支气管扩张症合并感染患者血清人分泌型磷脂酶A2-X表达情况及其与炎性指标的相关性研究

背景支气管扩张症是呼吸系统常见病、多发病,感染是引起支气管扩张症的最常见原因。人分泌型磷脂酶A2-X(sPLA2-X)在炎性反应中发挥重要作用,并可促进炎性反应的发生、发展,而支气管扩张症合并感染患者血清sPLA2-X表达情况及其与重要炎性指标如降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素(IL)-6、IL-17、IL-33是否存在相关性尚未见相关报道。目的研究支气管扩张症合并感染患者血清sPLA2-X表达情况及其与炎性指标——PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33的相关性,并进一步研究血清sPLA2-X对支气管扩张症合并感染的影响。方法选取2017年2月—2019年1月在贵州省人民医院呼吸与危重症医学科住院治疗的支气管扩张症合并感染患者47例为病例组,选取同期在贵州省人民医院健康体检中心体检的健康志愿者21例为健康对照组。收集研究对象一般资料,分别检测健康对照组体检当天、观察组治疗前(入院当天)与治疗后(出院前1天)血清sPLA2-X、白细胞计数、PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33。比较两组治疗前后观察指标,分析病例组治疗前血清sPLA2-X与PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33的相关性。结果病例组治疗前血清sPLA2-X、白细胞计数、PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33均高于健康对照组(P<0.05);病例组治疗后血清sPLA2-X、PCT、CRP、iNOS、IL-17均高于健康对照组(P<0.05);两组治疗后白细胞计数、IL-6、IL-33比较,差异无统计学意义(P>0.05)。病例组治疗后血清sPLA2-X、白细胞计数、PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33均低于本组治疗前(P<0.05)。病例组治疗前血清sPLA2-X与PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-17、IL-33均呈正相关(r=0.5262、0.6401、0.5507、0.5168、0.6099、0.3574,P值均<0.01)。结论支气管扩张症合并感染患者血清sPLA2-X升高,且其与PCT、CRP、iNOS、IL-6、IL-7、IL-33呈正相关,表明血清sPLA2-X与支气管扩张症合并感染有重要的关联,血清sPLA2-X可作为评估支气管扩张症合并感染的参考指标。

眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A_2的研究进展

眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2(sPLA2)作为眼镜蛇毒中的一个重要成分,有着广泛的生物学活性,近年来的研究热点正日益从眼镜蛇粗毒转向毒素中的某个单体,如sPLA2的研究。该文简要综述了眼镜蛇毒sPLA2的结构特征、分离纯化以及分子生物学特性,着重论述了sPLA2多样的药理毒理作用,并对其作用机制和发展前景进行了探讨。

七氟醚对单肺通气致肺损伤兔肺组织胞质型磷脂酶A_2和clara细胞分泌蛋白表达的影响(英文)

目的探讨七氟醚对单肺通气(OLV)兔肺组织胞质型磷脂酶A2(C-PLA2)及clara细胞分泌蛋白(CCSP)表达的影响。方法36只健康日本大耳白兔随机分为假手术组(S组)、OLV组(O组)和OLV+七氟醚组(OS组)。OS组据所给七氟醚浓度(体积分数)不同分为1%、2%、3%和4%亚组。Western blotting和定量PCR分别用于检测肺组织中CCSP和C-PLA2蛋白及mRNA的表达水平。ELISA检测肺组织花生四烯酸(AA)含量。通过观察肺湿/干(W/D)和肺组织的形态学改变评价肺损伤的严重程度。结果 OLV后兔肺组织CCSP蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),而C-PLA2蛋白和mRNA表达水平、肺组织AA含量和肺损伤程度均明显增加(P<0.05);OLV+七氟醚组中肺组织CCSP蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),而C-PLA2蛋白和mRNA表达水平和肺组织AA含量降低(P<0.05),肺损伤减轻(P<0.05);OLV+不同浓度七氟醚组中肺组织CCSP蛋白和mRNA表达水平无显著性差异,但肺组织C-PLA2蛋白和mRNA表达水平、肺组织AA含量和肺损伤程度随浓度的增加而逐渐降低(P<0.05)。结论 OLV可使兔肺组织中CCSP蛋白和mRNA表达水平降低,肺组织C-PLA2蛋白和mRNA表达水平和AA含量增加,引起急性肺损伤。七氟醚可通过逆转OLV的上述效应而发挥抗急性肺损伤作用。

