5mol·L-1时,其荧光发射波长几乎不随原卟啉Ⅸ浓度而变化。

番茄红素对人体血清自由基的清除作用

评价番茄红素对人体血清自由基的清除效果。志愿者在服用不同剂量(5、10、15 mg/d)的番茄红素后在不同时间(15、30、45、60 d)下考察其血样中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)的含量变化,同时考察第60 d时各组志愿者在补充番茄红素次日进行力竭性运动后,其运动前后血样中T-AOC,SOD,GSH-PX和MDA含量变化。实验结果表明,相比空白对照组而言,不同剂量组的受试者在服用番茄红素后,随着服用天数和服用剂量的增加,其体内血清中的GSH-PX酶活力和SOD酶活力呈现升高趋势,但GSH-PX的酶活力只有在低剂量组摄入天数为15 d时表现出差异显著,其余随天数和剂量变化均不显著。SOD的酶活力只有在低、中剂量组摄入天数为30 d时表现出差异显著,其余随天数和剂量变化均不显著。而T-AOC酶活力呈现升高趋势且差异不显著,MDA含量呈现下降趋势且差异不显著。而且,相比运动之前,经过力竭性运动后,不同剂量组中的T-AOC、SOD含量和GSH-PX含量均有显著降低,而MDA含量则有显著升高。提前摄入番茄红素胶囊,能够减少体内抗氧化酶的消耗和体内的MDA的含量。综上所述,番茄红素能够有效清除人体血清中的自由基。

固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法测定人体血清中7种全氟化合物

建立了固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法检测人体血清中全氟己烷磺酸、全氟庚酸、全氟辛酸、全氟辛烷磺酸、全氟壬酸、全氟癸酸和全氟十一酸7种全氟化合物。血清中加入NaAc缓冲溶液及内标后,在37℃条件下酶解提取12h,提取液经WAX固相萃取小柱净化,采用ACQUITY UPLC？HSS C18色谱柱,以乙腈-5mmol/L NH4Ac溶液为流动相,梯度洗脱后,在电喷雾离子源负离子模式下以多反应监测（MRM）方式进行扫描,内标法定量。7种目标全氟化合物在1.0~50.0μg/L范围内线性关系良好,检出限为0.1μg/kg,回收率74.0%~105.6%。

原子吸收光谱法测定人体血清中的微量元素锌、铜、铁、钙和镁

本法不需要消解样品,样品经分离稀释后,直接用火焰原子吸收光谱法测定人体血清中的锌、铜、铁、钙和镁5种微量元素的含量。该方法简便,快速,精密度高,相对标准偏差(RSD≤8.52%)回收率在95%—100%之间。结果准确可靠。

人体血清中胆红素荧光光谱初步分析

利用分子荧光和紫外-可见吸收光谱仪分别测定了在模拟生理条件下的胆红素、胆红素和牛血清白蛋白混合溶液的荧光光谱和吸收光谱,同时也测定了一些体检者血清样品的荧光发射光谱。实验结果表明:不同情况下的胆红素溶液具有不同的荧光光谱和吸收光谱;血清白蛋白对胆红素荧光具有增敏效应。此外,初步认为所测得的人体血清样品位于约524 nm处的荧光不是主要来自于人体血清中白蛋白结合形式的胆红素组分贡献。

高效液相色谱法定量尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度

目的:建立高效液相色谱法测定尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度。方法:用Agilent ZORBAX SB-Aq column色谱柱,ZORB-AX-Extend C18预柱,以甲醇和47mmol/L KH2PO4水溶液作为流动相,流速:1.0mL/min,检测波长为260nm。结果:血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的线性范围分别是(1.667～166.667)×103 ng/mL(r=0.9995)、(0.033～3.338)×103 ng/mL(r=0.9994)和(0.033～3.338)×103 ng/mL(r=0.9996),日间与日内精密度均<15%。结论:该法灵敏度高,精密度和准确度佳,能满足非布司他体内药效学研究。

