藤茶提取物通过PI3K/Akt/Bcl-2途径抑制人前列腺癌LNCaP细胞增殖的机制研究

目的探讨藤茶提取物对人前列腺癌细胞LNCaP细胞增殖抑制的作用机制。方法 LNCaP细胞分为对照组、藤茶提取物不同浓度组,MTT法检测细胞的增殖抑制率,计算半数抑制浓度(IC50),流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率,Western-blot法检测PI3K/Akt通路PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达。结果藤茶提取物在10~50μg/mL浓度范围内对LNCaP细胞增殖抑制作用随剂量的升高而升高,IC50为28.45μg/mL;与对照组比,藤茶提取物25、50μg/mL处理组LNCaP细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01),p-Akt、Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论藤茶提取物对LNCaP细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是通过抑制PI3K/Akt细胞信号通路下调Bcl-2蛋白表达从而促进凋亡。

高压氧对人前列腺癌LNCaP细胞株小鼠荷瘤模型作用的研究

目的:评估应用高压氧治疗前列腺癌放疗后出血性膀胱炎的安全性,探讨高压氧对体内前列腺癌细胞生长的影响。方法:采用人前列腺癌LNCaP细胞株皮下接种构建小鼠荷瘤模型(n=30),随机分为对照组(n=15)和实验组(n=15)。对照组常压常氧条件下饲养,实验组每周进行5次0.2MPa高压氧暴露,共计20次。连续观察4周两组移植瘤生长体积的变化,应用免疫组化法比较两组瘤体组织相关病理学特征指标:瘤体微血管密度(CD34)、瘤细胞增殖(Ki-67蛋白)以及瘤细胞凋亡(p53、p27蛋白)。结果:肿瘤接种后第28天,对照组移植瘤体积为(122.0±8.2)mm3,实验组为(120.0±7.9)mm3,两组差异无显著性(P>0.05);对照组移植瘤CD34及Ki-67、p53、p27蛋白表达的阳性细胞率分别为(36.2±4.9)%、(75.3±8.4)%、(44.2±5.7)%、(61.5±5.5)%,实验组分别为(39.3±5.2)%、(78.1±7.6)%、(40.4±6.2)%、(63.7±5.1)%,病理学特征均无显著性差异(P>0.05)。结论:高压氧对小鼠荷瘤模型前列腺癌细胞生长无促进作用,对前列腺癌中新生血管也无明显影响。

黄精凝集素PCL-2诱导人前列腺癌LNCap细胞凋亡及机制研究

研究黄精凝集素PCL-2对人前列腺癌LNCap细胞生物活性和可能的抗肿瘤机制。从黄精药材中提取分离得到黄精凝集素PCL-2,体外培养LNCap细胞,采用WST-1和集落形成实验评价PCL-2对LNCap细胞的增殖作用;2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法检测LNCap细胞内ROS含量;qRT-PCR和Western blot法检测PCL-2对LNCap细胞中相关基因和蛋白表达的影响。研究结果显示PCL-2能显著抑制LNCap细胞的增殖,促进细胞中ROS生成;PCL-2通过上调LNCap细胞中Bax、Caspase-3及Caspase-9基因mRNA和蛋白表达并下调Bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平诱导LNCap细胞凋亡。本研究结果表明PCL-2诱导LNCap细胞凋亡活性作用显著,可作为抑制前列腺癌的潜在药物。

