紫草素对人共刺激细胞杀伤胃癌细胞的影响及其机制

目的:观察紫草素作用前后对人共刺激细胞的增殖及对胃癌细胞NCI-N87、BGC-823、HGC-27杀伤活性的影响,并探讨其作用机制.方法:分离健康者外周血单个核细胞,在体外经CD3单克隆抗体(CD3 monoclon antibody,CD3 mAb)、白介素2(interleukin-2,IL-2)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、白介素1α(interleukin-1α,IL-1α)、CD28 mAb、IL-15和IL-21共同诱导为人共刺激细胞,予不同浓度紫草素诱导人共刺激细胞和3株胃癌细胞24、48、72 h后,水溶性四唑盐(cell counting kit-8,CCK8)法检测人共刺激细胞增殖率,四甲基偶氮唑蓝(colorimetric methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测胃癌细胞的抑制率,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测人共刺激细胞颗粒酶B(granzyme B,GraB)、穿孔素(perforin,PFP)、CD107a、IFN-γ的表达,Western blot检测人共刺激细胞β-catenin、P-ERK1/2、P-AKT和Bcl-2的表达,乳酸脱氢酶释放法(lactate dehydrogenase,LDH)检测紫草素对人共刺激细胞杀伤3株胃癌细胞的活性影响.结果:经紫草素诱导48 h后,人共刺激细胞0.2-50μg/L浓度组增殖明显(P<0.05),6-25μg/L浓度组GraB、PFP、CD107a、IFN-γ和β-catenin、p-ERKl/2、Bcl-2、P-AKT的表达显著高于对照组(P<0.05),且对NCI-N87、BGC-823、HGC-27的杀伤活性较对照组增强(P<0.05).结论:紫草素在一定浓度范围内能够促进人共刺激细胞增殖,并增强其对胃癌细胞NCI-N87、BGC-823、HGC-27的杀伤活性,其机制可能与活化β-catenin、P-ERKl/2、B c l-2、P-A K T和P F P、G r a B、C D107a、IFN-γ的表达有关.