整合酶抑制剂治疗人免疫缺陷病毒1型的临床疗效及对患者病毒载量和CD4^(+)T细胞的影响

目的探讨整合酶抑制剂治疗人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患者的临床疗效及对患者病毒载量和CD4^(+)T细胞的影响。方法选取2020年8月至2022年2月九江市第三人民医院收治的88例HIV-1患者作为研究对象,按照随机抽签方式分为观察组与对照组,每组44例。对照组采用常规HIV-1治疗方案,观察组采用整合酶抑制剂治疗。比较两组临床疗效、CD4^(+)T细胞计数、病毒载量水平及治疗安全性。结果观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1个月、3个月、6个月、1年、1.5年,观察组CD4^(+)T细胞计数水平均高于对照组,病毒载量水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良事件发生率比较差异无统计学意义。结论整合酶抑制剂治疗HIV-1患者的临床疗效显著,能更大程度地降低病毒载量和提升CD4^(+)T细胞水平,且安全性较高,值得推广应用。

人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的研究进展

人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者常常以自身免疫系统的过度活化为其显著特征,并且HIV疾病进展与自身的免疫活化程度密切相关。调节性T细胞(Treg)在维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面发挥着重要的作用。在HIV-1感染者中,Treg不仅限制机体的过度免疫活化,而且可能抑制针对HIV-1特异的细胞免疫应答;因此,Treg对HIV疾病进展的影响是利是弊,至今尚无定论。对此,深入了解HIV感染者中Treg"量"和"质"的变化及其在HIV感染中的作用,不仅有助于解决目前有关"Treg在HIV病程进展中作用"的争论,而且将有助于设计抗HIV的方案,以期为今后艾滋病的治疗和疫苗的研究提供新的靶点以及提供新的思路和理论参考。

天花粉蛋白抗人免疫缺陷病毒1型研究

目的检测用基因工程方法制备的天花粉蛋白抗人免疫缺陷病毒1型的活性。方法将人免疫缺陷病毒1型在细胞系中培养,加入天花粉蛋白后,观察细胞病变情况,检测P24抗原及逆转录酶的活性。结果加入天花粉蛋白的细胞始终未见细胞病变,P24抗原及逆转录酶检测均为阴性;阴性对照组细胞在第7 d以后均出现人免疫缺陷病毒1型感染典型细胞病变,P24抗原及逆转录酶检测均为阳性;阳性对照组始终未见HIV-1感染典型细胞病变,逆转录酶的活性检测和P24抗原检测结果均为阴性。结论天花粉蛋白在培养细胞系中可以有效地抑制人免疫缺陷病毒1型。

人源单克隆抗人免疫缺陷病毒1型抗体Fab段基因的获得

应用噬菌体抗体库技术有效地筛选出了多株抗HIV 1人源单克隆抗体。以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)从HIV 1感染者外周血淋巴细胞中扩增抗体轻重链可变区基因 ,插入载体 pCOMB3 ,建立噬菌体抗体库。分别以HIV 1gp41、gp12 0和 gp16 0为固相抗原 ,经过多轮筛选 ,从中获得了多株抗HIV 1gp41、gp12 0和 gp16 0的单克隆抗体Fab段基因。抗HIV特异性噬菌体抗体随抗体库的筛选高度富集 ,抗gp41阳性克隆率由第 2轮的 5 %增加到第6轮的 87%。间接ELISA、竞争抑制ELISA和Dotblot检测结果表明 ,获得的抗HIV 1噬菌体抗体具有较高抗原结合活性和特异性。研究结果显示 :应用该技术获得人源抗病毒基因工程单克隆抗体既省时省力 ,又可获得任意目的单抗基因 ,且易获得高亲和力的抗体。

人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)gag基因疫苗的免疫原性

目的 :检测人免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)gag基因疫苗的免疫原性。方法 :分别以ELISA、荧光抗体染色和乳酸脱氢酶释放法 ,检测免疫小鼠血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量和淋巴细胞杀伤效应。结果 :血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量及淋巴细胞杀伤效应 ,重组质粒pVAXGAG免疫组与空载体pVAX1对照组相比较差异显著(分别为P <0 .0 5和P <0 .0 1)。结论 :HIV 1DNA疫苗质粒pVAXGAG在BALB/c小鼠中不仅可诱导特异性体液免疫 ,而且可诱导特异性细胞免疫。

树突状细胞与人免疫缺陷病毒1型感染

树突状细胞在人免疫缺陷病毒1型感染过程中发挥重要作用。一方面树突状细胞可以清除病毒,另一方面人免疫缺陷病毒1型感染也会造成树突状细胞数量的减少和功能的削弱,从而逃避免疫清除。研究树突状细胞与人免疫缺陷病毒1型之间的相互作用,对于基于树突状细胞的人免疫缺陷病毒疫苗研发具有重要意义。

人免疫缺陷病毒1型的亚型分类

人免疫缺陷病毒(HIV)有两型:HIV-1和HIV-2。HIV-1基因具有很高的变异性,因而对HIV-1基因进行分类是该病毒基因研究的重要部分。本文就HIV-I亚型分类的进展作了综述。