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡作用及对PCA3基因表达的影响

目的:探讨环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的作用及对PCA3基因表达的影响。方法:不同浓度环巴胺(1、5、10、15μmol/L)干预LNCaP细胞,以只加入RPMI 1640培养液为空白对照组,分别在不同作用时间(24、48、72h),用MTT法检测其对细胞增殖的抑制、流式细胞术观察细胞凋亡率变化、Hoechst染色观察凋亡细胞形态变化、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)观察对PCA3基因表达的影响。结果:5、10、15μmol/L环巴胺对LNCaP细胞增殖均有显著抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.01),10μmol/L组于48h达到半数抑制量(IC50);10、15μmol/L组24、48、72hLNCaP细胞的凋亡率分别为37.21%、57.38%、57.98%和21.16%、71.31%、72.90%,与空白对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长,LNCaP细胞凋亡显著增加。PCA3基因的表达随着环巴胺浓度的上升呈现明显的递减趋势,较空白对照组显著降低(P<0.01)。浓度为10μmol/L时,不同作用时间PCA3基因的表达均极低。结论:环巴胺浓度为10、15μmol/L作用48、72h时能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并显著下调LNCaP细胞PCA3基因的表达。

左旋棉酚体外诱导人前列腺癌LNCaP细胞凋亡的研究

目的研究左旋棉酚对人前列腺癌LNCaP细胞体外增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测左旋棉酚对LNCaP细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变,TUNEL染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期的改变,半定量RT-PCR检测Bcl-2及BakmRNA的表达水平。结果左旋棉酚在体外能显著抑制LNCaP细胞增殖,呈浓度-时间依赖性。左旋棉酚可以诱导LNCaP细胞发生典型的凋亡形态学改变和G0/G1期阻滞。RT-PCR显示Bcl-2mRNA表达水平降低,BakmRNA表达水平升高。结论左旋棉酚在体外能诱导前列腺癌细胞凋亡,其主要原因可能与BakmRNA的表达升高及Bcl-2mRNA的表达下调有关。

藤茶提取物对人前列腺癌LNcap细胞凋亡作用研究

目的:研究藤茶提取物对人前列腺癌LNcap细胞凋亡的作用。方法:用流式Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:藤茶提取物对LNcap细胞作用24h后,细胞凋亡率显著增加,且有量效关系。结论:藤茶提取物可显著诱导LNcap细胞凋亡。

小剂量γ射线辐照外周血单个核细胞对人前列腺癌LNCaP细胞的杀伤作用

目的观察小剂量γ射线辐照外周血单个核细胞对培养人前列腺癌细胞系LNCaP细胞的杀伤作用。方法实验设LNCaP肿瘤细胞对照组、单纯外周血单个核细胞对照组、照射和未照射的外周血单个核细胞与肿瘤细胞共培养组,照射剂量为0.5～3Gy,剂量率为17Gy/min。利用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法,观察外周血单个核细胞对LNCaP细胞的杀伤情况。结果外周血单个核细胞在照射后各组培养至144h均有大量细胞死亡,存活细胞明显少于未照射组,培养至240h时,照射与非照射组中存活的外周血单个核细胞均减少,但是在照射的各组中减少更为明显。在外周血单个核细胞与LNCaP肿瘤细胞共培养组中,各照射组间在培养72h内无明显差异,在共培养96～240h时,0.5～2Gyγ射线照射外周血单个核细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用明显增强,尤其以1Gy照射组更为明显。而2.5与3Gyγ射线辐照组以及未照射外周血单个核细胞对肿瘤细胞的杀伤作用明显低于0.5～2Gy各组,在培养至240h时,仍有肿瘤细胞存活并出现增生。结论γ射线辐照对某些外周血单个核细胞有损伤作用,0.5～2Gyγ射线辐照的外周血单个核细胞杀伤肿瘤细胞活性增强,而2.5Gy和3Gyγ射线辐照对分离后的外周血单个核细胞对肿瘤细胞杀伤有抑制作用。

