LNA探针同时检测人副流感病毒1，2，3型多重荧光定量RT—PCR方法的建立

目的人副流感病毒1，2，3型是呼吸道感染的主要病原。本研究建立了特异、快速、灵敏的多重荧光定量RT—PCR方法用于人副流感1，2，3型病毒临床标本检测。方法针对人副流感1，2，3型病毒设计特异性引物探针，优化荧光RT—PCR反应条件。应用体外转录方法分别制备人副流感1，2，3型病毒的标准品。验证荧光定量RT-PCR方法的特异性，敏感性和稳定性。结果该方法对人副流感1，2，3型病毒核酸检测有高度特异性，检测的灵敏度HPIV1为10个拷贝，HPIV2为100个拷贝，HPIV3为100个拷贝。可从临床患者鼻咽吸出物标本中直接检出。结论’本研究建立的LNA探针同时检测人副流感病毒1，2，3型多重荧光定量RT-PCR方法具有较高的特异性和敏感性。适用于临床早期诊断和实验室病原谱筛查。