分泌型磷脂酶A_2对预测急性心肌梗死行经皮冠状动脉介入治疗预后的价值

目的:探讨血浆分泌型磷脂酶A2(sPLA2)水平对行急诊经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的急性心肌梗死(AMI)患者长期预后的预测价值。方法:将223例行急诊PCI的AMI患者按2年随访期结束是否发生主要不良心脏事件(MACE)分为MACE组(95例)和无MACE组(128例),比较2组患者一般临床资料、血浆sPLA2水平及冠状动脉造影资料的差异。将单因素分析有意义的变量纳入Cox比例风险回归模型对预后进行多因素分析,并以无MACE组血浆sPLA2水平的P75为截断点(5.48μg/L)分为高sPLA2组和低sPLA2组,应用乘积极限法分析sPLA2预测预后的价值。结果:MACE组的男性、2型糖尿病、白细胞计数(WBC)、尿素氮(BUN)、入院血糖(Glu)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、sPLA2、多支病变(≥2支冠状动脉病变)、从发病到球囊扩张的时间和无复流的患者比例明显多于无MACE组,左室射血分数(LVEF)明显低于无MACE组;Cox回归分析显示sPLA2>5.48μg/L(RR:3.23,95%CI:1.24～12.36,P<0.001)、2型糖尿病(RR:2.78,95%CI:1.52～7.24,P<0.001)、多支病变(RR:2.37,95%CI:1.66～6.79,P<0.001)和LVEF<0.50(RR:1.74,95%CI:1.07～2.94,P=0.037)是AMI患者急诊PCI术后长期预后不良的预测因子。结论:血浆sPLA2水平的升高与行急诊PCIAMI患者的不良预后相关。

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤时分泌型磷脂酶A_2的影响

目的探讨灯盏花素在脑损伤时对脑细胞凋亡及分泌型磷脂酶A2(sPLA2)及其相关介质的影响。方法将雄性Wistar大鼠18只分为模型组(IR组)、灯盏花素组及假手术组各6只。用线栓法制成大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型,用TUNEL法检测脑细胞凋亡,用免疫组织化学法检测sPLA2在脑细胞中的表达,用[3H]标记大肠杆菌膜为底物的液闪方法和ELISA法分别检测血清中sPLA2活性和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)水平。结果缺血0.5h再灌注24h,IR组海马与皮质凋亡细胞数均多于假手术组和灯盏花素组(P<0.01)。缺血0.5h再灌注12h,IR组海马sPLA2阳性细胞数及皮质sPLA2细胞数多于假手术组和灯盏花素组,差异有统计学意义(P<0.01)。缺血0.5h再灌注12h,IR组TNF-α、sPLA2及PGE2水平均高于假手术组和灯盏花素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论灯盏花素对MCA-IR脑损伤有良好的保护作用,其机理在于抑制sPLA2的激活、表达及其相关介质的水平。

ⅡA分泌型磷脂酶A_2与心血管疾病

ⅡA分泌型磷脂酶A2 在血循环和动脉壁均有促动脉粥样硬化的作用。在血浆中,ⅡA分泌型磷脂酶A2修饰脂蛋白形成小颗粒致密低密度脂蛋白,从而增加发生心血管疾病的风险。在动脉壁,ⅡA分泌型磷脂酶A2 水解脂蛋白,使之与蛋白聚糖的结合更紧密,从而导致脂蛋白在血管壁滞留时间延长,发生聚集和融合,最终导致细胞内脂类的蓄积;经过修饰后的脂蛋白也可以被其它酶修饰或巨噬细胞吞噬,引起脂类的蓄积,引发动脉粥样硬化。另外,ⅡA分泌型磷脂酶A2 的水解产物非酯化脂肪酸和溶血磷脂也可以促进动脉粥样硬化的形成。本文就ⅡA分泌型磷脂酶A2 与心血管疾病的关系进行综述。

人分泌型磷脂酶A2-X、β-防御素3、C-反应蛋白与pH比值在老年糖尿病酮症酸中毒伴感染患者病情评估中的价值

目的探究老年糖尿病酮症酸中毒(DKA)伴感染患者人分泌型磷脂酶A2-X(sPLA2-X)、β-防御素3(hβD-3)、C-反应蛋白与pH比值(CRP/pH)水平变化及临床意义。方法选取本院117例老年DKA患者,分为感染组(n=21)、DKA组(n=96),比较2组基线资料、sPLA2-X、hβD-3、CRP/pH,分析各指标临床应用价值。结果感染组呼吸系统慢性疾病患者占比、sPLA2-X、CRP/pH、APACHEⅡ评分均高于DKA组,hβD-3低于DKA组(P<0.05);sPLA2-X、CRP/pH与APACHEⅡ评分间存在正相关关系,hβD-3与APACHEⅡ评分间存在负相关关系(P<0.05);sPLA2-X、CRP/pH高水平者生存率低于低水平者,hβD-3高水平者生存率高于低水平者(P<0.05)。结论老年DKA伴感染患者sPLA2-X、CRP/pH水平明显升高,hβD-3水平异常降低,检测各指标水平有助于临床评估DKA伴感染患者病情程度及预后转归方向。

