26例儿童重症人副流感病毒感染的临床特点及危险因素分析

目的:分析儿童重症人副流感病毒(HPIV)感染的临床特点和危险因素。方法:选择2019年9月—2021年8月深圳市儿童医院HPIV感染的住院患儿627例,回顾性研究其中重症HPIV感染临床特点及危险因素。结果:(1)重症HPIV感染有26例(4.15%),冬季是高发季节;(2)单因素分析示:重症HPIV感染与非重症HPIV感染相比,在气促、发绀、血小板计数、基础疾病4项指标的差异有统计学意义(P<0.05),但年龄差异无统计学意义(P>0.05);(3)多因素Logistic回归分析示:气促、发绀、基础疾病与重症HPIV感染正相关,血小板与重症HPIV感染负相关,是其保护因素。结论:重症HPIV感染在住院患儿中占有一定比例,冬季为高发季节。气促、发绀、基础疾病是重症HPIV感染的危险因素,血小板升高(≥100×10~9/L)是其保护因素。

人副流感病毒的研究进展

人副流感病毒（human parainfluenza virus,HPIV）属副粘病毒科,为负性单链RNA病毒,是常见的社区获得性呼吸道感染病原。HPIV原名仙台病毒（Sendai Virus,SeV）,是1959年首先从日本仙台市1例死于肺炎的患者肺液中分离获得的,因其诸多特性与流感病毒不同,且又陆续分离得到其他病毒株,故被命名为副流感病毒。

苏州地区人副流感病毒3感染住院患儿临床特征

目的：探讨苏州地区因急性呼吸道感染住院患儿中副流感病毒3型（ HPIV3）感染临床特征。方法收集2013年1月-2013年12月因急性呼吸道感染住院2298例患儿的痰标本,应用直接免疫荧光法测呼吸道合胞病毒、流感病毒（A、B）、人副流感病毒（1-3）和腺病毒,采用实时PCR检测人博卡病毒DNA,逆转录PCR检测人偏肺病毒及鼻病毒RNA。分析人副流感病毒3型感染患儿的临床特点及流行病学特征,并与呼吸道合胞病毒（RSV）感染进行比较。结果2298例痰标本中病毒检测阳性者983例（42.78%）,HPIV 3阳性98例（4.26%）,次于RSV阳性233例（10.14%）；HPIV3常年均可感染,以春、夏季为发病高峰,夏季发病率高达45.92%；发病年龄均为6岁以下儿童,1岁以下检出率高,占62.30%；98例阳性标本中,HPIV3单独感染61例,主要引起支气管肺炎（80.33%）、急性毛细支气管炎（13.11%）,以咳嗽（96.72%）、喘息（44.26%）、发热（47.54%）为主要临床症状；与RSV比较,HPIV3住院患儿喘息发生率低,主要引起支气管肺炎,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HPIV3是苏州地区住院患儿呼吸道感染的重要病原之一,其有单独的致病性,与RSV相比,在季节分布、临床表现等方面有一定差异。

人副流感病毒HPIV多重RT-PCR快速检测方法的建立

目的建立快速检测人副流感病毒的多重PCR方法。方法通过查阅文献获取副流感病毒的PCR引物序列,并利用分子生物学软件对其进行评估,同时设计合成半巢式PCR引物。提取分离病毒的总RNA,以RNA抽提物为模板,一步法一次反转录扩增HPIV-1,2,3,4等4种型别的副流感病毒。以多重RT-PCR产物作为模板,用半巢式PCR进一步扩增确认。结果利用多重RT-PCR方法一次扩增出人副流感病毒的4个不同型别,条带大小分别是317、507、189和451bp,与目的片段大小一致;半巢式PCR扩增出相应的特异条带,条带大小分别是261、340、145和390bp,扩增结果与目的片段大小一致。结论人副流感病毒多重RT-PCR快速检测方法已初步建立。

人副流感病毒入侵宿主细胞的分子机制

综述了3型副流感病毒结合和进入宿主细胞的过程,重点讨论了受体结合分子血球凝集素-神经氨酶蛋白如何引发病毒与宿主细胞膜的融合过程,从分子水平上认识病毒入侵细胞的各个步骤,为进一步阻断病毒感染提供靶标。

