红参中原人参三醇型皂苷组在肠道菌群中体外转化及对肠道菌群的作用

采用高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术(UPLC-QQQ MS)对红参中原人参三醇型皂苷组在人肠道菌群中体外代谢转化产物进行定性定量分析,并应用16S rDNA高通量测序技术分析原人参三醇型皂苷组对人肠道菌群多样性的影响。RRLC-Q-TOF MS采用Supelco Ascentis Express C18色谱柱(50 mm×3.0 mm×2.7μm),UPLC-QQQ-MS/MS采用Thermo Syncronis-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.7μm),均以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱分析均采用电喷雾负离子模式采集。原人参三醇型皂苷组中的人参皂苷Re、Rg1在人肠道菌群孵育后,RRLC-Q-TOF MS通过对照品比对及高分辨质谱数据解析分析转化产物为Rg2、Rh1、F1和PPT。UPLC-QQQ MS定量分析代谢产物的转化率,在代谢转化第60 h时,产物Rg2、Rh1、F1、PPT的生成率为6%、12%、11%和56%。应用Illumina Hiseq 2500平台对粪便样本肠道菌群进行基因测序,与空白组粪便比较,原人参三醇型皂苷组在门水平上显著增加Firmicutes相对丰度,显著降低Bacteroidetes、Proteobacteria相对丰度;在属水平上Prevotella9、Faecalibacterium、Dialister相对丰度显著增加,显著降低Escherichia-Shigella、Dorea、Lachnoclostridium相对丰度。该研究为基于肠道菌群对原人参三醇型皂苷药效物质基础的确定和药效作用靶点提供依据。

基于HPLC-ESI-MS^n的杂多酸化学转化原人参三醇型皂苷Re,20(S)-Rf研究

采用高效液相色谱-电喷雾-多级串联质谱技术(HPLC-ESI-MSn)定性分析Keggin型杂多酸(12-磷钨酸)化学转化原人参三醇型皂苷Re和20(S)-Rf的产物结构。在负离子模式下,结合化合物的保留时间、碎片离子的质荷比、中性丢失以及人参皂苷同分异构体的极性差异,分析鉴定了Re的8种主要转化产物为20(S)-Rf2、20(R)-Rf2、20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、25-OH-Rg6、25-OH-Rg4、Rg6和Rg4;20(S)-Rf的7种主要转化产物为20(R)-Rf、20(S)-Rf3、20(R)-Rf3、25-OH-Rg8、25-OH-Rg9、Rg8和Rg9。并通过化学转化方法获得了苷元结构3β,12β,25-三羟基-达玛烷-20(21/22)-烯(3β,12β,25-trihydroxy-dammar-20(22)-ene)。12-磷钨酸显示出良好的Re和20(S)-Rf转化率,在90min和4h内的转化率接近100%。该方法可以快速有效地鉴定人参皂苷结构并区分其同分异构体,能够为杂多酸等固体酸催化剂应用于皂苷类中药有效成分的化学转化研究奠定基础。

通过RRLC-Q-TOF MS和UPLC-QQQ MS分析原人参三醇型皂苷在人肠道菌群中的代谢产物

通过高分离度快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)法对原人参三醇型皂苷Re、Rg 1、Rg 2、Rh 1、Rf、F 1、R 1在人肠道菌群中的转化产物进行定性、定量分析,确定原人参三醇型皂苷的代谢产物、转化途径和60 h时的转化率。结果表明,人参皂苷Re的转化产物为人参皂苷Rg 1、Rg 2、Rh 1、F 1和PPT,转化率为91%;人参皂苷Rg 1的转化产物为人参皂苷Rh 1、F 1和PPT,转化率为80%;人参皂苷Rg 2的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为73%;人参皂苷Rh 1和F 1主要通过PPT代谢,转化率分别为82%和81%;人参皂苷Rf的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为89%;三七皂苷R 1的转化产物为人参皂苷Rg 1、R 2、Rh 1和PPT,转化率为79%。原人参三醇型皂苷类成分可被人肠道菌群代谢,主要通过丢失糖残基形成转化产物,而次级皂苷和苷元是人参在体内发挥药理作用的物质基础。