分泌型磷脂酶A_2非酶活性依赖的神经元保护作用

【目的】鉴定中华眼镜蛇(Najanajaatra)蛇毒中的神经保护因子,研究其抗神经元凋亡作用机制。【方法】连续柱层析法分离、纯化蛇毒神经保护因子。用EdmanN-末端测序法取得蛋白质一级序列,BLAST软件进行蛋白质鉴定。使用低钾诱导体外培养小脑颗粒神经元凋亡模型,研究其神经元保护作用。【结果】从中华眼镜蛇蛇毒中分离出一种,可浓度依赖性地抑制低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡。神经保护因子(Cobravenomneu-ronalprotectivefactor,CVNPF)此神经保护因子N-末端20个氨基酸序列为NLYQFKNMIQCTVPSRSWWD-,BLAST序列同源比对确定该保护因子为中华眼镜蛇分泌型磷脂酶A2(secretedphospholipaseA2,sPLA2)。进一步发现来源于蜂毒、莫桑比克眼镜蛇(Njajanajamossambica)蛇毒、西部菱斑响尾蛇(Crotalusatroxalso)蛇毒的sPLA2也对小脑颗粒神经元具有保护作用;其作用不为磷脂酶A2酶活性抑制剂7,7-Dimethyleicosadienoicacid(DEDA)和Manoalide阻断。【结论】CVNPF属于sPLA2。多种sPLA2可以抗神经元凋亡,其保护机制与磷脂酶A2的酶活性无关。

分泌型磷脂酶A_2在人皮肤黑素瘤细胞和组织中的表达和分布

目的:比较分泌型磷脂酶A2(sPLA2)在人恶性黑素瘤A375细胞、黑素瘤组织与健康人皮肤细胞、组织中的表达和分布。方法:分别采用ELISA法和Western Blot法检测细胞上清液和细胞内sPLA2的表达,免疫组化法考察人皮肤组织中sPLA2的表达和分布。结果:恶性黑素瘤A375细胞上清液的sPLA2浓度为(177.27±13.57)pg/mL,明显高于人表皮HaCaT细胞的(21.42±5.05)pg/mL(P<0.05)和真皮成纤维细胞的(2.75±1.23)pg/mL(P<0.05);其细胞内sPLA2/GAPDH的灰度比值为7.03±1.31,亦明显高于HaCaT细胞的1.45±0.37(P<0.05)和成纤维细胞的0.31±0.11(P<0.05);黑素瘤组织中呈现大量sPLA2阳性细胞和颗粒,而健康人表皮和真皮组织中则未见该阳性细胞和颗粒。结论:sPLA2在人恶性黑素瘤A375细胞和黑素瘤组织中较健康皮肤细胞和组织均有较高表达和分布,提示sPLA2有可能成为皮肤黑素瘤靶向给药的新靶点。

Ⅱ类分泌型磷脂酶A_2在急性肺损伤中的作用

Ⅱ类分泌型磷脂酶A2 (sPLA2 Ⅱ )在急性肺损伤 (ALI)发病过程中 ,起了重要作用。sPLA2 II在体内主要的细胞来源是巨噬细胞 ,在肺内的主要靶点是表面活性物质。sPLA2 Ⅱ在体内与表面活性物质及其代谢产物花生四烯酸、前列腺素之间相互作用 ,导致ALI时的恶性循环。sPLA2 II通过细胞外信号调节激酶 (ERK)和核因子 κB(NF κB)途径刺激巨噬细胞内诱生型NO合酶 (iNOS)的表达 ,损伤肺组织。抗sPLA2

分泌型磷脂酶A_2亚家族:结构与功能

分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)是磷脂代谢酶中最大的一个亚家族,具有多种生理功能.迄今为止,在人体中总共发现11种sPLA2亚型,它们具有不同的组织分布、水解活性和底物特异性.由于其水解产物主要为花生四烯酸和溶血磷脂,sPLA2常通过影响这两个通路调节细胞功能、炎症反应、抗菌等.本文结合近几年国际上关于sPLA2的研究报道,对于sPLA2的结构、功能、组织定位及与疾病发生发展的关系做一简要概述.