针对人免疫缺陷病毒1型辅助受体CCR5 RNA干扰表达载体的构建

目的:抑制细胞表面人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的辅助受体CCR5表达,阻止HIV-1进入靶细胞。方法:设计CCR5靶向的发夹状siRNA,合成2条互补的寡核苷酸链,退火后重组入pRNAT-U6.2载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹pRNAT-U6.2-siCCR5后转染U937细胞,采用RT-PCR和流式细胞术分别检测CCR5基因mRNA和蛋白表达的变化。结果:重组子pRNAT-U6.2-siCCR5,经过测序鉴定与设计一致。RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-siCCR5细胞的CCR5基因表达水平显著降低于未转染对照组和转染空载体细胞(P<0.05)。未转染对照组U937细胞表面CCR5的表达率为(83.10±6.52)%,转染空载体组为(81.44±4.97)%,转染pRNAT-U6.2-siCCR5组为(1.94±0.06)%,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建出沉默细胞CCR5基因表达的siRNA载体。

人免疫缺陷病毒1感染非特异性免疫研究进展

在急性人免疫缺陷病毒1(HIV-1)感染时,病毒的病原体相关分子模式被感染细胞的病原体识别受体所识别,从而触发信号级联反应,启动非特异性抗病毒机制,发挥抗病毒作用。HIV-1感染非特异免疫涉及病原体感知、病毒限制性因子、自然杀伤(NK)细胞的抗病毒作用以及病毒逃逸策略等多个方面。

人免疫缺陷病毒1型Rev单链抗体细胞内免疫抗病毒基因治疗研究

应用抗HIV 1Rev单链抗体细胞内免疫方法 ,研究在人T细胞和周围血淋巴单核细胞内抗病毒复制的效果 ,探讨细胞内免疫抗HIV 1基因治疗的可行性。克隆抗HIV 1Rev单链抗体 (sFv)基因 ,以逆转录病毒为基因载体 ,将包装后的含靶基因的逆转录病毒转导至人CD4 阳性T 细胞株CEM和SupT1,以及HIV 1阴性自愿者的周围血淋巴单核细胞 (PBMC) ,再分别用不同剂量 (MOI)的HIV 1病毒株PNL4 3 和HxB2 进行病毒攻击实验。测定HIV 1p2 4抗原。滴度以了解抗病毒复制的效果 ,检测带报道基因CAT以了解靶基因在细胞内的表达状况。分别应用0 2 4、0 0 6和 0 0 2 4MOI的PNL4 3 或HxB2 病毒株攻击 ,测定p2 4抗原。结果显示 ,抗RevsFv细胞内表达能有效地抑制病毒在细胞内的复制 ,与对照组比较 ,病毒复制被抑制效率达 90 %以上。体外培养细胞 2个月 ,仍可观察到效果 ,病毒攻击后合胞体细胞形成显著减少。CAT实验表明 ,逆转录病毒载体可使靶基因在人T细胞和PBMC内有效表达。抗HIV 1RevsFv细胞内表达可有效地抑制病毒复制 ,有望成为抗HIV

广东省人免疫缺陷病毒1亚型基因序列特征分析

目的研究广东省人免疫缺陷病毒1(HIV-1)亚型的基因序列特征。方法 2002年采集100份 HIV-1感染者的外周静脉抗凝血,分离单核细胞(PBMC),提取前病毒 DNA,通过聚合酶链反应(PCR)扩增,获得包膜蛋白(ENV)区基因的核酸片段,并对其 C2～V3及邻区核苷酸序列进行测定和分析。所得序列用 GCG 软件包进行系统进化树和氨基酸变异分析。结果经过离散率计算和系统进化树分析后证实,其 PCR 扩增阳性的75份样品中,44份(58.7%)为重组毒株 CRF01-AE(circulating recombinant form 01-AE),27份(36%)为 CRF-BC,4份为泰国 B′亚型(5.3%)。结论广东省 HIV-1以 CRF01-AE 和 CRF-BC 为主,也存在泰国B′亚型。目前我省境内有多种亚型存在,流行趋势日益严峻。加强艾滋病患者的治疗,以及控制和预防艾滋病的传播是今后面临的重要任务。

河南省人免疫缺陷病毒1型流行现状研究

目的了解河南省人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）毒株的亚型状况及序列变异、流行特征，分析其传播来源和传播规律。方法对2006--2007年在河南省采集的1287例HIV-1感染者抽取静脉血，用巢式聚合酶链反应（nest．PCR）对单个核细胞中前病毒脱氧核糖核酸的env基因和gag基凶进行扩增，并测定和分析核苷酸序列。结果1287份样本中存在B’、C亚型及BC、AE两个重组亚型，其在所有分析样本巾的比例分别为95．882％（1234／1287）、0．466％（6／1287）、2．875％（37／1287）、0．777％（10／1287）。与国内及国际的参考毒株RL42、C．95in21068、07-BC．CN．97．C54A、0JAE．TH．90．CM240间的离散率分别为（9．327±0．245）％、（5．214±0．183）％、（6．278±0．194）％、（5．332±0．158）％。结论目前河南省艾滋病感染者巾有B’、C亚型及BC、AE两个重组亚型。泰国B’亚型依然占主导地位。B’亚型以既往有偿献血人员为主，BC亚型以性传播为主，AE亚型以性传播及既往献血途径为主，C亚型以性传播为主。