Guttiferone K诱导人前列腺癌LNCaP细胞G_(0/1)期阻滞的作用研究

目的:本文主要观察从云南藤黄Garcinia yunnanensis中提取分离得到的多环多异戊烯基间苯三酚(Polycyclic Polyprenylated Acylphoroglucinols,PPAPs)类化合物Guttiferone K(GUTK)对人前列腺癌LNCaP细胞增殖情况的影响。方法:取处于对数生长期的人前列腺癌LNCaP细胞,给予GUTK。采用MTT法检测细胞增殖的情况;采用PI染色的流式分析法、BrdU法及免疫细胞化学法检测细胞的周期分布;采用Western Blotting法检测Cyclin A、p27和激酶相关蛋白-2(S-Phase Kinase-Associated Protein 2,SKP2)蛋白水平的变化。结果:GUTK呈时间和剂量依赖性地抑制人前列腺癌LNCaP细胞的增殖;GUTK能够诱导人前列腺癌LNCaP细胞的G0/1期细胞周期阻滞;GUTK能够下调人前列腺癌LNCaP细胞Cyclin A和SKP2蛋白的表达水平并上调p27蛋白的表达水平。结论:从云南藤黄中提取分离得到的化合物GUTK能够通过诱导人前列腺癌LNCaP细胞G0/1期细胞阻滞来抑制细胞的增殖,具有潜在的抗肿瘤作用。

百合总皂苷经VEGF/Akt信号通路调节人前列腺癌LNCaP细胞增殖及侵袭的机制研究

目的:探讨百合总皂苷经血管内皮生长因子(VEGF)/蛋白激酶B(Akt)信号通路调节人前列腺癌LNCaP细胞增殖及侵袭的机制。方法:体外培养人前列腺癌LNCaP细胞,阴性对照组不进行处理,阳性对照组给予浓度为1.6μg·L^-1的顺铂,百合总皂苷高、中、低剂量组分别给予浓度为200,100,50 mg·L^-1的百合总皂苷后继续培养48 h,检测细胞增殖、凋亡及侵袭情况,同时检测VEGF受体2(VEGFR2)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)蛋白表达水平。结果:各组LNCaP细胞Akt蛋白变化不显著(P>0.05);与阴性对照组比较,阳性对照组LNCaP细胞增殖率、侵袭数、VEGFR2、p-Akt和Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、Bax和caspase-3蛋白表达升高(P<0.05);给予百合总皂苷干预后,LNCaP细胞增殖率、侵袭数、VEGFR2、p-Akt和Bcl-2蛋白表达均较阴性对照组降低(P<0.05),凋亡率、Bax和caspase-3蛋白表达均较阴性对照组升高(P<0.05),且具有浓度依赖性(P<0.05),但效果不如阳性对照组(P<0.05)。结论:百合总皂苷通过抑制VEGF/Akt信号通路,抑制人前列腺癌LNCaP细胞增殖和侵袭,可能是前列腺癌治疗的一种新选择。

Hsa-miR-145联合槲皮素对人前列腺癌LNCaP细胞侵袭、迁移的影响

目的:研究Hsa-miR-145(人微小RNA-145,miR-145)联合槲皮素对人前列腺癌(LNCaP)细胞侵袭、迁移的影响,并探讨其机制。方法:将一定浓度的miR-145模拟物经脂质体包裹转染前列腺癌(LNCaP)细胞,并联合不同浓度的槲皮素,采用MTT法检测单用miR-145、单用槲皮素及miR-145联合槲皮素对前列腺癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,Transwell及伤口愈合实验检测细胞侵袭、迁移的能力,Western blot检测细胞蛋白表达水平。结果:单用槲皮素的IC50为104.5μmol/L,槲皮素与随机序列联合使用IC50为87.69μmol/L,槲皮素与miR-145模拟物联合使用IC50为37.92μmol/L,药物增敏倍数为2.75。miR-145联合槲皮素促进LNCaP细胞早期凋亡,其早期凋亡率达11.4%,miR-145模拟物联合槲皮素作用于LNCaP细胞24、48小时后,伤口愈合率分别为16.7%、34.8%。槲皮素联合miR-145模拟物组侵袭细胞数为(26±3)个,而转移数为(56±4)个。结论:Hsa-miR-145能增强LNCaP细胞对槲皮素的敏感性,槲皮素组联合miR-145模拟物能促进LNCaP细胞早期凋亡,并能显著抑制LNCaP细胞侵袭、迁移的能力,其机制可能与下调E-cadherin、snail蛋白,上调N-cadherin蛋白的表达有关。

