人单纯疱疹病毒2型感染致豚鼠输卵管妊娠的研究

目的探讨人单纯疱疹病毒2型感染引起输卵管妊娠的可能性。方法用人单纯疱疹病毒2型感染豚鼠阴道,实时荧光定量PCR技术检测豚鼠子宫颈,子宫内膜,输卵管粘膜细胞中人单纯疱疹病毒2型DNA,原位杂交法检测豚鼠子宫内膜及输卵管粘膜细胞中人单纯疱疹病毒2型DNA,免疫组化法检测子宫内膜和输卵管粘膜细胞人单纯疱疹病毒2型抗原,分别记录数据,计算感染率。结果实时荧光定量PCR法检测豚鼠人单纯疱疹病毒2型DNA,子宫颈阳性率46.67%,子宫内膜阳性率26.67%,输卵管粘膜细胞阳性率10.00%;原位杂交法子宫内膜阳性率23.33%,输卵管粘膜细胞阳性率10.00%;免疫组化法子宫内膜阳性率20.00%,输卵管粘膜细胞阳性率6.67%。结论人单纯疱疹病毒2型可沿豚鼠阴道感染子宫颈,上行感染子宫内膜,进而引起输卵管感染,是导致输卵管妊娠的重要原因之一。

单纯疱疹病毒2型DNA提取及ICP10启动子基因获得和纯化

目的用单纯疱疹病毒2型DNA,扩增并纯化得到ICP10启动子基因。方法培养vero细胞并接种HSV-2,获得大量HSV-2。用酚:氯仿提取病毒DNA,用PCR方法获得病毒ICP10启动子基因,并用UNIQ-10柱试剂盒纯化PCR产物。结果接种病毒的vero细胞出现病变,病变为“”,收集细胞,反复冻融3次,使细胞裂解,获得大量HSV-2。经PCR扩增获得641bp大小的目的基因片段。电泳显示片断大小符合。结论获得的ICP10启动子基因,经过测序正确后,可以和其他基因连接,用于进一步研究。

人单纯疱疹病毒-2型感染致豚鼠输卵管上皮细胞凋亡的研究

目的探讨人单纯疱疹病毒-2型感染导致输卵管妊娠的机制。方法培养豚鼠原代输卵管上皮细胞,用人单纯疱疹病毒-2型感染,显微镜下观察输卵管上皮细胞的形态学变化,并用Western blot法检测细胞凋亡关键蛋白caspase-3的变化。结果豚鼠原代输卵管上皮细胞被人单纯疱疹病毒-2型感染后,显微镜下观察到典型的细胞凋亡特征,Western blot检测发现细胞凋亡关键蛋白caspase-3活化成两个亚基。结论人单纯疱疹病毒-2型感染后引起豚鼠输卵管上皮细胞凋亡,人单纯疱疹病毒-2型感染引起输卵管上皮细胞凋亡是输卵管妊娠的机制之一。

人单纯疱疹病毒加强型绿色荧光蛋白真核表达系统的构建及表达

目的:构建人单纯疱疹病毒2型(HSV-2)加强型绿色荧光蛋白(EGFP)真核表达系统,用于HSV感染的快速诊断。方法:通过PCR扩增HSV-2启动子ICP10目的基因片段,克隆至真核表达载体pEGFP-1,构建重组质粒pICP10-EGFP,脂质体法转染Vero细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞株Vero-ICP10-EGFP。以不同量的HSV-2感染Vero-ICP10-EGFP细胞,分别于感染后6、8和10 h,于倒置荧光显微镜下检测EGFP荧光。同时以人巨细胞病毒和柯萨奇病毒感染Vero-ICP10-EGFP细胞,检测其特异性。结果:构建的重组质粒pICP10-EGFP经DNA测序鉴定,表明重组正确。重组质粒pICP10-EGFP转染Vero细胞后,经G418长期筛选建立稳定转染细胞株Vero-ICP10-EGFP,感染HSV-2后6 h,倒置荧光显微镜下即可检测到EGFP荧光。人巨细胞病毒和柯萨奇病毒感染Vero-ICP10-EGFP细胞后6、10和24 h,均未检测到特异性荧光。结论:成功构建了HSV-EGFP真核表达系统,其具有早期、快速、灵敏等优点,特异性较高,可望用于HSV感染的快速诊断。

多重聚合酶链反应检测人子宫颈常见病原体感染的应用研究

用多重 PCR 方法在同一 PCR 反应体系中同时检测人子宫颈常见病毒 HPV-16、HSV-2、CMV 以及CT 感染,采用快速制备 PCR 模板的方法,整个反应仅需4 h。研究结果总检出率为16/28,各病原体检出率分别是:HPV-16为3/28、HSV-2为6/28、CMV 为4/28和 CT 为6/28,因此,本方法既保持了 PCR 的敏感性和特异性,又是一种简便、快速的诊断技术,可用于人子宫颈感染的临床诊断。

抗病毒药物并不足以控制HSV-2的流行

研究者认为，抗病毒药物阿昔洛韦和伐昔洛韦，即使是大剂量．也不足以使生殖器疱疹的病毒感染人群根除病毒。3项交叉试验显示，确实感染了人单纯疱疹病毒2型（HSV-2）的成人通常没有症状，