河南省1157份人免疫缺陷病毒1型毒株亚型分析

目的了解河南省人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）毒株的亚型状况及序列变异、流行特征，分析其传染来源及传播规律，为河南省艾滋病防治策略提供依据。方法对2005-2006年在河南全省收集的1157例HIV-1感染者抽取静脉血，分离单个核细胞（PBMC），用套式聚合酶链反应（nest—PCR）对单个核细胞中前病毒脱氧核糖核酸（DNA）的膜蛋白（env）基因进行扩增，并对其C2-V3区核苷酸序列进行了测定和分析。结果1157份样本中存在B’、C亚型及BC、AE2个重组亚型。其在所有分析样本中的比例分别为96．456％（1116／1157）、0．346％（4／1157）、2．593％（30／1157）、0．605％（7／1157）。与国内及国际的参考毒株RL42、C．95in21068、07-BC．CN．97．C54A、01AE．TH．90．CM240间的离散率分别为（8．971±3．182）％、（5．109±0．112）％、（3．568±0．254）％、（4．775±0．128）％。B’亚型以既往有偿献血人员为主，BC亚型以性传播为主，AE亚型以性传播及既往献血途径为主，C亚型以性传播为主。结论目前河南省艾滋病感染者中有B’、C亚型及BC、AE两个重组亚型。泰国B’亚型依然占主导地位。在局部地区，非B’亚型有聚集的现象，应引起当地卫生机构的注意，加大对流动人员的检测。

抗人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)外膜蛋白gp120单链抗体基因的构建及测序鉴定

目的 构建抗HIV 1gp120单链抗体基因,为进一步用于HIV 1感染的诊断和治疗奠定基础。方法 利用 RT PCR法,从抗HIV 1gp120单克隆抗体杂交瘤细胞扩增得到抗体轻链和重链的可变区基因,经重叠延伸反应, 在体外随机合成单链抗体基因(ScFv),并克隆到pGEM Easy T载体中,经测序及Blast同源性分析。结果 该 ScFV基因全长为666bp,为VH Linker VL结构,VH基因为396bp,编码132个氨基酸;Linker为(Gly4Ser)3短 肽;VL基因为270bp,编码90个氨基酸。VH基因与小鼠IgG2a重链可变区的同源性达95%,VL基因与小鼠免 疫球蛋白κ轻链可变区的同源性达98%。结论 成功构建了抗HIV 1gp120单链抗体基因。

人免疫缺陷病毒-1整合酶及其抑制剂的研究进展

整合酶 (integrase)对于人免疫缺陷病毒 (HIV) 1逆转录病毒的复制来说是必不可少的 ,因而成为抗艾滋病 (AIDS)药物设计的一个理性的靶点。最近文献报道了大量具有抗整合酶活性的化合物 。

人免疫缺陷病毒-1 gag基因在人成熟精子中的表达

目的:探讨人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)gag基因在人成熟精子中实现mRNA水平表达的可能性。方法:构建含HIV-1gag基因DNA的质粒,转染入人成熟精子,培养24 h后用RT-PCR法检测精子gag mRNA的表达。结果:在转染质粒后的人成熟精子中检测到HIV-1 gag mRNA的表达。结论:HIV基因可在人成熟精子中实现mRNA水平的表达。

人免疫缺陷病毒1型感染患儿感染病毒量和病情进展的关系

据《N Engl J Med》1997年336卷第19期报道 目前,对产期感染人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患儿体内HIV-1 RNA的报道尚不多见。为了解HIV-1感染情况及其与病情进展的关系。

HIV-1病毒样颗粒的纯化及其免疫原性

目的纯化HIV-1病毒样颗粒,并检测其免疫原性。方法稳定表达HIV-1结构蛋白Gag和Env的重组293细胞经大规模培养后,收集培养上清,经30%蔗糖垫两次纯化,免疫BALB/c小鼠,Western blot检测小鼠血清中抗体水平。结果重组293细胞培养上清的纯化产物经SDS-PAGE分析,可见目的蛋白的表达。Western blot检测显示,纯化蛋白具有良好的反应原性。免疫小鼠后能够诱导产生针对目的蛋白的抗体,其抗体水平呈剂量依赖关系。结论纯化的HIV-1病毒样颗粒能够诱导小鼠产生抗体,具有良好的免疫原性。

HIV─1病毒蛋白U基因对HIV─1Env蛋白合成与免疫原性的影响

以重组痘苗病毒作载体，探讨了关于ＶｐｕＯＲＦ对人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）Ｅｎｖ蛋白合成和免疫原性的影响。结果表明，如果存在ＶｐｕＯＲＦ，Ｅｎｖ蛋白的合成降低，并且降低其产生抗Ｅｎｖ抗体的水平。去掉ＶｐｕＯＲＦ，不但提高Ｅｎｖ蛋白的合成。