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨环巴胺(Cyclopamine)对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响。方法不同浓度环巴胺(1、5、10、15μmol·L-1)干预LNCaP细胞,分别在不同作用时间(24、48、72h)用MTT法检测环巴胺对LNCaP细胞增殖的抑制,Hoechst染色观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果环巴胺5、10、15μmol·L-1浓度组对LNCaP细胞增殖有显著抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。随着浓度的增大对细胞增殖的抑制作用显著增强。10μmol·L-1组于48 h达到半数抑制量(IC50)。环巴胺10μmol·L-1组24、48、72h凋亡率分别为37.21%、57.38%、57.98%,15μmol·L-1组凋亡率分别为21.16%、71.31%、72.90%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。随着浓度的增大细胞凋亡率逐渐增大。细胞凋亡形态的改变随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长而增强。结论环巴胺能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡。

淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤小鼠肿瘤生长及细胞周期的影响

目的探讨淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤SCID小鼠肿瘤生长、细胞周期、磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因表达的影响。方法40只雄性SCID小鼠,根据随机数字表法随机均分为模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。采用SCID小鼠前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌LNCaP细胞株悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤小鼠模型。造模2周后,模型对照组予以0.9%氯化钠注射液,低剂量组予以10 mg/kg淫羊藿苷,中剂量组予以40 mg/kg淫羊藿苷,高剂量组予以80 mg/kg淫羊藿苷。灌胃处理1次/d,治疗时间为5周。在灌胃给药治疗前及治疗5周后,分别取各组小鼠5只,对比各组肿瘤质量、肿瘤体积、肿瘤抑制率。采用流式细胞学方法检测LNCaP细胞周期,计算各周期比值。采用实时定量PCR检测前列腺肿瘤组织中PTEN mRNA相对含量。结果治疗后,模型对照组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显增加(P<0.05);中剂量组及高剂量组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显降低(P<0.05),且显著低于模型对照组(P<0.05)。中剂量组及高剂量组肿瘤抑制率显著高于低剂量组(P<0.05)。中剂量组及高剂量组肿瘤细胞S期较治疗前明显增加(P<0.05),且显著高于模型对照组(P<0.05);中剂量组及高剂量组肿瘤细胞G_(0)/G_(1)期较治疗前明显减少(P<0.05),且显著低于模型对照组(P<0.05)。中剂量组及高剂量组PTEN mRNA相对含量较治疗前明显增加(P<0.05),且显著高于模型对照组(P<0.05)。结论淫羊藿苷可能通过上调PTEN表达、改变细胞周期分布来抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,从而有效抑制前列腺癌原位移植瘤SCID小鼠肿瘤生长。

核受体NURR1在前列腺癌细胞中的表达及其对环状RNA表达谱的影响

目的探讨核受体NURR1过表达对前列腺癌(PCa)细胞中环状RNA(circRNA)表达谱的影响,为揭示NURR1相关circRNA分子在PCa进展过程中的作用提供参考。方法通过UALCAN和TNMplot分析NURR1在PCa中的表达;通过高通量测序分析筛选NURR1过表达的PCa细胞中特征性circRNA分子表达谱;通过GO和KEGG分析差异表达的circRNA分子的功能和参与的信号通路。结果circ_0000915在DU145、LNCaP以及PC3细胞中均发生显著的下调表达。在核受体NURR1上调表达的DU145细胞中,1个circRNA上调表达(circ_0005991),2个circRNA下调表达(circ_0001460、circ_0001315);在核受体NURR1上调表达的LNCaP细胞中有2个circRNA显著上调表达(circ_0040729、circ_0000722);在NURR1上调表达的PC3细胞中有3个circRNA上调表达(circ_0001577、circ_0000854、circ_0018168),4个circRNA下调表达(circ_013035、circ_0003028、circ_0082096、circ_0005320)。KEGG分析发现差异表达的circRNA分子与背侧/腹侧神经管模式、蛋白质折叠伴侣、无序结构域特异性结合、BMP信号通路的正调控以及神经管模式化功能显著相关。结论circRNA在NURR1介导的PCa进展过程中发挥着重要作用,但是在不同的PCa细胞类型中存在着一定的差异。核受体NURR1与circ_0000915分子在PCa进展中的分子机制有待进一步研究。

