核桃楸提取物抑制人卵巢癌细胞HO-8910PM增殖的实验研究

目的研究中药核桃楸提取物对人卵巢癌细胞HO-8910PM增殖能力的影响。方法采用层流分离法提取出核桃楸6种有效成分,分别以10^-8 mg/mL、10^-7 mg/mL、10^-6 mg/mL、10^-5 mg/mL浓度作用于卵巢癌细胞HO-8910PM,并设立空白对照组,以噻唑蓝比色法和形态学观察法检测核桃楸提取物对癌细胞生长的抑制作用。结果核桃楸提取物的6种有效成分结构鉴定分别为a-羟基-四氢萘醌(Y1)、胡桃醌(Y2)、4,8-二羟基萘酚-1-0-β-D-[6′-0-(3″,5″-二甲氧基-4″-羟基苯甲酰基)]葡萄糖苷(Y3)、4,8-二羟基萘酚-β-D-(6′-乙酰氧基葡萄糖苷)(Y4)、4,8-二羟基萘酚-β-D-葡萄糖苷(Y5)、4,5,8-二羟基-ɑ-四氢萘醌-5-0-β-D-[6′-0-(4″-羟基-3″,5″-二甲氧基苯甲酰基)]葡萄糖苷(Y6)。Y1、Y3、Y6这3种药物随着药物浓度的增高和作用时间的延长,对HO-8910PM细胞增殖的抑制率也相应增高,并且Y1、Y3的浓度依赖性明显,Y6的时间依赖性明显且在短时间低浓度组(10^-8 mg/mL)表现出了明显的肿瘤抑制作用;其他药物无规律变化。电镜下观察各药物组HO-8910 PM细胞随着药物浓度的增高和作用时间的延长,细胞出现程序性死亡。结论核桃楸提取物的6种有效成分中,有3种能够抑制人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖,且抑制作用存在剂量、时间依赖性。

福安泰-03对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭能力的影响

应用噻唑蓝法检测从赤魟中分离到的福安泰-03(Fuantai-03,FAT-03)对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM生长的影响;人工重组基底膜检测FAT-03对细胞侵袭能力的影响;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测FAT-03对HO-8910PM细胞分泌MMP-9能力的影响。结果显示,FAT-03(20.0、40.0、60.0μg/ml)作用HO-8910PM细胞24h,对细胞生长的抑制率小于10%,对细胞与纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)和Matrigel粘附的抑制率分别为15.1%、28.0%(P<0.05)、54.1%(P<0.01)和14.7%、34.3%(P<0.05)、40.5%(P<0.01),对细胞迁移的抑制率分别为16.4%、33.8%(P<0.05)和42.6%(P<0.01)。此外,FAT-03显著减少HO8910-PM细胞分泌MMP-9的量,并降低其活性。这些实验事实提示FAT-03能明显抑制HO-8910PM细胞的侵袭能力。

苏拉明对体外培养的人卵巢癌细胞HO-8910PM增殖影响

目的探讨苏拉明对体外培养的人卵巢癌细胞增殖的影响。方法不同浓度苏拉明作用于人卵巢癌细胞株HO-8910PM,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HO-8910PM增殖情况。结果MTT结果显示50、100、200、300、400、500、600μg/mL浓度的苏拉明作用于HO-8910PM细胞96 h的生长抑制率(G I)分别是13.1%、22.6%、35.1%、43.7%、54.3%、64.8%、70.9%,不同时间及不同浓度组吸光光度值A差异有统计学意义(P<0.01)。结论苏拉明以时间及剂量效应方式抑制体外培养的HO-8910PM增殖;提示苏拉明作为HPA抑制剂有望成为转移性卵巢癌联合化疗用药。