血管内皮生长因子解除Ⅴ亚型分泌型磷脂酶A_2协同增强的谷氨酸诱导的皮质神经元毒性作用

目的:探讨血管内皮生长因子及分泌型磷脂酶A2对谷氨酸诱导增强的神经元死亡的不同作用。方法:原代胚胎鼠皮质神经元细胞培养,细胞毒性试验及生化指标测定,细胞染色,显微镜下观察形态学改变及影像分析。结果:不同浓度的谷氨酸12.5、25、50、100μM可单独增加胚胎鼠皮质神经元死亡且呈剂量及年龄依赖关系。V亚型分泌型磷脂酶A2可协同增强谷氨酸所致神经元死亡。不同浓度的血管内皮生长因子10、30、100 ng／ml对分泌型磷酯酸酶A2协同增加的谷氨酸神经元毒性有解除作用且呈剂量依赖关系。结论:血管内皮生长因子可解除分泌型磷脂酶A2协同增加的谷氨酸诱导的皮质神经元毒性作用。

分泌型磷脂酶A_2在肺损伤中的作用

肺损伤（injury of lung）按照时效性可分为急性肺损伤和慢性肺损伤.急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是各种复杂因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,造成弥漫性肺间质及肺泡水肿,严重阶段（氧合指数＜ 200）也称为急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）.慢性肺损伤为慢性支气管炎、肺间质纤维化形成或肺癌等慢性损伤.分泌型磷脂酶A2（sPLA2）是花生四烯酸、溶血磷脂等炎性介质的限速酶,它促进一系列炎性介质和细胞因子释放和激活,参与多种急、慢性炎症病变.

灯盏花素对大鼠肝纤维化分泌型磷脂酶A_2和细胞因子的影响

目的探讨灯盏花素通过抑制分泌性磷脂酶A2(sPLA2)及其相关细胞因子对肝纤维化的影响。方法将健康雄性Wistar大鼠18只随机分为3组:灯盏花素组、CCl4模型组及对照组各6只。PBS灌胃作为对照组;5%CCl4橄榄油按5ml/kg灌胃,每3天1次共15次,作为CCl4模型组;每次CCl4灌胃同时腹腔注射灯盏花素5mg/kg,作为灯盏花素组。于预定时间处死大鼠,对大鼠肝脏分别进行HE染色、电镜观测、sPLA2免疫组化,并且检测大鼠血清sPLA2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、血清Ⅲ型前胶元(PCⅢ)和透明质酸(HA)水平。结果灯盏花素组胶原纤维、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HA及PCⅢ水平高于CCl4模型组,CCl4模型组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。灯盏花素组第2周、第4周、第6周时PGE2、TNF-α及sPLA2水平低于CCl4模型组,CCl4模型组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。灯盏花素组sPLA2阳性细胞数为(10.2±3.5)个/mm2少于CCl4模型组的(37.2±7.3)个/mm2,CCl4模型组多于对照组的(1.3±0.8)个/mm2,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论灯盏花素具有抗肝纤维化作用,其作用机制与抑制sPLA2、TNF-α、PGE2水平相关。

支气管扩张症合并非结核分枝杆菌感染患者血清和肽素、分泌型磷脂酶A2-X及致炎-抑炎因子谱的变化

目的探讨支气管扩张症(BCS)合并非结核分枝杆菌(NTM)感染患者血清和肽素(CPP)、分泌型磷脂酶A2-X(sPLA2-X)及致炎-抑炎因子谱的变化。方法纳入2017年1月-2020年6月浙江大学医学院附属杭州市胸科医院呼吸科收治的BCS患者110例,根据是否合并NTM感染分为单纯BCS组(n=73)与NTM感染组(n=37),将NTM感染组患者根据其BCS程度分为轻度组(n=10)、中度组(n=16)与重度组(n=11),另选健康志愿者40名为对照组。检测各组血清CPP、sPLA2-X、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A水平并进行组间比较。结果单纯BCS组及NTM感染组的血清CPP、sPLA2-X、TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10及IL-17A水平均高于对照组,且NTM感染组高于单纯BCS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度组的血清CPP、sPLA2-X、TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10及IL-17A水平均明显高于轻度组和中度组,且中度组的上述指标(除IL-6和IL-10外)高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BCS合并NTM感染患者血清CPP、sPLA2-X及致炎-抑炎因子谱呈明显高表达,有助于病情严重程度的评估及指导临床用药。

