睾酮对人单核细胞雄激素受体蛋白表达的影响

目的研究不同浓度的睾酮对人单核细胞中雄激素受体(AR)蛋白表达的影响。方法对培养的人单核细胞株THP-1予不同浓度的睾酮刺激,采用Western blotting检测细胞中AR蛋白表达量,进行半定量比较。结果人的单核细胞中存在AR。AR表达量随睾酮浓度的增加而减少。加用选择性受体阻滞剂氟他胺可使这种作用完全阻滞。结论AR表达量随睾酮浓度的增加而减少,并具有一定的时间、剂量依赖性。

神经胶质细胞系衍生神经营养因子和雄激素受体在手术诱导隐睾小鼠睾丸管周细胞中的表达

【目的】探讨神经胶质细胞系衍生神经营养因子(GDNF)和雄激素受体(AR)在隐睾症小鼠睾丸管周细胞中的表达水平及对隐睾症导致生精功能障碍的理论意义。【方法】30只5周龄雄性ICR小鼠采用随机数字表法随机分配至6组中,随机抽取3组15只小鼠进行手术诱导隐睾,其余3组为作为对照组进行假手术处理。分别于4 d、7 d、14 d后取各组睾丸组织,然后测量睾丸体积、观察睾丸组织病理,提取各组睾丸管周细胞后利用免疫荧光、Re⁃al-Time PCR和蛋白质印记法检测AR和GDNF的mRNA和蛋白的表达。【结果】对照组4 d、7 d、14 d小鼠的睾丸体积分别为(125.58±19.22)mm^(3)、(123.45±20.12)mm^(3)、(140.09±13.62)mm^(3);睾丸各级生精细胞排列整齐、层次清楚,可见较多精子细胞,生精小管周围管周细胞形态规则,呈梭形围绕小管周围,细胞厚度均一;ARmRNA的表达量分别为1.00±0.05、1.06±0.07、1.19±0.13GDNFmRNA的表达量分别为1.00±0.04、1.09±0.05、1.10±0.07;AR蛋白的表达量分别为1.01±0.01、0.79±0.02、1.01±0.04;GDNF蛋白的浓度分别为(18.68±0.43)pg/mL、(14.39±0.36)pg/mL、(16.88±0.37)pg/mL。隐睾组4 d、7 d、14 d小鼠的睾丸体积分别为(115.64±3.91)mm^(3)、(69.51±14.97)mm^(3)、(44.86±5.56)mm^(3);睾丸各级生精细胞排列紊乱、层次不清、结构破坏,曲细精管周围管周细胞萎缩、弯曲断裂;ARmRNA的表达量分别为0.76±0.06、0.53±0.04、0.29±0.02;GDNFmRNA的表达量分别为0.72±0.05、0.42±0.02、0.30±0.03;AR蛋白的表达量分别为0.54±0.02、0.98±0.04、0.31±0.01;GDNF蛋白的浓度分别为(8.50±0.34)pg/mL、(17.44±0.32)pg/mL、(6.83±0.34)pg/mL。上述指标与对照组相比,除了4 d的睾丸体积差异无统计学意义(P>0.05),其他均有统计学差异(P<0.05)。对照组中3个时间点的睾丸体积、AR和GDNF的mRNA、蛋白表达量的差异无统计学意义(P>0.05),隐睾组3个时间点的睾丸体积、AR和GDNF的mRNA、蛋白表达量呈逐渐下降趋势且各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】在手术诱导隐睾小鼠中,睾丸管周细胞的AR和GDNF的表达水平随着诱导时间的延长呈现显著下降。AR和GDNF在隐睾症介导睾丸管周细胞功能的损伤中有重要作用。本研究为阐明隐睾症导致生精功能障碍的机制研究提供理论基础。