藏红花水提取物通过调控ERK、Bcl-2、Bax蛋白表达影响人卵巢癌细胞HO-8910增殖

目的:探讨藏红花水提取物调控ERK、Bcl-2、Bax蛋白表达对人卵巢癌细胞HO-8910增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:以人卵巢癌细胞HO-8910为研究对象,给予不同浓度(0、0.4、0.8、1.0 mg/L)藏红花水提取物进行培养,MTT法检测细胞HO-8910的增殖活力;流式细胞术观察细胞HO-8910的凋亡率;划痕法检测细胞HO-8910的迁移情况;Transwell法检测细胞HO-8910的侵袭情况;Western blot法检测细胞HO-8910的ERK、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:人卵巢癌细胞HO-8910的增殖活力、迁移能力及侵袭能力受藏红花水提取物的影响,随藏红花水提取物剂量增加,人卵巢癌细胞HO-8910的增殖活力、迁移能力及侵袭能力减弱;而人卵巢癌细胞HO-8910的凋亡率则相反,随藏红花水提取物剂量增加,人卵巢癌细胞HO-8910的凋亡率逐渐增加;受藏红花水提取物影响,人卵巢癌细胞HO-8910中ERK、Bcl-2蛋白的表达降低,Bax蛋白的表达增加,且藏红花水提取物剂量越高,ERK、Bcl-2蛋白表达越低,Bax蛋白表达越高。结论:藏红花水提取物能够降低卵巢癌细胞的增殖活力、迁移能力及侵袭能力,并诱导卵巢癌细胞凋亡,这可能是通过调控ERK、Bcl-2、Bax蛋白表达来实现的。

半边旗提取物5F影响高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期的实验研究

目的探讨半边旗提取物5F对人高转移卵巢癌细胞HO8910PM细胞周期的影响及其作用机制。方法以MTT法检测5F对高转移卵巢癌细胞HO8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术分析5F对HO8910PM细胞周期的影响;Westernblot法分析NFκB(P65)、FAK的表达及FAK酪氨酸磷酸化水平。结果不同浓度的5F分别处理细胞24h后,对HO8910PM细胞增殖有明显的抑制作用;流式细胞术分析表明5F使G0/G1期的细胞减少,阻断细胞于G2/M期;同时,5F可使NFκB(P65)的表达下调,上调FAK的表达,并降低FAK酪氨酸磷酸化水平。结论5F对HO8910PM细胞周期的影响与NFκB(P65)表达下调及FAK的表达上调有关。

斑蝥素抑制人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移的体外实验研究

背景与目的:斑蝥素在治疗癌症方面显示出其独特的疗效,已有较多文献证实核因子鄄κB(nuclearfactor鄄kappaB,NF鄄资B)与肿瘤侵袭转移关系密切。本研究旨在观察斑蝥素对人高转移卵巢癌细胞HO鄄8910PM转移相关能力的影响,并探讨其作用机理。方法:MTT法及细胞粘附人工重组基底膜实验检测斑蝥素对HO鄄8910PM细胞的细胞毒作用及粘附能力的影响;用Transwell小室法检测斑蝥素对HO鄄8910PM细胞侵袭能力和趋化运动能力的影响;Westernblot法分析斑蝥素对HO鄄8910PM细胞中NF鄄κB和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的影响。结果:20μmol/L的斑蝥素作用6h对HO鄄8910PM细胞抑制率及体外侵袭、趋化运动和粘附的抑制率分别为(8.4±2.2)%及(38.8±1.7)%、(40.3±5.6)%和(55.1±6.7)%。20μmol/L斑蝥素能明显下调HO鄄8910PM细胞中NF鄄κB和VEGF的表达。结论:斑蝥素能抑制HO鄄8910PM细胞的侵袭、运动和粘附能力。斑蝥素抗肿瘤侵袭转移的作用机制与NF鄄κB和VEGF蛋白的表达下调有关。

半边旗提取物5F对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PMETS-1mRNA和VEGF蛋白表达的影响

目的:研究半边旗提取物5F(以下简称5F)对HO-8910PM细胞内VEGF蛋白及ETS-1mRNA表达的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制.方法:RT-PCR分析ETS-1mRNA的表达;Western blot分析VEGF蛋白的表达.结果:25～100 μmol/L 5F作用HO-8910PM细胞24 h后,明显下调ETS-1mRNA的表达;5F明显下调VEGF蛋白表达水平.结论:5F抗肿瘤侵袭转移能力与ETS-1mRNA和VEGF蛋白的表达有关.