人参三醇型皂苷研究进展

人参三醇型皂苷(Protopanaxatriol,简称PPT)是人参属植物中含量较高的一类,成分主要包括Rg1、Rg2、Re、Rh1、Rf等,其中人参皂苷Re、Rg1的天然含量最高,在人参茎和叶总皂苷中三醇型皂苷(Re、Rg1)分别为51.5%和48.2%。目前,人们已经对PPT及其成分的药理作用和相关制备方法进行了广泛的研究,其在抗癌、抗肿瘤等方面有相当意义。正文对人参三醇型皂苷相关方面研究进行综述。

人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物与人参皂苷的增强记忆活性对比

通过建立3种损伤性拟痴呆模型,即东莨菪碱致胆碱能损伤拟痴呆小鼠模型、40%乙醇损伤拟痴呆小鼠模型、氯霉素注射致痴呆小鼠模型,每日给予小鼠受试药物,通过跳台试验和被动回避试验对小鼠进行行为学检测,并对小鼠脑内胆碱能含量进行检测,对比人参三醇型皂苷的黑根霉发酵产物和部分人参皂苷的增强记忆活性。结果表明:人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物3种损伤模型中均显示出增强记忆活性,且与对照组相比差异显著。人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物组和人参皂苷Rg1组小鼠脑内乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性明显高于空白对照组(P<0.05),乙酰胆碱酯酶(AchE)活性低于空白对照组(P<0.05),说明人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物不仅能降低AchE活性,而且能增强ChAT活性,并且此活性与小鼠脑内的胆碱能系统具有一定关系。

二醇型、三醇型人参皂苷对白菜白斑菌和菜豆菌核菌的影响

为了探讨人参二醇型、三醇型皂苷对白菜白斑菌和菜豆菌核菌的影响,本文采用菌丝生长率法和孢子萌发实验研究人参二醇型、三醇型皂苷对2种病原菌的影响。结果表明:不同质量浓度的人参二醇组皂苷和三醇组皂苷对白菜白斑菌、菜豆菌核菌的影响结果大致相同,在培养初期(24 h)均表现出一定的促进效果,且低质量浓度处理尤其明显;随着培养时间增加,各处理按照质量浓度高低的顺序先后表现出不同程度的抑制作用,并且抑制效果逐渐增强;所有处理中的高质量浓度人参皂苷对病原菌生长的抑制作用最为显著;不同质量浓度的人参二醇组皂苷和三醇组皂苷对2种病原菌孢子或菌核萌发的作用总体上呈低促高抑,且与皂苷质量浓度关系密切。可见,高质量浓度的人参三醇型皂苷有防治白菜白斑菌流行的潜力,而高质量浓度的人参二醇型皂苷有防治菜豆菌核菌流行的潜力。

人参茎叶中原二醇型、原三醇型人参皂苷抗疲劳作用试验

为了探讨二醇型人参茎叶总皂苷(PPD-Gsls)和三醇型人参茎叶总皂苷(PPT-Gsls)对小鼠的抗疲劳作用,将小鼠(雄性)随机分为空白对照组、阳性对照组、PPD-Gsls和PPT-Gsls低剂量组10 mg/kg·bw·d、PPD-Gsls和PPT-Gsls中剂量组20 mg/kg·bw·d、PPD-Gsls和PPT-Gsls高剂量组40 mg/kg·bw·d,通过负重游泳试验进行抗疲劳作用研究,分别测定小鼠的体重、力竭游泳时间、肌糖原、肝糖原、乳酸脱氢酶(LDH)、血乳酸(LD)等指标,分析PPD-Gsls和PPT-Gsls抗疲劳的功效。结果显示:PPD-Gsls和PPT-Gsls可延长小鼠的力竭游泳时间、提高肌糖原和肝糖原含量、降低血清中LD含量及提高LDH活力。表明PPD-Gsls和PPT-Gsls均具有抗疲劳作用。

人参皂苷的微生物转化研究进展

研究表明人参稀有皂苷具有很强的生物活性,为获得稀有人参皂苷的各种研究越来越多,而生物转化法制备稀有人参皂苷已成为一条重要途径。本文对产稀有人参皂苷微生物转化的方法最新研究进展进行了简要的综述,并简要展望了人参皂苷生物转化研究的前景。

一锅法制备三降达玛烷型三萜

三七原人参三醇型总皂苷用琼斯试剂氧化,"一锅法"得到一个三降达玛烷三萜。