雪松醇抑制二氢睾酮诱导胎鼠真皮成纤维细胞雄激素受体活化

目的探究雪松醇对体外培养胎鼠真皮成纤维细胞二氢睾酮(DHT)诱导雄激素受体(AR)活化的抑制作用。方法分离第18.5天(E18.5)C57BL/6J胎鼠真皮,建立原代胎鼠真皮成纤维细胞培养;用倒置显微镜观察胎鼠成纤维细胞凝集生长;用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒和荧光染色技术检测胎鼠成纤维细胞的ALP活性和CD133表达。将指数生长期胎鼠真皮成纤维细胞分为4组,即空白对照组、DHT组、雪松醇组和雪松醇+DHT联合处理组。不同浓度(0~300mol/L)雪松醇和DHT处理细胞48h后,用细胞计算试剂盒(CCK8)测定细胞存活率;用免疫荧光法、蛋白质印迹法(Westernblotting)和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组AR及其共激活因子四个半LIM结构域2(FHL2)的表达水平和AR核定位;用ALP染色法检测各组细胞ALP活性变化。结果30μmol/L DHT处理胎鼠真皮成纤维细胞,48 h后观察到AR主要分布在细胞核,胞核/胞质荧光强度比值为(3.39±0.04)/高倍镜视野(HPF)。然而,雪松醇+DHT联合处理组胎鼠真皮成纤维细胞AR着色分布在胞浆和胞核,胞核/胞浆荧光强度比值为(1.24±0.02)/HPF,二者比较差异有统计学意义(P<0.05),提示雪松醇可抑制DHT诱导的AR核转位;此外,笔者还观察到,DHT可以下调ALP表达并上调AR共激活因子FHL2的表达,而雪松醇可以逆转DHT对成纤维细胞的作用。结论雪松醇除阻止DHT诱导AR核转位以外,还能抑制共激活因子FHL2的表达,双靶点下调DHT-AR信号活性。外用雪松醇治疗雄激素源性脱发(AGA)值得进一步研究。

雄激素受体调控的lncRNA ARLNC1对前列腺癌细胞增殖、克隆、迁移和细胞周期的影响

目的:探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)调控的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)ARLNC1对前列腺癌细胞增殖、克隆、迁移和细胞周期的影响。方法:选取正常前列腺上皮细胞株WPMY-1和前列腺癌细胞株PC3、VCaP、22RV1、DU145和LNCaP为研究对象,qRT-PCR分析lncRNA ARLNC1的表达水平;双氢睾酮(DHT)以时间和浓度依赖的方式刺激LNCaP细胞,分析lncRNA ARLNC1的转录水平;采用数据库预测和双荧光素酶报告基因系统分析雄激素受体与lncRNA ARLNC1的关系;将LNCaP细胞分为sh-NC和sh-lncRNA ARLNC1组,采用CCK-8分析细胞增殖,检测细胞克隆和迁移能力;流式细胞仪分析细胞周期变化,Western blot分析细胞周期蛋白CyclinD1、CDK6、p27的表达水平。结果:与正常前列腺上皮细胞相比,lncRNA ARLNC1在雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP、VCaP、22RV1)中的表达水平明显增加,而在雄激素非依赖性前列腺癌细胞株(PC3、DU145)中几乎不表达(P<0.05),其中LNCaP细胞变化最显著,所以下续选用LNCaP细胞作为实验株。100 nmol/L DHT刺激LNCaP细胞0、6、12、18、24 h后,lncRNA ARLNC1的转录水平相对于对照组以时间依赖的方式逐渐升高(P<0.05);不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol/L)DHT刺激LNCaP细胞24 h后,lncRNA ARLNC1转录水平随浓度不断增加(P<0.05);JASPAR数据库预测到lncRNA ARLNC1启动子区域有AR结合的位点,双荧光素酶报告基因系统表明AR能结合在lncRNA ARLNC1启动子区域,并激活其转录(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-lncRNA ARLNC1组细胞增殖、迁移和克隆能力减弱,细胞周期阻滞在S、G 2期(P<0.05);sh-NC组相对于sh-lncRNA ARLNC1组,CyclinD1、CDK6蛋白水平增加,而p27蛋白水平降低(P<0.05)。结论:AR调控的lncRNA ARLNC1作为癌基因在雄激素受体阳性的前列腺癌细胞系中高表达,能促进前列腺癌细胞的增殖、克隆、迁移和细胞周期进展。