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系HO-8910PM的抑制作用

目的观察参一胶囊(Rg3)对高转移人卵巢癌细胞系HO-8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组:阴性对照组(A组):只加新鲜的全培养液;低浓度组(B组):含10μg.mL-1Rg3培养液;中浓度组(C组):含20μg·mL-1Rg3培养液;高浓度组(D组):含40μg·mL-1Rg3培养液;顺铂阳性对照组(E组):含10μg·mL-1顺铂的培养液;顺铂+Rg3联合用药组(F组):含10μg·mL-1顺铂+20μg·mL-1Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制(CCK-8法)进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO-8910PM细胞有明显的抑制作用,显示了较好的细胞毒活性作用(P<0.05)。Rg3与顺铂联合用药时,细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似,但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用,Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用,这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。

洛伐他汀对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期和增殖的影响

目的探讨洛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期和增殖的影响。方法以MTT法检测洛伐他汀对HO-8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术分析洛伐他汀对HO-8910PM细胞周期的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变。结果洛伐他汀对HO-8910PM细胞增殖有明显的抑制作用,并使G0/G1期细胞增多,G2/M、S期细胞减少,32μmol/L用药48h有指示细胞凋亡的亚G1期"凋亡峰"出现。结论洛伐他汀阻滞HO-8910PM细胞于G0/G1期,并能有效抑制癌细胞的体外增殖,以上作用均有剂量和时间依赖性。

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀(SIM)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM体外增殖的抑制作用。方法MTT法检测SIM对HO-8910PM细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析SIM对细胞周期的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变。结果SIM抑制HO-8910PM细胞的增殖,细胞被阻滞在G0/G1期;荧光染色法显示经SIM作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体。结论SIM在体外能有效地抑制癌细胞的增殖,其作用可能是通过诱导其凋亡产生的。

骨桥蛋白反义寡核苷酸对卵巢癌细胞HO-8910PM体外增殖的实验研究

卵巢癌是死亡率较高的妇科恶性肿瘤之一,因易转移而广泛播散,70%的患者就诊时已属晚期,因此卵巢癌的早期诊断和治疗尤其重要。许多研究提示骨桥蛋白（osteopontin,OPN）很有希望作为卵巢癌新的肿瘤标志物,进而用于卵巢癌的早期诊断和病情预测。骨桥蛋白（OPN）是一种磷酸化糖蛋白,首先由骨骼组织中分离而来,

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移及Ras表达的影响

目的：研究辛伐他汀（SIM）通过抑制法尼基化途径对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移相关能力及Ras信号转导作用的影响。方法：以MTT法、流式细胞技术分析检测SIM对HO-8910PM细胞生长增殖和细胞周期的影响；用Transwell小室法及细胞粘附人工重组基底膜实验检测SIM对HO-8910PM细胞侵袭粘附能力的影响；RT-PCR、Western blot法检测SIM对HO-8910PM细胞Ras、ERK2表达水平的影响；采用7-32P掺人法检测MAPK活性。结果：（1）4～64μmol／L的SIM处理24～72h后，HO-8910PM细胞的生长增殖受到一定的抑制；各给药组内G1期细胞明显增多，G2、S期细胞减少，用药浓度高时有指示细胞凋亡的亚G1期“凋亡峰”出现。以上作用均有浓度一效应和时间依赖关系。（2）SIM能够明显地抑制HO-8910PM细胞的体外趋化运动、侵袭和粘附能力（P〈O．05）。（3）随用药浓度的增高，K-RasmRNA的表达没有明显的变化，细胞膜上Ras蛋白水平逐渐降低，胞浆中Ras蛋白水平逐渐增加，总Ras蛋白的表达变化不大；SIM能明显下调HO-8910PM细胞的ERK2蛋白表达。（4）激酶活性检测结果显示，SIM能明显抑制MAPK活性（P〈O．01）。结论：SIM能抑制人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭、运动和粘附能力。SIM抗肿瘤转移的作用机制与它们抑制某些蛋白（如Ras蛋白）的法尼基化反应有关。SIM能抑制Ras蛋白的法尼基化即抑制它锚定于细胞膜上，抑制了其生物活性，从而影响Ras-MAPK信号转导作用和其下游靶蛋白。