杠柳毒苷通过诱导细胞自噬抑制前列腺癌细胞增殖

检测杠柳毒苷(periplocin,PP)对前列腺癌细胞(prostate cancer,PCa)增殖的抑制作用并探讨其分子机制。体外培养前列腺癌DU145和PC3细胞,CCK8实验、克隆形成、3D基质胶侵袭实验检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭等作用;流式细胞术、Hoechst 33258染色、Western blot实验确定杠柳毒苷诱导前列腺癌细胞凋亡、诱导凋亡小体形成及细胞凋亡相关蛋白表达水平;RNA-Seq转录组测序检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞基因表达谱影响;DCFH-DA荧光探针检测杠柳毒苷对细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平影响;Western blot、EGFP-LC3B融合蛋白表达细胞检测杠柳毒苷对细胞自噬相关蛋白表达及对细胞自噬体形成的影响;构建裸鼠荷瘤模型检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞体内生长抑制作用。研究结果表明,杠柳毒苷可浓度依赖性抑制前列腺癌细胞增殖、克隆形成能力及迁移侵袭能力;诱导细胞凋亡小体产生及凋亡相关蛋白表达;改变前列腺癌细胞基因表达谱;浓度依赖性提高前列腺癌细胞内ROS水平,上调自噬标志蛋白LC3B和Beclin-1表达,下调自噬降解标志蛋白p62表达;抑制前列腺癌细胞在裸鼠体内生长。本研究发现PP可抑制PCa细胞增殖并诱导细胞凋亡,其分子机制可能为PP诱导前列腺癌细胞自噬最终导致细胞死亡。

铜调节的细胞死亡相关基因与前列腺癌关系分析

目的基于美国癌症肿瘤基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析铜调节的细胞死亡相关基因与前列腺癌患者预后和免疫细胞浸润的关系。方法从TCGA数据库下载所有前列腺癌患者的基因数据,其中包括前列腺癌组织501例,正常组织52例。运用R软件提取前列腺癌患者中铜调节的细胞死亡相关基因表达矩阵,进行差异分析、多因素回归分析筛选出预后基因,对预后基因进行生存分析,同时探讨预后相关基因与免疫细胞之间的相关性。结果甘氨酸裂解系统蛋白H(GCSH)与前列腺癌患者的预后显著相关,同时发现其与前列腺癌患者中的树突细胞、CD8^(+)T细胞、浆细胞也显著相关(P<0.05)。结论GCSH基因在前列腺癌的发生、发展中起重要作用,有望成为前列腺癌预后的标志物。