ⅡA分泌型磷脂酶A_2与动脉粥样硬化的相关性研究

ⅡA分泌型磷脂酶A2(sPLA2-ⅡA)是磷脂酶超家族中的一员,主要是通过介导炎性反应,产生大量脂类介质参与动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程,其表达受白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等炎性因子的调节。sPLA2-ⅡA可能是通过有丝分裂原激活蛋白激酶等相关信号通路导致AS的发生。在血管平滑肌细胞表面存在sPLA2-ⅡA致AS作用的受体,阻断这些受体后,致AS的炎性因子表达减少。这些研究可能为AS诊疗提供新的思路。

分泌型磷脂酶A_2对脐静脉内皮细胞分泌和表达MCP-1、ICAM-1的影响

目的体外研究分泌型磷脂酶A2(sPLA2)对原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌和表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及细胞间黏附分-1(ICAM-1)的影响。方法体外培养HUVEC,随机分为6组:空白对照组,5个浓度的sPLA2(终浓度分别为10,1,10-1,10-2和10-3U/ml),分别与HUVEC共培养24 h后,收集细胞和培养基,采用PCR方法和ELISA方法检测sPLA2作用HUVEC后MCP-1和ICAM-1的mRNA和蛋白的表达水平。结果与空白对照组相比,不同浓度的sPLA2刺激HUVEC分泌的MCP-1和ICAM-1蛋白和mRNA表达水平均有所增加,且随着sPLA2的浓度越高,MCP-1和ICAM-1蛋白和mRNA表达水平越高,具有直线相关性。结论 sPLA2可能通过促进分泌炎性因子参与动脉粥样硬化的进程。

分泌型磷脂酶A_2在川崎病患儿早期诊断中的价值分析

目的:评价分泌型磷脂酶A2(sPLA2)对小儿川崎病(KD)的早期诊断价值。方法:选取2010年9月至2016年9月陕西省咸阳市第一人民医院收治的急性期KD患儿100例(KD组),以同期确诊为非特异性炎症疾病(NID)患儿75例为NID组,特异性炎症疾病(SID)患儿72例为SID组,另选取同期于本院体检的80例健康儿童为正常对照组(NC组)。检测并比较4组血清sPLA_2、降钙素原(PCT)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)水平。结果:KD组患儿血清中的sPLA_2水平显著高于NID组、SID组和NC组(P<0.05)。KD组血清sPLA2与ESR、CRP呈显著正相关关系(r=0.652、0.519,均P<0.05),而与PCT、WBC无明显相关关系(r=0.182、0.194,均P>0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)显示,血清sPLA_2水平为44.61μg/L时,诊断早期KD的ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)分别为0.906、92.00%、86.78%、75.41%、96.10%,均高于ESR、CRP、PCT、WBC。结论:KD患儿急性期血清sPLA2水平明显增高,对KD早期诊断具有较高的灵敏度和特异度,且诊断效能优于CRP、ESR及PCT等传统炎症因子。

未足月胎膜早破患者外周血中分泌型磷脂酶A2的表达与羊膜腔感染的相关性

目的研究外周血中分泌型磷脂酶A2(sPLA2)在未足月胎膜早破及羊膜腔感染中的作用及其意义。方法采用实时荧光定量PCR技术检测30例未足月胎膜早破患者(实验组)分娩发动前后、30例未发生胎膜早破的未足月正常妊娠患者(正常对照组)及30例足月胎膜早破患者(足月对照组)分娩发动后外周血中sPLA2 mRNA的表达水平。未足月胎膜早破患者结束妊娠后取胎膜行病理学检查,以确定有无组织学绒毛膜羊膜炎。结果未分娩发动时sPLA2 mRNA的表达水平实验组为1.079±0.746,正常对照组为0.651±0.481,实验组与同孕周正常对照组相比sPLA2 mRNA的表达水平升高,差异有统计学意义(P=0.011)。分娩发动时外周血中sPLA2 mRNA的表达水平实验组为2.439±0.086,足月对照组为2.575±0.036,实验组与足月对照组相比sPLA2 mRNA的表达水平无统计学差异(P=0.787)。实验组中分娩发动时s PLA2的含量与是否患绒毛膜羊膜炎有关(P=0.008)。结论 sPLA2升高可能参与未足月胎膜早破的发病,并与羊膜腔的感染有关。