荧光定量RT-PCR快速检测人副流感病毒3型的研究

[目的]利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测人副流感病毒3型的方法。[方法]根据人副流感病毒3型NP基因的相对保守序列分别设计一对引物及Taqman探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并建立定量标准曲线;特异性检验后利用临床标本与传统的细胞培养法进行比较。[结果]人副流感病毒3型检测反应的灵敏度为0.016TCID50,标准曲线相关系数为1.00,扩增效率为89.8%,6种非人副流感病毒3型病原体检测均为阴性,说明此方法具有很高的准确性、稳定性和特异性。[结论]本研究建立荧光定量RT-PCR技术可以准确检测人副流感病毒3型,不仅灵敏度高、稳定性好,而且可以对病毒滴度进行定量检测。

人副流感病毒致重症肺炎2例

2013年4—5月，北京协和医院诊治2例人副流感病毒（human parainfluenza virus，HPIV）感染引起的重症肺炎患者，报道如下。

仙台病毒Tianjin株及其HN/F基因真核表达质粒对人副流感病毒Ⅰ型的血清中和实验研究

目的:探讨仙台病毒Tianjin株(SeV)及其核酸制备预防人副流感病毒I型(hPIV-1)疫苗的可行性。方法(:1)用SeV免疫小鼠3次后取血清,间接ELISA法检测免疫血清抗体效价。(2)将倍比稀释的免疫血清与100 TCID50/0.1 ml的hPIV-1进行中和实验,观察细胞病变(CPE)并计算50%血清中和终点。(3)构建SeV真核表达质粒pVAX1-F、pVAX1-HN,分别单独或联合免疫小鼠,取免疫血清检测对hPIV-1的中和终点。结果:SeV免疫血清抗体的50%中和终点分别为39.8、12.6、16.0、44.7、25.1;质粒免疫血清抗体的中和作用按pVAX1-HN+pVAX1-F组>pVAX1-HN组>pVAX1-F组依次递减。结论:仙台病毒Tianjin株及其HN基因、F基因真核表达质粒能诱导机体产生抗hPIV-1抗体,有可能成为制备预防hPIV-1疫苗的有效毒株。

人副流感病毒的研究进展

人副流感病毒是呼吸道感染的常见病原体之一,可引起上、下呼吸道感染,如支气管炎、肺炎、喉炎等。HPIVs属副粘病毒科,为单股负链RNA病毒。根据基因组特征及血清学特点,HPIVs分为HPIV1-4四个血清型,其中HPIV-4又分为A和B两种亚型,HPIV-1和3为呼吸道病毒属,HPIV-2和4为腮腺炎病毒。不同亚型的HPIVs引起的疾病特点及流行病学特征不同。本文就HPIVs的病毒学、免疫学及发病机理、流行病学、临床特点、治疗原则等方面进行综述,为疾病预防、早期诊断及合理治疗提供依据。

苏州地区住院患儿人副流感病毒3肺炎流行病学及临床特征研究

目的:探讨苏州地区儿童人副流感病毒3肺炎的流行特点、临床特征及与气候因素的相关性。方法:收集2014-2017年苏州大学附属儿童医院收治的7525例社区获得性肺炎(CAP)住院患儿鼻咽分泌物,采用直接免疫荧光法检测人副流感病毒1、2、3型(HPIV1、HPIV2、HPIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)及流感病毒A、B型(InfA、InfB),逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测人类偏肺病毒、人鼻病毒(HRV),实时PCR检测人博卡病毒;分析气候因素与HPIV3肺炎流行的相关性。结果:7525例患儿中,HPIV3阳性268例(3.56%),前3位检出的病毒分别是HRV、RSV、HPIV3。HPIV3肺炎主要临床表现为咳嗽(98.13%)、喘息(38.06%)、发热(46.64%)等。HPIV3肺炎好发于6~12月龄,春夏季高发;RSV肺炎好发于0~6月龄,秋冬季高发。高热在HPIV3肺炎中多见,而喘息、气促和重症在RSV肺炎中更多见。HPIV3检出率与月平均气温、月总雨量呈高度正相关(P<0.01),与月平均风速呈中度正相关(P<0.05)。结论:HPIV3是苏州地区CAP住院患儿第3位病毒病原,6~12月龄组检出率最高,春夏季为流行高峰,HPIV3检出率与月平均气温、总雨量呈高度正相关,与月平均风速呈中度正相关。