单细胞测序联合孟德尔随机化分析鉴定前列腺癌预后相关基因及分析

目的:结合患者临床信息,通过单细胞测序联合多组学分析,识别前列腺癌发生发展中的关键基因,并利用转录组学进一步验证,鉴定出前列腺癌预后相关基因。方法:前列腺癌患者的单细胞测序数据来自GSE156632数据库中的4例患者,利用R语言进行细胞聚类和注释,随后挑选出上皮细胞进行差异分析,使用Hiplot网站对鉴定出的差异基因进行富集分析,随后利用UKB(UK Biobank)数据库下载基因对应的表达数量性状基因座(expression quantitative trait locus,eQTL)的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,同时从TCGA(The Cancer Genome Atlas)和GEO(Gene Expression Omnibus)数据库下载了前列腺癌患者临床数据以及对应的基因表达数据。采用单因素COX回归分析观察孟德尔随机化后基因对患者预后的影响。结果:利用Seurat包对4例患者的单细胞数据进行质控和整合,在进行质控和细胞类型鉴定后,挑选出了上皮细胞亚群进行差异分析,共得到1566个基因,随后进行了富集分析,结果显示差异基因可能富集于Ras信号通路,细胞凋亡与氧化磷酸化等信号通路,随后使用1566基因进行了孟德尔随机化,得到了74个可能的因果基因,使用TCGA-PRAD和GSE116918对这74个基因进行了单因素COX回归分析,发现FAM3B,JUNB,TMEM59,KRT5这4个可能的相关基因,最后比较了孟德尔随机化和单因素COX回归的结果,发现KRT5可能是对前列腺癌最有影响的基因。结论:这些结果表明,FAM3B,JUNB,TMEM59,KRT5可能在前列腺癌进展中起到作用,KRT5可能成为前列腺癌的预后预测因子和治疗靶点。

白介素-35在M2型巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

目的探讨白介素(IL)-35在巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌(PCa)细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响和机制。方法检测巨噬细胞标记分子CD68、M1型标记分子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和M2型标记分子CD206、IL-10在人单核/巨噬细胞系THP-1细胞诱导分化后的M0、M1与M2型巨噬细胞中的表达。使用不同类型的巨噬细胞-源条件培养液(CM)处理PCa细胞系PC-3,并将其分为:M0-CM组、M1-CM组、M2-CM组和预先使用IL-35中和抗体(IL-35 NA)干预的M2-CM处理组(M2-CM+IL-35 NA组)。检测各组中PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT,以及细胞内JAK/STAT信号通路p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3比值的差异。结果与未刺激的THP-1细胞比较,M0、M1和M2型巨噬细胞中CD68 mRNA表达升高(P<0.01);与M0型巨噬细胞比较,TNF-α、IL-1βmRNA在M1型巨噬细胞中升高(P<0.01),而CD206、IL-10 mRNA在M2型巨噬细胞中升高(P<0.01);与M0-CM组比较,M2-CM组PC-3细胞增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值升高(P<0.05),M2-CM+IL-35 NA组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均显著降低(P<0.05),M1-CM组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均无显著改变(P>0.05);与M2-CM组比较,M1-CM组和M2-CM+IL-35 NA组增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值降低(P<0.05)。结论M2型巨噬细胞可通过分泌IL-35来促进PC-3细胞的增殖、侵袭和EMT,这可能与IL-35能上调JAK2/STAT3信号通路的活化相关。