运动对人体血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性影响的研究

为了探讨人体在不同功能状态下一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)的变化 ,应用跑台提供运动负荷 ,分别对 36名大学生进行了安静、亚极量负荷和力竭性运动后血清中NO和NOS的测定 ,结果发现 ,亚极量负荷下血清中NO含量极显著高于安静状态时 (P <0 .0 0 1) ,NOS活性极显著地低于安静状态时 (P >0 .0 0 1) ;力竭性运动后 ,NO含量和NOS活性极显著低于亚极量负菏时 (P <0 .0 0 1) ,并且NO已降至低于安静时的水平 (P >0 .0 5 ) .提示 ,人体血清中NOS活性随运动负荷的增大而持续下降 ;NO含量在运动的开始阶段随运动负荷的增大而升高 ,但当达到一定水平时 ,则随运动负荷的继续增大而下降 .

阴离子交换色谱-荧光检测法测定人体血清中酪氨酸及其代谢产物

建立了阴离子交换色谱-荧光检测法（AEC-FLD）同时测定人体血清中的酪氨酸（Tyr）、对羟苯基乳酸（PHPLA）和对羟苯基丙酸（PHPA）的分析新方法。样品经乙腈处理沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样检测。采用IonPac AG21保护柱（50×2mm）、IonPac AS21分析柱（250×2mm）,流动相为4mmol/L NaOH溶液,流速为0.45mL/min,荧光检测器的激发波长和发射波长分别为277nm和340nm。优化条件下三种物质能得到良好的分离和检测。Tyr、PHPLA和PHPA的线性范围分别为0.30-25mg/L、0.025-2mg/L和0.025-2mg/L,相关系数在0.9998-0.9999之间,检出限（S/N=3）分别为0.024mg/L、0.020mg/L和0.019mg/L。三个水平的加标回收率在72.6%-99.1%之间,其相对标准偏差均小于6.62%。该方法简单、快速、准确,可用于实际样品的测定。

地方性氟砷中毒地区改水10年后对人体血清铁、镁、铜、锌含量影响的研究

[目的 ]了解改水 1 0年后高氟高砷对血清 Fe、 Mg、 Cu、Zn含量的影响。 [方法 ]对改水前常住该地区5～ 1 0年的 2 0～ 60岁的 1 73名成人 (其中 56名为原高氟高砷区居民 ,60名为原高氟区居民 ,57名为对照区居民 )及改水后出生的 3～ 1 0岁的 66名儿童 (其中 2 2名是原高氟高砷区出生的儿童 ,1 8名为原高氟区出生儿童 ,2 6名为对照区儿童 )进行血清 Fe、 Mg、 Cu、 Zn的测定。 [结果 ]经统计分析后发现 ,改水 1 0年后氟、砷对成人血清 Cu、 Fe、Zn的影响不大 ,但对血清 Mg的影响却是持续的。改水后出生的儿童 3个地区上述 4种元素相比均未发现有不良影响。 [结论 ]氟、砷中毒对 Mg代谢存在远期效应 ,但对其子代的 Fe、 Mg、 Cu。

凝胶渗透色谱结合气相色谱-负化学源质谱法分析人体血清中的14种多溴联苯醚

多溴联苯醚（ PBDEs）是溴系阻燃剂的主要成分，被广泛地应用在工业领域中，其在自然环境、动物体内以及人体内都普遍存在，可能对人体带来健康危害。血液是评价机体污染物负荷水平的重要样本，常用作人群负荷水平调查的指示物，但因血液中非极性脂溶性物质PBDEs含量较低，增加了定量分析的难度。