北京地区1起人副流感病毒1型感染暴发疫情分子流行特征

目的对北京地区1起人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIV)感染暴发疫情进行流行病学调查及病原学分析,为疫情防控提供科学依据。方法对北京地区某托幼机构发热病例开展现场流行病学调查分析,采集病例咽拭子标本,利用实时荧光定量聚合酶链反应进行病原筛查。对人副流感病毒1型(human parainfluenza viruses 1,HPIV1)检测阳性的样本核酸,扩增HN和F基因并测序,通过生物信息软件分析病毒的基因特征。结果本次疫情中12名患儿均有发热症状,部分患儿有咽痛(7/12)、咳嗽(5/12)、流涕(5/12)等症状。7名患儿HPIV1核酸阳性,其他病原体检测阴性。系统进化树显示,本次研究的毒株位于进化支2.3,其HN基因中有4个氨基酸特异取代位点(G5E、V22A、P29S、T68A),F基因中有3个氨基酸特异取代位点(N333S、T475K、I509M),与进化支2中的其他毒株不同。结论本次疫情由HPIV1引起,对其进行流行病学调查和病毒基因特征分析有助于疫情的溯源和防控。

应用气-液两相呼吸道类器官从中国临床住院患儿中分离鉴定人副流感病毒1/2/3

人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器官(Air-liquid interface human airway epithelial organoid,HAE),从深圳市第三人民医院2016~2017年住院患儿hPIVs阳性咽拭子标本中分离获得hPIV1/2/3,分别命名为hPIV1/C-Tan/SZ01/2016、hPIV2/C-Tan/SZ01/2017、hPIV3/C-Tan/SZ01/2017。通过逆转录荧光定量PCR (Reversetranscriptionquantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测病毒核酸扩增、免疫荧光检测病毒蛋白在HAE的表达、负染及超薄切片透射电镜观察病毒形态和细胞定位,并对传代过程中病毒的活性、遗传稳定性和基因组特征进行分析。结果表明基于HAE分离hPIVs可以高效获得hPIVs临床分离株,所获毒株具有典型的病毒形态特征。三种hPIVs在HAE中复制良好且遗传稳定,病毒滴度均可达到约107 TCID50/100μL。对分离获得的hPIV1/2/3临床分离株进行全基因组及HN基因进行序列测定,结果表明:hPIV1全长为15568bp,属于hPIV1 C亚型;hPIV2全长15694bp,属于hPIV2 A3亚型;hPIV3全长15443bp,属于hPIV3 C3亚型,提示3株临床分离株与我国普遍流行的基因型相一致。综上,本研究应用HAE从近期住院患儿临床样本中成功分离获得生物学特性和基因组背景清晰且遗传稳定的hPIV1/2/3毒株。这些临床流行毒株资源的分离鉴定,为hPIVs的感染特点和致病机制的深入研究及抗病毒药物筛选和疫苗研发奠定了基础。

河南省急性呼吸道感染病例人副流感病毒3型血凝素-神经氨酸酶基因特征分析

目的了解河南省急性呼吸道感染(ARI)病例中人副流感病毒3型(HPIV3)血凝素-神经氨酸酶(HN)的基因特征。方法对河南省漯河市采集的严重急性呼吸道感染(SARI)病例标本和郑州市采集的流感样病例(ILI)标本进行人副流感病毒(HPIVs)核酸检测, HPIV3检测阳性标本使用RT-PCR法进行HN基因扩增并测序, 使用CExpress以及MEGA7.0软件进行序列编辑、进化树构建和基因特征分析。结果漯河市和郑州市共采集ARI咽拭子标本374份, 其中HPIV3核酸检测阳性标本20份(5.3%), 对阳性标本进行靶基因扩增后获得18条序列, 经分析全部为C3亚群, 其中有16条序列为C3f基因型, 有2条序列为C3a基因型。18株HPIV3的HN基因序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.6%~100.0%和99.3%~100.0%, 与原株型Wash/47885/57相比差异较大, 发生了12处共同的氨基酸突变, 其中H295Y、I391V、D556N和I53T是功能相关突变位点。与流行株China/BCH4210A/2014相比同源性较高, 未发生共同的氨基酸突变, 未发现新的功能相关突变位点。结论河南省近年流行的HPIV3为C3亚型的C3f和C3a分支, 可能建立了本土循环流行。应对HPIV3的C3亚型进行持续深入的监测, 为防控HPIV3相关疾病提供科学依据。

重视呼吸道人副流感病毒感染

人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)属于副黏病毒科,为有包膜的单股负链RNA病毒,根据其血清学及基因组特征,分为HPIV1-4型。HPIVs是引起儿童和成人急性呼吸道感染的重要病毒病原,其疾病负担可能被严重低估。目前HPIVs感染尚无有效的疫苗和特异的抗病毒药物,需要重视HPIVs感染的病原学监测、致病机制研究、疾病诊治、抗病毒药物和疫苗的研发。