白花蛇舌草对人卵巢癌细胞HO-8910PM恶性生物学行为的影响

目的分析白花蛇舌草对人卵巢癌细胞HO-8910PM恶性生物学行为的影响。方法人卵巢癌细胞HO-8910PM培养,分为空白对照组、白花蛇舌草25 mg/ml组、白花蛇舌草50 mg/ml组及白花蛇舌草100 mg/ml组;分别采用噻唑蓝还原法(MTT法)细胞增殖、流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期、Transwell小室实验检测细胞迁移能力。结果白花蛇舌草100 mg/ml组、50 mg/ml组、25 mg/ml组及空白对照组48 h时的OD值低于24 h时,抑制率则高于24 h时;其中白花蛇舌草100 mg/ml组24 h、48 h时的OD值低于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组、空白对照组,抑制率高于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组;白花蛇舌草100 mg/ml组细胞凋亡率高于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组;白花蛇舌草50 mg/ml组人卵巢癌细胞HO-8910PM细胞凋亡率高于白花蛇舌草25 mg/ml组。白花蛇舌草100 mg/ml组G0/G1期百分比高于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组、空白对照组;G2/M期百分比、S期百分比低于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组、空白对照组;白花蛇舌草100 mg/ml组中穿过小室的细胞数低于白花蛇舌草50 mg/ml组、白花蛇舌草25 mg/ml组、空白对照组(均P<0.05)。结论白花蛇舌草可抑制人卵巢癌细胞HO-8910PM增殖、迁移等恶性生物学行为,阻滞细胞周期,并促进细胞凋亡。

枸杞多糖联合紫杉醇对人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖及凋亡的影响

目的研究枸杞多糖对紫杉醇诱导的人上皮性卵巢癌HO8910PM细胞株的增殖及细胞周期、细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将处于对数生长期人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞分4组:A:阴性对照组;B:阳性对照组紫杉醇(PTX)单药作用组(0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1μg·mL^(-1));C:枸杞多糖(LBP)作用组(50、100、150、200、250、300、350、400μg·mL^(-1));D:LBP及PTX协同作用组(LBP+PTX:50+0.01、100+0.01、50+0.05、100+0.05μg·mL^(-1))。药物干预48h后,采用CCK8检测药物干预后细胞增殖的抑制率;Hochest染色观察HO-8910PM细胞的凋亡形态变化;流式细胞术分析药物作用后对细胞周期、凋亡的影响。结果与阴性对照组比较,LBP、PTX单药作用可见人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖抑制,抑制作用随时间、剂量的增强而增加,LBP作用48h的IC50为280μg·mL^(-1),最低起效浓度为120μg·mL^(-1),在400μg·mL^(-1)时可达到85%细胞抑制,PTX作用48h的IC50为0.005μg·mL^(-1),在0.5μg·mL^(-1)时达到100%细胞抑制。LBP协同PTX作用细胞可见增殖抑制大于单药作用之和,增益作用显著(P<0.05);流式细胞分析结果显示LBP协同PTX作用可致G0/GI期、G2/M期细胞比例增加,细胞凋亡率升高,效果均大于单药作用之和,协同作用对细胞周期抑制、诱导凋亡作用的增益作用显著(P均<0.05)。结论枸杞多糖具有抑制人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖并促进其凋亡的作用,且枸杞多糖明显增益紫杉醇对HO-8910PM增殖抑制及诱导凋亡作用。

逆转录酶抑制剂(AZT)对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞超微结构和增殖的影响

目的研究逆转录酶抑制剂(AZT)对卵巢癌细胞系HO-8910细胞超微结构及增殖的影响。方法应用透射电镜观察AZT作用前后肿瘤细胞超微结构的变化,用MTT分析法对不同浓度AZT作用的卵巢癌HO-8910细胞进行药物敏感实验,并用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果 AZT作用后的HO-8910细胞生长明显受抑制,并有时间依赖关系和剂量依赖关系。形态学超微结构显示细胞器扩张和肿胀,核染色质边集,凝集成块。细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少,并且可测到凋亡峰含量为14.2％。结论 AZT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,因而可为卵巢癌和其它肿瘤的治疗尝试一条新的有效的方法。

