酒精对人原代培养肝细胞的氧化损伤与CYP 2E1关系的研究

目的 研究急性酒精暴露下对人原代培养肝细胞中CYP 2E1依赖的毒性作用和氧化损伤。方法 分离培养人原代肝细胞 ,以 2 5～ 10 0mmol L乙醇作用于人原代肝细胞 9h及 10 0mmol L乙醇作用于人原代肝细胞 0～ 2 4h后 ,检测人原代肝细胞中CYP 2E1的含量 ,并研究 10 0mmol L乙醇作用于人原代肝细胞 0～ 2 4h后 ,天冬氨酸转胺酶 (aspartatetransaminase ,AST)的释放量及肝细胞中谷胱甘肽 (Glutathione ,GSH)、丙二醛 (Malondialdehyde ,MDA)的含量。结果 急性酒精暴露导致人原代肝细胞中CYP 2E1的释放增加 ,并呈明显的剂量效应和时间效应关系 ;在 10 0mmol L乙醇作用下 ,AST和MDA明显升高 ,在 0～ 2 4h内呈明显的时间效应关系 ,而GSH含量在 6h后明显降低。结论 10 0mmol L乙醇急性暴露可导致人原代培养肝细胞明显的氧化损伤 ,这种损伤与CYP 2E1活性的变化直接相关。

急性乙醇暴露对人原代培养肝细胞的氧化损伤

目的 研究急性乙醇暴露下人原代培养肝细胞的氧化损伤。方法 分离培养人原代肝细胞 ,以 2 5～ 10 0mmol/L乙醇作用于人原代肝细胞 9h及 10 0mmol/L乙醇作用于人原代肝细胞 0～ 2 4h后 ,分别检测人原代肝细胞上清液中天冬氨酸氨基转移酶 (aspartatetransaminase ,AST)、乳酸脱氢酶 (lactatedehydrogenate ,LDH)的释放量及肝细胞中谷胱甘肽(Glutathione ,GSH)、丙二醛 (Malondialdehyde ,MDA)和Fe2 + 的含量。结果 急性乙醇暴露导致人原代肝细胞上清液中AST、LDH的释放增加 ,并呈明显的剂量 效应和时间 效应关系 ;在 10 0mmol/L乙醇作用下 ,人原代肝细胞上清液中Fe2 + 和MDA含量明显升高 ,在 0～ 2 4h内呈明显的时间 效应关系 [Fe2 + 对照组 :( 60 5 0± 4 2 ) μmol/mgprot ,2 4h( 188 81± 9 6)μmol/mgprot;MDA对照组 :( 3 6 3 7± 3 64 )nmol/mgprot ,2 4h( 72 11± 3 2 6)nmol/mgprot] ,而GSH[对照组 :( 7 5 2± 0 2 9) ,2 4h( 0 5 0± 0 5 1)nmol/mgprot]含量在 0～ 1h内先升高 ,随后明显降低 ,差异有非常显著性。结论 10