2019—2020年我国6省市人副流感病毒3型全基因组序列特征分析

目的本研究旨在分析2019—2020年期间我国6个省市(北京、河南、吉林、安徽、甘肃和山东)流行的人副流感病毒3型(human parainfluenza virus 3,HPIV3)的全基因组序列特征,以揭示其基因组的遗传变异特点和分子进化规律。方法根据基因型别、遗传差异和时空分布等原则,从6个省市筛选出12株HPIV3流行代表株(其中7株为C3a型、2株为C3b型、3株为C3f型)。采用巢式RT-PCR方法进行分段重叠扩增并获取其全基因组序列。随后,构建全球HPIV3代表株的全基因组序列数据库,使用生物信息学软件开展分析。结果研究发现,这12株HPIV3代表株的全基因组序列长度在15227 bp~15370 bp之间,G+C含量为35.1%~35.3%,核苷酸一致性为97.6%~99.6%,与原型株(GenBank登录号:NC_001796.2)的核苷酸一致性为94.2%~94.5%。分析我国和全球可获取的HPIV3全基因组序列显示,基因组变异方式主要为点突变,未发现碱基缺失和基因重组现象。仅在本研究的一株吉林省代表株(CHN/Jilin036/2019/C3b)的F基因3′UTR区域发现ATTAAA碱基插入,其病原学意义有待进一步研究。对基因组编码蛋白的氨基酸比对结果显示,我国和全球广泛流行的C3a分支HPIV3在N蛋白、P蛋白和L蛋白上存在分支特异性变异位点,而我国流行的部分C3a毒株在L蛋白上还存在一个独特的变异位点(N216S),尚未发现我国C3b和C3f分支毒株存在特异性变异位点。基于全基因组的进化分析显示,全球HPIV3流行株的最近共同祖先株形成时间(the time to the most recent common ancestor,tMRCA)可追溯至1927年(95%HPD:1901—1945),平均分子进化速率为5.29×10^(-4)替换/位点/年,而我国HPIV3流行株的平均分子进化速率为5.24×10^(-4)替换/位点/年。此外,HPIV3编码的各个基因均受到负向选择压力,其中P基因、HN基因和F基因的核苷酸变异最为显著,且其分子进化速率高于其他基因。结论本研究期间6个省市流行的HPIV3病毒株全基因组进化相对保守,点突变是驱动HPIV3基因组进化的主要方式。

深圳市儿童医院住院患儿人副流感病毒感染状况分析

目的 归纳总结深圳市儿童医院住院患儿人副流感病毒(HPIV)感染的临床特点,为预防及诊治HPIV感染提供参考。方法 收集2019-09-01-2021-08-31在深圳市儿童医院住院且诊断为HPIV感染患儿的临床资料,回顾性分析HPIV感染的季节、年龄、基础疾病、混合感染情况和临床表现等特点。统计HPIV检出情况、季节分布、年龄分布和临床特征。结果 共检出HPIV阳性患儿627例,阳性率为3.29%,男性和女性检出率比较,差异无统计学意义,P>0.05。HPIV检出率2019年秋季为1.55%,冬季为1.37%,2020年春季为0,夏季为0.37%,秋冬季高于春夏季,差异有统计学意义,χ^(2)=23.383,P<0.001;2020年秋季为5.87%,冬季为6.06%,2021年春季为4.19%,夏季为1.94%,秋冬季高于春夏季,差异有统计学意义,χ^(2)=87.760,P<0.001。0~1岁212例(33.81%),>1~3岁215例(34.29%),>3~5岁154例(24.56%),>5~18岁46例(7.34%),平均发病年龄25.54个月。感染患儿中,单纯呼吸道表现221例,肺外表现406例,肺外表现与单纯呼吸道表现患儿在年龄<60个月(χ^(2)=12.008,P=0.007)、血小板增多(χ^(2)=10.666,P=0.001)和中性粒细胞减少(χ^(2)=72.184,P<0.001)方面比较,差异有统计学意义。混合感染343例,单一感染284例,单一感染与混合感染患儿在发热(χ^(2)=5.362,P=0.021)、咳嗽(χ^(2)=11.566,P=0.001)和中性粒细胞减少(χ^(2)=16.799,P<0.001)方面比较,差异有统计学意义。113例有基础疾病,514例无基础疾病,有无基础疾病患儿在年龄<60个月(χ^(2)=9.122,P=0.028)、气促(χ^(2)=9.488,P=0.002)、发绀(χ^(2)=14.833,P<0.001)、重症HPIV感染(χ^(2)=23.562,P<0.001)方面比较,差异有统计学意义。HPIV感染导致非呼吸系统疾病165例(26.32%)。结论 HPIV是深圳市儿童医院住院患儿病毒感染的重要病原,秋冬季高发,婴幼儿多见,混合感染较常见,常伴有基础疾病,多数有肺外表现,可引起多系统、多脏器损伤。