血清白细胞介素-35表达水平与前列腺癌全雄激素阻断治疗预后的相关性分析

目的 探究血清白细胞介素-35(IL-35)表达水平与前列腺癌全雄激素阻断(MAB)患者预后的相关性。方法 收集2017年4月至2020年4月在本院接受MAB治疗的60例前列腺癌患者为研究对象。测定患者治疗前血清IL-35水平。依据随访结果,用受试者工作特征(ROC)曲线确定IL-35最佳截断值,并以此将纳入者分为低IL-35组和高IL-35组。比较2组病理特征,Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析血清IL-35与患者预后的相关性。结果 以3年随访是否死亡为结局绘制ROC曲线,所得IL-35最佳截断值147.73 pg/ml[曲线下面积(95%CI)=0.667(0.517,0.818,P<0.001)],并以此为临界点将患者分为低IL-35组(<147.73 pg/ml)和高IL-35组(≥147.73 pg/ml)。高IL-35组中Gleason评分>7分(58%和29%)、肿瘤T分期中T4期(74%和44%)和伴淋巴结转移(68%和39%)者占比均显著高于低IL-35组(P<0.05)。KaplanMeier生存曲线显示,低IL-35组患者无进展生存(PFS)[(32±4)个月和(23±4)个月]和总生存[(32±3)个月和(24±4)个月]情况均优于高IL-35组患者(χ^(2)=11.988、8.617,P<0.05);单因素和多因素Cox回归模型分析显示,血清IL-35水平[HR值(95%CI)=1.044 (1.017,1.073)]、[HR值(95%CI)=1.035(1.006,1.064)];Gleason评分[HR值(95%CI)=2.218 (1.449,6.307)]、[HR值(95%CI)=3.056 (1.649,9.447)];临床T分期[HR值(95%CI)=2.056(1.553,5.984)]、[HR值(95%CI)=1.900(1.237,11.622)]和伴淋巴结转移[HR值(95%CI)=2.415(2.084,7.445)]、[HR值(95%CI)=4.147(1.081,15.910)]均是影响MAB治疗的前列腺癌患者无进展生存期(PFS)和总生存情况的独立危险因素(P<0.05)。结论 治疗前血清IL-35水平异常升高是影响前列腺癌患者MAB治疗预后的独立危险因素。

肿瘤相关巨噬细胞上调miR-221-3p可能参与了前列腺癌的恶性转移

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)上调miR-221-3p可能参与促进前列腺癌(PCa)恶性转移的作用机制。方法选择6例转移性PCa患者癌组织进行微小RNA(miRNAs)表达谱测序和差异表达miRNAs分析。分离上述转移性PCa患者癌组织中的原代TAMs。采用聚合酶链反应(qPCR)测定其中miR-221-3p的表达水平。向RAW264.7巨噬细胞转染miR-221-3p模拟物(mimic)或抑制物(inhibitor),然后与人PCa细胞系PC3细胞建立共培养体系。CCK-8法测定PC3细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Transwell法测定细胞迁移和侵袭能力,Western blot法测定细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白因子的表达水平。结果在6例转移性PCa患者的癌组织中,与淋巴结转移阴性PCa组织来源TAMs相比,淋巴结转移阳性PCa组织来源TAMs中hsa-miR-221-3p显著上调(P<0.05)。在共培养体系中,与Mimic-NC组相比,miR-221-3p mimic组PC3细胞增殖能力明显增强;迁移能力和侵袭能力明显增强;EMT相关蛋白因子表达水平明显增强(除E-Cadherin)(P均<0.05)。与Inhibitor-NC组相比,miR-221-3p inhibitor组细胞增殖能力明显降低,凋亡率明显升高;迁移能力和侵袭能力明显被抑制;EMT相关蛋白因子表达水平明显被抑制(除E-Cadherin)(P均<0.05)。结论TAMs上调miR-221-3p可能参与促进了PCa恶性转移。

重楼皂苷Ⅰ对雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响

目的研究重楼皂苷Ⅰ对雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞生长抑制与诱导凋亡的作用。方法CCK-8法检测重楼皂苷Ⅰ对PC-3细胞生长的影响;流式细胞仪检测重楼皂苷Ⅰ对PC-3细胞周期的影响;TUNEL法检测重楼皂苷Ⅰ对PC-3细胞凋亡的影响。结果重楼皂苷Ⅰ高、中、低剂量组(1、0.5、0.25μg/mL)能时间和浓度依赖性的抑制PC-3细胞,与阴性对照组比较,抑制率差异有统计学意义(P<0.01);高、中剂量组与阳性对照组(顺铂2.5μg/mL)比较,抑制率差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞检测提示:重楼皂苷Ⅰ高、中、低剂量组作用于PC-3细胞后,G0/G1期细胞明显增加,S期细胞减少。与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。高、中剂量组与阳性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL法检测提示:重楼皂苷Ⅰ高、中、低剂量组PC-3细胞凋亡率均显著增加,且呈剂量-效果正相关,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅰ能抑制雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞的增殖,促进细胞凋亡。