电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定人凝血因子Ⅷ/血管性血友病因子复合物冻干注射剂中的21种元素

目的建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)同时测定人凝血因子Ⅷ/血管性血友病因子复合物冻干注射剂中硼(B)、镁(Mg)、铝(Al)、硅(Si)、钒(V)、镉(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、钴(Co)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、锶(Sr)、锆(Zr)、钼(Mo)、铑(Rh)、钯(Pd)、锡(Sn)、钡(Ba)、铈(Ce)、铅(Pb)元素含量的方法。方法样品经微波消解后,以钪(Sc)、锗(Ge)、铟(In)、铋(Bi)为内标,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法同时测定上述元素的含量。ICP-MS功率为1550 W,采样深度为10.0 mm,等离子气、雾化气、辅助气流量分别为15.0、0.99、0.9 L·min^(-1),泵速为0.10 r·s^(-1),雾化室温度为2℃,硼(B)元素采用No Gas调谐模式,其他元素采用He调谐模式,数据采集3次。结果21种元素在测定的浓度范围内,线性关系良好,相关系数r>0.9990;检出限为0.001~2.04μg·L^(-1);各元素回收率为87.78%~102.72%,RSD为1.31%~7.91%。结论该方法快速简便、灵敏度高、准确性好,可用于人凝血因子Ⅷ/血管性血友病因子复合物冻干注射剂中金属元素的检测。

人凝血因子Ⅷ/血管性血友病因子复合物制备工艺中除菌滤器的选择

目的筛选适用于人凝血因子Ⅷ/血管性血友病因子复合物(FⅧ/VWF)的除菌滤器,对除菌过滤工艺进行研究。方法采用过滤量、过滤通量、FⅧ效价回收率、VWF效价回收率、VWF抗原回收率、蛋白质回收率、VWF分子分布等指标,评估4种除菌级滤器过滤FⅧ/VWF复合物的效果。选择其中过滤性能最优的除菌滤器,以过滤总蛋白量、蛋白回收率、过滤效率作为指标,通过一般全因子设计试验,确定适宜的过滤蛋白浓度和过滤速度范围,从而确定工艺操作参数。结果Sartobran P、Sartopore 2 XLG、Sartopore Platinum和Sartopore 2 XLI过滤通量分别为1.71±0.01,1.80±0.01,1.34±0.01,1.81±0.04 L·(m^(2))^(-1)·min^(-1);FⅧ效价回收率(%)分别为97.09±2.82,99.22±0.99,96.87±1.85,93.76±1.21,VWF效价回收率(%)分别为98.12±1.42,99.95±1.85,94.80±1.62,92.09±1.67。Sarto⁃pore 2 XLG与Sartobran P相比,过滤通量(P=0.0004,P<0.001)具统计学意义;与Sartopore Platinum相比,过滤通量(P=5.9ⅹ10-7,P<0.001)、VWF效价回收率(P=0.02,P<0.05)具统计学意义;与Sartopore 2 XLI相比,FⅧ效价回收率(P=0.004,P<0.01)、VWF效价回收率(P=0.005,P<0.01)具统计学意义。Sartopore 2 XLG的最优工艺操作空间为:蛋白浓度0.45~0.58mg/mL,过滤速度为1.48~2.95L·(m^(2))^(-1)·min^(-1)。结论适合FⅧ/VWF复合物除菌过滤的滤器为Sartopore 2 XLG,DoE试验证明Sartopore 2 XLG具有良好的工艺操作空间。

因子Ⅷ相关抗原检测在流行性出血热的临床意义

因子Ⅷ是由因子Ⅷ促凝成分(Ⅷ:C)及其抗原成分(Ⅷ:CAg)以及因子Ⅷ相关蛋白(Ⅷ:R)组成的复合物.Ⅷ:R的抗原部分称因子Ⅷ相关抗原(ⅧR:Ag).它们具有多种与凝血有关的活性因子,测定这些因子有助于诊断血友病甲和血管性假血友病,且是反映高凝状态的指标之一.本文就对189例流行性出血(EHF)测定ⅧR:Ag的结果,及其变化的临床意义略加探讨.

短暂性脑缺血发作患者vWF和FⅧ:C及相关凝血指标的变化与临床意义

目的探析短暂性脑缺血发作(TIA)患者血管性血友病因子(vWF)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)及相关凝血指标的变化与临床意义。方法以2015年1月至2016年1月神经内科就诊的TIA患者60例为研究对象(观察组),以健康成人60例作为对照组。两组均进行vWF、FⅧ:C及相关凝血指标检测。结果 TIA患者的vWF[(215.51±24.11)U/L vs(120.99±20.34)U/L]、FⅧ:C[(288.69±36.71)%vs(120.67±25.68)%]、D-二聚体及可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)等参数明显高于对照组(P均<0.01)。而活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及纤维蛋白原(FIB)无统计学差异(P均>0.05)。结论 TIA患者其凝血系统处于应激状态,vWF、FⅧ:C、D-二聚体及SFMC等凝血指标明显高于健康人,可能参与TIA的发病过程。