老年男性雄激素及其单核细胞雄激素受体与高血压、冠心病的关系

据流行病学的研究发现,性激素与高血压、冠心病可能存在一定的联系.本研究旨在进一步从细胞分子水平探讨雄激素及其受体与男性高血压、冠心病的关系.

雄激素受体在肾透明细胞癌患者中的表达及相关性研究

目的:探讨雄激素受体(AR)在肾透明细胞癌患者中的表达、临床病理特征与AR相关性。方法:选取2017年1月-2019年1月于广东医科大学附属医院就诊的36例肾透明细胞癌患者为研究对象,均采集肾癌组织及正常癌旁组织(距离肿瘤>5 cm),采用实时荧光定量PCR技术检测AR的表达情况,结合肿瘤的病理分期初步探讨AR可能的临床意义。结果:男性AR相对表达量与女性比较,差异无统计学意义(P>0.05);正常癌旁组织(距离肿瘤>5cm)的AR相对表达量高于肾透明细胞癌,T1期肾透明细胞癌组织的AR相对表达量高于T2期,差异有统计学意义(P<0.05);AR与肾透明细胞癌病理结果、临床分期呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AR可能是肾透明细胞癌发生、发展的相关受体,并且在多种类型肾癌中的多个阶段有表达,可能在促进肾癌发生、发展中发挥作用。

睾酮对人单核细胞中雄激素受体基因表达的影响

目的:研究不同浓度的睾酮对人单核细胞中雄激素受体(AR)基因表达的影响。方法:对培养的人单核细胞株THP-1予不同浓度的睾酮刺激,采用RT-PCR法检测细胞中AR基因表达量,进行半定量比较。结果:人的单核细胞中存在AR。刺激3h后,睾酮浓度为10-6mol/L、10-5mol/L组和刺激6h后10-9～10-5mol/L的各组AR基因表达较对照组表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),给氟他胺(10-5mol/L)组和同时给予10-7mol/L睾酮组与对照组比较,AR的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在一定范围内,睾酮可减少人单核细胞中AR的表达,选择性受体阻滞剂氟他胺可使这种作用完全阻滞。

人外周血白细胞雄激素受体的鉴定及意义

人外周血白细胞雄激素受体的鉴定及意义赵瑛，刘志民，邵福源，吴萍嘉许多研究表明雄激素受体（ＡＲ）不仅存在于性腺组织［１，２］，也广泛存在于脑、肝、骨髓及皮肤纤维母细胞等组织［３］．已证实人外周血白细胞存在雌激素受体（ＥＲ）［４］．故外周血白细胞也可能存...

痤疮患者血浆雄激素水平及白细胞雄激素受体的测定

为探讨痤疮患者外周血雄激素及白细胞雄激素受体(AR)含量对痤疮发生发展的影响,对35例痤疮患者和35名正常对照采用放射配体结合分析法测定白细胞雄激素受体含量,同时用放射免疫法检测血浆雄激素水平。结果:男性痤疮患者,血浆睾酮仅轻度升高,但其外周血白细胞AR的水平与对照组相比有明显升高(P<0.05)。女性痤疮患者,血浆睾酮水平及外周血白细胞AR水平与对照组相比均明显升高(P<0.01)。雄激素及其受体含量增高在女性痤疮的发病中可能起着重要的作用,痤疮的严重程度与睾酮水平及白细胞AR水平密切相关。