高效液相色谱电生Mn(Ⅲ)化学发光法检测人体血清和尿样中的卡托普利

The separation and determination of captopril in human serum and urine samples by means of high performance liquid chromatography(HPLC) with on-line electrogenerated Mn(Ⅲ) chemiluminescence detection was carried out. The method was based on the direct chemiluminescence reaction between captopril and Mn(Ⅲ), which was on-line electrogenerated by constant current electrolysis. The chromatographic separation was performed on a nucleosil RP-C18(250 mm×4.6mm i.d., 5 μm) column with an isocratic mobile phase consisting of acetonitrile-1% aqueous acetic acid(volume ratio 6∶4) at a flow-rate of 1.2 mL/min. The temperature was 25 ℃. The effects of several parameters on the HPLC resolution and CL emission were studied systematically. Under the optimal conditions, the linear range and detection limit for captopril are 5—800 ng/mL and 0.9 ng/mL, respectively. The relative standard derivation for 10.0 ng/mL captopril is 2.2%(n=11). The average recoveries for captopril in human serum and urine samples ranged from 94.8% to 103.2%, and the relative standard deviations of the quantitative results are below 3.4%. The proposed method had been applied to the determination of captopril in human serum and urine samples.

多维标度线性回归技术应用于人体血清临床指标的FTIR光谱定量分析

人体血清临床指标是衡量人体健康和亚健康水平的重要因素之一,采用傅里叶红外(FTIR)光谱技术实现人体血清临床指标的多成分快速同时检测。提出利用多维标度法(MDS)对光谱变量进行降维,结合多元线性回归(MLR)技术,建立多维标度线性回归(MDS-MLR)模型,为血清四种临床生化指标(葡萄糖、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿素)的定量分析优选光谱信息波长点,优化定标预测模型,结合移动平均法(MA)进行光谱预处理,得到良好的建模效果。通过检验集样品进行验证,检验相关系数均在0.9以上。结果表明,MDS-MLR方法具有人体血清临床指标FTIR光谱分析的应用潜力。FTIR技术结合MDS-MLR定量分析方法可以实现对人体健康和亚健康水平的快速评定。

高效液相色谱化学发光法检测人体血清中的头孢氨苄和甲氧苄啶

头孢氨苄（Cefalexin，CFX）和甲氧苄啶（Trimethoprim，TMP）是两种活跃的抗菌药。CFX属半合成的第一代头孢菌素类药物，可通过抑制细菌细胞壁合成而杀灭细菌，在临床上广泛用于敏感菌所致多种呼吸道、泌尿道等感染的治疗；TMP为人工合成的二氨基嘧啶类药物，能够抑制细菌二氢叶酸还原酶，使二氢叶酸不能还原成四氢叶酸，以致阻碍核糖核酸的合成，

矿物粉尘对人体血清物质的吸附行为研究

通过测定吸附后人体血清的成分 ,并利用红外光谱研究了几种矿物粉尘对血清中物质的吸附作用 ,结果表明 ,矿物粉尘对血清中物质的吸附具有选择性 ,主要是吸附了血清中的蛋白质和脂类等生物大分子。不同矿物吸附生物大分子的选择性不同 ,这主要与矿物的结构和表面活性等因素有关。红外光谱研究表明 ,吸附机理主要是物理吸附 ,可能也存在化学吸附。另一方面 。

高效液相色谱测定人体血清中低浓度盐酸伪麻黄碱的含量

目的:建立一种测定人体血清中低浓度盐酸伪麻黄碱含量的高效液相色谱法。方法:取人体血清0.5mL,加入内标苯丙醇胺后,加入混合碱溶液(1000mL 水中含有10g 氢氧化钠和40g 碳酸钠)0.5mL 碱化,乙醚-正己烷(1∶1)振荡萃取,离心,有机相盐酸酸化,水浴中氮气挥干。残渣用100μL流动相溶解,进样。流动相为0.05mol·L^(-1)磷酸二氢钾(含0.005mol·L^(-1)庚烷磺酸钠,用磷酸调pH=2.6)-乙腈(85∶15)。流速:0.8mL·min^(-1)。紫外检测波长:195nm。结果:盐酸伪麻黄碱的线性范围为400-12.5ng·mL^(-1),加权回归r=0.998,最低检测限为8ng·mL^(-1),方法的回收率为60%-80%,日内 RSD 为3.3%-17.5%,日间 RSD 为8.2%-17.8%。结论:本方法灵敏度较文献报道的灵敏度高近10倍,操作简单,专属性和重现性均符合要求,可用于口服低剂量盐酸伪麻黄碱的血药浓度测定和药代动力学研究。