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞周期的影响

目的:观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将1×10-7mol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)和1×10-6mol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486分别单用或合用处理HO-8910细胞,采用流式细胞术测定细胞周期,核素掺入半定量RT-PCR检测细胞周期蛋白激酶抑制剂p21/WAF1的表达水平。结果:Dex诱导HO-8910细胞发生G0/G1期停滞,并使p21/WAF1 mRNA表达上调;RU486可逆转Dex引起的p21/WAF1表达的变化。结论:p21/WAF1的表达上调可能参与糖皮质激素引起的HO-8910细胞G0/G1期停滞作用。

RNA干扰survivin对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响

目的探讨RNA干扰survivin基因对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响。方法实验分3个组:siRNA组,采用脂质体法将靶向survivin siRNA荧光真核表达质粒载体pGPU6-GFP-survivin-shRNA转染卵巢癌HO-8910PM细胞;空白对照组,单纯细胞培养;阴性对照组,用表达与survivin序列无同源性的siRNA片段质粒pGPU6-GFP-NC转染细胞。于转染后48 h和72 h,用PI单染法流式细胞术检测各组HO-8910PM细胞周期的变化以及Western blot检测survivin蛋白的表达情况。结果 PI单染流式细胞仪检测细胞周期结果表明,与空白对照组和阴性对照组相比较,2个时间点siRNA组转染后的G0/G1期细胞比例明显增加,而G2/M期细胞比例均下降(P<0.05);Western blot结果证实,siRNA组的HO-8910PM细胞survivin蛋白的表达量明显下调。结论导入survivin基因特异性的siRNA可导致卵巢癌HO-8910PM细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞增殖受阻,且细胞survivin蛋白表达量下降。

辛伐他汀对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞Ras/MAPK/NF-κB通路的影响

目的:研究辛伐他汀(SIM)对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞Ras信号通路的影响。方法:不同浓度SIM分别作用HO-8910PM细胞48 h后,采用RT-PCR分别检测Ras、HIF-1α、NF-κB(P65)、Rho A和VEGF m RNA的表达,Western blot分别检测Ras、ERK2、-κBα、NF-κB(p65)、HIF-1α和VEGF的蛋白水平,γ-^(32)P掺入法检测MAPK活性。结果 :SIM能使NF-κB(p65)、VEGF和RHo A m RNA表达降低,影响Ras蛋白在胞浆和胞膜间的分布,下调ERK2、HIF-1α、VEGF蛋白表达,并抑制活化的NF-κB往核内易位。结论:SIM抗卵巢癌机制与抑制Ras/MAPK信号传导及其与NF-κB通路间的交叉通讯密切相关。

抑瘤一号方对HO-8910人卵巢癌细胞细胞活力及MMP-2、MMP-9mRNA表达的影响

目的:观察抑瘤一号方对HO-8910人卵巢癌细胞增殖及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9mRNA表达的影响,从而为其抑制卵巢癌进展提供依据。方法:在体外用不同浓度(0%、5%、15%、20%)抑瘤一号方含药血清处理HO-8910人卵巢癌细胞后,检测细胞活力及细胞内MMP-2、MMP-9m RNA表达。结果:空白组HO-8910人卵巢癌细胞胞体相对光滑,核膜尚完整,细胞器正常,染色质呈现均匀;抑瘤一号方含药血清处理后的HO-8910人卵巢癌细胞胞体发生皱缩,胞质可见多发空泡形成,核染色质出现固缩,形成多个团块状,或边界较分明的类似新月形小体,凋亡特征明显。作用12、24h后,5%、10%组细胞活力与同期空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05);作用48h后,5%组与空白组、5%组与10%组细胞活力比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力均低于同期空白组,且15%、20%组均低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05);作用72h后,5%组与空白组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组细胞活力均低于同期空白组、5%组,且15%、20%组细胞活力均低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05)。5%组、空白组MMP-2mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10%、15%、20%组MMP-2mRNA表达水平均低于空白组,且15%、20%组均低于5%组,20%组低于10%组,差异均有统计学意义(P<0.05);空白组、5%组、10%组MMP-9mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);15%、20%组MMP-9mRNA表达水平均低于空白组和5%组,20%组低于10%、15%组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:抑瘤一号方在体外能明显降低HO-8910人卵巢癌细胞活力,抑制肿瘤细胞基质金属蛋白酶的表达。