黄白痤疮膏对金黄地鼠白细胞雄激素受体及皮脂腺斑组织结构的影响

目的:探讨黄白痤疮膏外用治疗寻常痤疮的作用机理。方法:选用成年雄性金黄地鼠侧腹皮脂腺斑作为动物模型,随机分3组分别采用黄白痤疮膏、5%安体舒通乳剂、蒸馏水外擦皮脂腺斑20天,观察皮脂腺斑组织结构及皮脂腺斑的大小变化;应用放射配体结合分析法测定实验地鼠白细胞雄激素受体(AR)含量,放射免疫法检测地鼠血清中睾酮的水平。结果:黄白痤疮膏与安体舒通均能明显缩小金黄地鼠皮脂腺斑,与对照组比较有显著性差异(P(0.01);黄白痤疮膏能明显的改变皮脂腺斑的显微结构,与对照组比较有显著性差异(P(0.05);黄白痤疮膏与安体舒通均具有降低金黄地鼠外周血白细胞AR,与对照组比较有显著性差异(P(0.05)。结论:黄白痤疮膏能抑制皮脂腺细胞的增生和分泌功能,改变皮脂腺斑显微结构,使皮脂腺斑缩小,降低金黄地鼠外周血白细胞AR,对痤疮有良好的防治作用。

苦参碱对前列腺癌细胞增殖及雄激素受体功能的抑制作用

目的:探讨苦参碱(matrine)对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的增殖及雄激素受体(androgen re-ceptor,AR)表达的抑制作用。方法:分别用0.5、1.0、1.5、2.0、3.0g/L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12、24、36h后MTT法检测细胞生长活性;台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线;24h后流式细胞仪测定细胞周期变化;24h后Western印迹法检测细胞内AR的表达。结果:苦参碱能抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度苦参碱组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(P<0.01)。苦参碱诱导LNCaP细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01);细胞内AR的表达随苦参碱剂量依赖性减少(P<0.01)。结论:苦参碱通过下调细胞内AR表达和阻滞细胞周期进展来抑制LNCaP细胞的体外生长。

雄激素受体、雌激素受体在肝细胞型肝癌中的免疫电镜观察

目的：观察雄激素受体（ＡＲ）与雌激素受体（ＥＲ）在肝癌和非癌肝组织超微结构上的分布。探讨ＡＲ、ＥＲ在肝癌致癌过程中的作用。方法：用免疫胶体金染色法（ＩＧＳ）标记１３例肝细胞型肝癌与５例非癌肝组织细胞内雄激素受体（ＡＲ）及雌激素受体（ＥＲ），并用免疫透射电镜观察。结果：发现胶体金颗粒主要分布于线粒体双层膜和脊膜；粗面内质网；结合及游离核蛋白体；核膜及核周间隙，异染色质及常染色质等部位。统计分析表明，肝癌细胞金颗粒明显多于非癌肝细胞内金颗粒（Ｐ＜０．０５）。肝癌细胞胞质、胞核ＡＲ金颗粒明显多于ＥＲ金颗粒（Ｐ＜０．０５）。而非癌肝细胞胞质、胞核ＡＲ、ＥＲ ｋ颗粒数量无显著差别（Ｐ＞０．０５）。结论：提示肝癌是一种雄激素依赖肿瘤，为抗性激素治疗肝癌提供了理论依据。

雄激素受体在前列腺癌细胞中作用及其靶向治疗的研究进展

雄激素受体(androgen receptor,AR)在前列腺癌的发生发展中扮演重要角色。雄激素剥夺疗法(androgen deprivationtherapy,ADT)早期可成功抑制肿瘤的生长,但最终导致肿瘤复发并进入激素抵抗阶段。AR对前列腺癌基质细胞起促进肿瘤增殖和转移作用,是上皮腔样细胞的存活因子,而对肿瘤干细胞样细胞及上皮基底细胞的增殖起抑制作用,AR在不同类型细胞中的不同作用向当前ADT传统的疗法提出挑战,为发展新的治疗策略提供理论依据。目前以AR为靶点的靶向治疗药物研发也取得一些进展。本文就AR在前列腺癌不同类型细胞中的作用及靶向治疗方面的进展加以综述。