2010-2020年江西省儿童医院急性呼吸道感染病例人副流感病毒流行特征研究

目的了解江西省儿童医院急性呼吸道感染病例人副流感病毒(HPIV)感染状况及流行特征,为HPIV的防控提供理论支撑。方法收集2010年4月至2020年8月就诊于江西省儿童医院儿童的急性呼吸道感染病例的鼻/咽拭子、痰液和支气管肺泡灌洗液等样本,采用巢式PCR与实时荧光PCR方法检测HPIV 1~4型及其他常见呼吸道病毒,检测结果采用SPSS 25.0软件进行统计分析(χ^(2)检验和Fisher’s精确检验)。结果HPIV总阳性率为12.50%(492/3936),其中HPIV-1、2、3、4的阳性率分别为1.88%、0.61%、8.71%、1.30%。不同性别感染者检出率差异无统计学意义(χ^(2)=2.290,P>0.05)。男、女性感染者均以HPIV-3感染为主,其HPIV-3的阳性率分别为9.21%(247/2683)、7.66%(96/1253)。不同年龄段患者中,0~36月龄儿童最为易感。2020年HPIVs阳性率明显下降,与2010—2019年平均感染率相比差异有统计学意义(P<0.05)。HPIVs感染者最常见的临床表现为咳嗽,占89.84%(442/492);临床初步诊断最多为肺部感染,占33.94%(167/492),其次为支气管肺炎,占22.36%(110/492)。合并感染其他呼吸道病毒的占39.02%(192/492),其中最常见的病毒为人鼻病毒(HRV),其次是人腺病毒(HAd V)和呼吸道合胞病毒(RSV)。HPIV-1感染每隔2年秋季会有大幅上升,主要流行于秋、冬季。HPIV-2流行高峰与HPIV-1交替发生,主要流行于秋季。HPIV-3主要流行于春季和夏季(4—8月),与其他月份相比差异有统计学意义(χ^(2)=23.143,P<0.05)。HPIV-4的流行无显著季节性。HPIV-1和HPIV-3在住院病例与急门诊病例中的阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=6.125、10.525,P<0.05),上、下呼吸道感染病例阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=4.107、8.990,P<0.05)。结论HPIV是江西省儿童呼吸道感染的重要病原体,特别是在<36月龄婴幼儿中,对其感染HPIV的预防可借鉴呼吸道感染疾病的防控措施。

2014—2020年儿童社区获得性肺炎中人副流感病毒感染的多中心研究

目的了解我国儿童社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)中人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)感染的流行病学特点及临床特征,为HPIVs感染诊疗和防控提供基础数据。方法2014年11月至2020年2月,在11个省和直辖市的14家医院纳入5448名CAP住院儿童,采集鼻咽抽吸物或咽拭子,使用液相悬浮芯片技术检测包括HPIV1-4型等18种呼吸道病毒核酸,收集人口学资料和临床信息进行统计学分析。结果5448例CAP住院患儿中HPIVs总检出率为8.83%(481/5448),男性检出率高于女性(62.79%v.s 37.21%,χ^(2)=0.000,P=0.992)。1~<3岁年龄组的HPIVs检出率较其它年龄组高,且差异有统计学意义(χ^(2)=61.893,P<0.001)。北方地区患儿的HPIVs检出率高于南方地区(9.02%v.s 8.65%),但差异无统计学意义(χ^(2)=0.239,P=0.625)。北方和南方地区儿童中HPIV1-4型流行特征不完全一致。HPIV1在北方和南方地区均主要为秋季流行;HPIV2在北方夏季流行,南方检出率较低;HPIV3在北方和南方春夏季是流行高峰,但南方比北方持续时间更长;HPIV4在北方和南方均主要为秋季流行。在481名HPIVs阳性患儿中,单纯HPIV感染病例占58.42%(281/481),临床表现主要以咳嗽(90.75%)和发热(68.68%)为主;合并另一种HPIV型或其它病毒感染的病例占42.62%(205/481),合并2种及以上病毒感染的病例占11.43%(55/481),HPIV3与其它病毒发生合并感染的检出率最高。47名HPIVs阳性的重症肺炎患儿中HPIV3感染占比最多(76.80%)。结论HPIVs是引起我国儿童CAP的重要病原体之一,3岁以下儿童是HPIVs感染的主要群体;各型HPIV在北方和南方地区儿童中的流行特征不完全相同;HPIV3是儿童呼吸道HPIVs感染和重症的主要型别。