脱氢表雄酮经不依赖于雌、雄激素受体的MAPK信号途径抑制成骨细胞凋亡

脱氢表雄酮(DHEA)已成为防治绝经后骨质疏松症(PMO)的新策略,但其调控成骨细胞(OB)凋亡的具体分子机制和信号转导途径尚不清楚。我们通过颅骨酶解法原代培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,10-7mol/LDHEA分别作用0h、24h、48h、72h后,RT-PCR分析OB中ERα、ERβ和ARmRNA表达;原代OB去血清进一步培养24h,细胞以雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182,780(1μmol/L)、雄激素受体(AR)拮抗剂Flutamide(10μmol/L)或U0126(100μmol/L)预处理后给予系列浓度DHEA(10-10-10-5mol/L)孵育72h,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡;原代OB以1μmol/LICI182,780或10μmol/LFlutamide预处理25min后给予不同浓度DHEA孵育10min,Westernblotting分析ERK1/2的磷酸化状态。结果表明OBs经10-7mol/LDHEA体外处理24h、48h、72h后,ERβ和ARmRNA水平升高(分别为P<0.05和P<0.01);而ERαmRNA水平无明显变化。10-9-10-6mol/LDHEA可显著抑制血清饥饿诱导的OBs早期凋亡(分别为P<0.05及P<0.01),该抑制效应可被U0126阻滞,ICI182,780或Flutamide则不能阻滞DHEA对OB的抗凋亡效应;Westernblot也显示ICI182,780或Flutamide都不能有效地阻滞DHEA对OB中ERKs磷酸化的诱导作用。因此可认为DHEA经ER或AR非依赖途径抑制OB凋亡;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径,磷酸化ERK1/2参与介导这一作用。

男性不育症患者外周血白细胞雄激素受体的改变及意义

目的：探讨男性不育与外周血白细胞雄激素受体表达的关系。方法：根据精液分析及睾丸活检病理检查结果,将67例男性不育症患者分成少精子症组(n=21)、弱精子症组(n=15)、阻塞性无精子症组(n=14)和非阻塞性无精子症组(n=17),采用放射配体结合分析法检测不育症患者外周血白细胞雄激素受体(AR),同时采用放射免疫法检测血清睾酮(T)和雌二醇(E_2)水平,并以22例正常生育男性为对照。结果：外周血白细胞AR含量少精子症组、弱精子症组、阻塞性无精子症组与对照组比,均无统计学差异(P＞0．05)；非阻塞性无精子症组(782±98)与对照组(913±104)相比,差异有统计学意义(P＜0．01)。男性不育症各组与对照组相比,E_2和T水平差异均无统计学意义(P＞0．05)；而男性不育症患者精子密度与白细胞AR含量呈正相关(r=0．233,P=0．010)。结论：一部分男子不育的发生、发展过程可能与AR表达下调有密切关系。

乙型肝炎病毒X蛋白、雄激素受体及p53蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)、雄激素受体(androgen receptor,AR)及p53在肝细胞癌(HCC)中的表达及意义。方法采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的碱性磷酸酶及底物色素混合液(SP)免疫组化方法检测58例患者乙型肝炎病毒相关原发肝细胞癌组织(HCC)及相应癌旁组织中HBx、AR及p53的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 HCC和癌旁组织中HBx、AR及p53的表达率分别为63.8%(37/58)、58.6%(34/58)及62.0%(36/58)和20.9%(12/58)、27.6%(16/58)及8.6%(5/58);差别有统计学意义(P<0.05)。HBx阳性和HBx阴性的HCC组织中AR及p53的表达率分别为72.3%(27/37)、83.8(31/37)和33.3%(7/21)、23.8%(5/21),在HCC组织中HBx表达与AR及p53表达正相关(r=0.4532及r=0.4754,P<0.05)。HBx染色的阳性率与AFP水平和分化程度相关;AR染色的阳性率与性别及肿瘤直径相关;p53染色的阳性率与TNM分期相关。结论在HCC组织中HBx蛋白可上调AR及p53的表达,HBx-AR信号传导途径及p53基因突变可能促进HBV相关肝细胞癌的发生发展。

慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征患者白细胞雄激素受体的改变及意义

目的探讨慢性前列腺炎/盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)的发生与性激素及雄激素受体(AR)的关系。方法采用放射配体结合分析法检测78例CP/CPPS患者(CP/CPPS组)和32例正常对照者(对照组)外周血白细胞AR,同时采用放射免疫法检测患者血清睾酮(T)和雌二醇(E2)水平。结果CP/CPPS组与对照组血清E2和T水平无差异,外周血白细胞AR含量CP/CPPS组低于对照组(P<0.01),CP/CPPS组E2/T高于对照组,P<0.05。CP/CPPS患者CP症状指数评分(CPS I)与白细胞AR含量呈负相关(r=-0.512,P<0.01。结论CP/CPPS的发生、发展与E2、T比例失调及白细胞AR下调有密切的关系。

高原红细胞增多症患者雄激素受体的表达及意义

目的观察高原红细胞增多症(HAPC)患者雄激素及其受体水平并探讨其临床意义。方法纳入HAPC男性患者40例和体检健康男性40例。化学发光免疫分析法检测血清睾酮水平,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞雄激素受体的相对表达水平。结果 HAPC患者外周血单个核细胞雄激素受体mRNA的相对表达水平较对照组高,而血清睾酮水平较对照组低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论雄激素可能通过雄激素受体介导的生物学效应,在HAPC的发病过程中发挥作用。

国人不同年龄正常男性包皮成纤维细胞雄激素受体的测定

为确定国人不同年龄男性靶细胞雄激素受体（ＡＲ）的含量及其正常值，我们以氚标记的人工合成的雄激素－［３Ｈ］－Ｒ１８８１为配体，采用完整细胞的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析及单点分析法测定了４０例不同年龄正常男性（从１．５－６０岁）包皮成纤维细胞的ＡＲ含量。实验表明，青春前期、青春期、青壮年期及中年期组的ＡＲ含量（位点／细胞）分别为５９４３±９０２（ｎ＝８）、６２０７±１０９７（ｎ＝１２）、６００４±１２２７（ｎ＝１２）、６３２０±１０８７（ｎ＝８）。组间比较无统计学上的差异，表明该细胞的ＡＲ含量没有与年龄相关的变化。由于本实验所用的外阴部皮肤成纤维细胞为体外培养的细胞系，故其ＡＲ的测定值只代表该细胞ＡＲ的基础值，而不反映ＡＲ在体内的调节性变化。

利用DHPLC研究我国几个地方绵羊品种黑素细胞刺激素受体基因单核苷酸多态性(英文)

利用测序及变性高效液相色谱 (DHPLC)研究了蒙古羊、哈萨克羊、滩羊和藏绵羊黑素细胞刺激素受体(MSHR)基因单核苷酸多态性 (SNP)。结果表明 ,在扩增片断长度为 4 15bp范围内存在一个T317C突变 ,DHPLC可检测到该突变并被证明是一种高通量且简便的筛选方法。通过两次DHPLC可确定两个杂合子和一个纯合子 ,第一次DHPLC可迅速检测出由于形成异源双链而呈肩峰的杂合子 (TC) ,但不能区分两个均呈单峰的纯合子 (TT或CC)。第二次DHPLC将未知纯合子与已知序列的纯合子混合后进行 ,通过判定单峰或肩峰即可推断未知纯合子的基因型。所研究的 4个绵羊群体在该突变位点均处于Hardy Weinberg平衡状态。