人参单体皂甙Rh_2对体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M抑制效应的研究

目的 :探讨人参单体皂甙 Rh2 对体外培养的 PC- 3M细胞株的抗肿瘤效应。方法 :采用 MTT实验及 3 H- Td R掺入实验观察 Rh2 对 PC- 3M细胞生长状态及细胞 DNA合成的影响。结果 :高剂量 Rh2可明显抑制 PC- 3M细胞的生长 ,细胞 DNA合成减慢 ,并呈剂量依赖性。结论 :Rh2 对 PC-

人参单体皂甙Rh_2增强顺铂对PC-3M致凋亡效应的研究

目的 :探讨人参单体皂甙Rh2 与顺铂 (DDP)联合应用对前列腺癌细胞株PC - 3M细胞凋亡的影响。方法 :应用MTT实验检测细胞生长抑制率 ,NP - 4 0快速分离片段化DNA电泳、流式细胞计量术观察PC - 3M细胞凋亡的变化。结果 :15 0mg/LRh2 与 0 4mg/LDDP联合给药 :①可使 0 4mg/LDDP的肿瘤细胞生长抑制率由2 5 0 %提高到 6 1 0 % ,增加了 1 4 4倍 ;②凋亡片段化DNA电泳检测显示较二者单独给药时更明显的DNA凋亡梯形电泳带 ;③可使 0 4mg/LDDP诱导PC - 3M细胞凋亡率从 0 3%提高到 5 2 2 % ,相当于其 10倍剂量 4 0mg/LDDP的诱导凋亡效应 ( 5 7 4 % ) ,明显高于Rh2 单独应用的凋亡率 13 6 % (P <0 0 1)。结论 :Rh2 能显著增强DDP对PC

人参单体皂甙Rh_2对前列腺癌细胞株PC-3M细胞移行周期的影响

目的 :探讨Rh2 对体外培养的PC - 3M细胞移行周期的影响。方法 :应用 [3 H]-TdR掺入法和流式细胞仪测定DNA含量及进行细胞周期的分析。结果 :PC - 3M细胞的 [3 H]-TdR掺入量明显少于对照组 (P <0 0 1) ;流式细胞仪测定G1期细胞数百分比明显高于对照组。结论 :Rh2 可使PC - 3M细胞增殖周期阻滞在G1期 ,肿瘤细胞增殖减慢。

人参单体皂甙Rh_2对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞免疫活性的影响

目的:探讨人参单体皂甙Rh2(G-Rh2)对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)分泌细胞毒效应分子的影响。方法:采用ELISA法和酶法分别检测35例非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液及其AM培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和NO浓度,并分别用干扰素-α(IFN-α)、G-Rh2以及两药联合干预AM培养,检测其上清液中TNF-α和NO变化情况。结果:所有非小细胞肺癌患者其AM均可产生一定量的TNF-α和NO;非小细胞肺癌患者荷瘤侧肺NO和TNF-α活性在肺泡灌洗液及AM培养上清液中均明显低于非荷瘤侧肺。G-Rh2干预下AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度较对照组明显升高(P<0.05);与TNF-α干预AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。G-Rh2和TNF-α联合干预时AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度明显大于TNF-α或G-Rh2单独干预(P<0.01)。结论:G-Rh2能促进非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞分泌细胞毒效应分子,联合干扰素时其作用更显著,两者具有协同性。

人参皂甙单体Rh_2对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的观察人参皂甙单体Rh2(GS-Rh2)对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法用GS-Rh2处理人脑胶质瘤U251细胞,采用MTT法检测U251细胞增殖抑制率,流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双染法观察U251细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测U251细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测U251细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达。结果 5、10、20、40、80μg/ml GS-Rh2组U251细胞增殖抑制率分别为20.42%、32.19%、45.09%、57.37%、73.82%。根据细胞增殖抑制曲线计算出IC30、IC50、IC70值分别为9.7、25.2、68.4μg/ml。FITC和PI荧光双参数点图显示实验组细胞分布区域与对照组相比出现明显改变,随着药物浓度的增加,早期凋亡、晚期凋亡或坏死的区域细胞数量逐渐增多。9.7、25.2、68.4μg/ml GS-Rh2处理12、24、48、72 h后U251细胞端粒酶活性随GS-Rh2浓度增加和作用时间的延长而降低。浓度为25.2μg/ml GS-Rh2作用24、48、72 h的U251细胞hTERTmRNA与β-actin灰度值比为0.964 9±0.004 2、0.401 8±0.001 4、0.297 8±0.001 8,对照组为0.976 4±0.005 1。作用48、72 h U251细胞hTERT mRNA与β-actin灰度值比与对照组相比P均<0.05;作用48、72 h者相比P<0.05。结论 GS-Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞凋亡,抑制U25l细胞增殖。其机制与其抑制hTERT基因表达,降低端粒酶活性有关。

人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究

目的 探讨人参单体皂甙Rh2对体外培养的人喉癌细胞株Hep - 2的抗增殖作用及其作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)实验、流式细胞技术及免疫组织化学S -ABC法分别检测人参单体皂甙Rh2对喉癌细胞株Hep - 2的增殖、细胞周期的影响。 结果 (1)人参单体皂甙Rh2可明显抑制Hep - 2细胞的生长 ,并呈剂量、时间依赖性作用。 (2 )人参单体皂甙Rh2 (30 μg/ml)处理细胞 2 4h :G1期细胞由 6 0 0 9%增加至6 8 86 % (P <0 0 1) ,S期细胞由 18 89%减少至 12 30 % (P <0 0 1) ,G2 /M期细胞及凋亡细胞无明显变化 (P>0 0 5 ) ,细胞阻滞于G1期。结论 人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep - 2具有明显的生长抑制作用 ,并可导致其G1期细胞周期阻滞。

人参皂甙Rh_2诱导C_6胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的:观察不同浓度人参皂甙Rh2(G-Rh2)对C6胶质瘤细胞的诱导凋亡作用,并在分子水平探讨其作用机理。方法:细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞的DNA组织含量变化,电镜下观察细胞的超微结构改变。结果:1)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L对C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用,且呈明显量效关系;2)流式细胞术分析经G-Rh2作用72h的C6胶质瘤细胞的DNA组织直方图提示有凋亡发生;3)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L可使G0/G1期细胞比率下降(P<0.05,P<0.01),S期细胞比率明显升高(P<0.05,P<0.01),而G2/M期细胞相对稳定(P>0.05);4)电镜结果提示经4μmol/LG-Rh2作用72h的C6细胞呈典型的凋亡形态学改变。结论:G-Rh2对C6胶质瘤细胞有诱导凋亡作用,呈剂量依赖性抑制C6胶质瘤细胞增殖,对脑胶质瘤的治疗有重要意义。

人参皂甙Rh_2抗乳腺癌细胞细胞侵袭和转移的实验研究

目的观察人参皂甙Rh2对人乳腺癌MCF7/Adr细胞侵袭和迁移的作用及其机制。方法用MTT比色法,检测人参皂甙Rh2(Rh2)对MCF7/Adr细胞的活力;Transwell小室测定其侵袭力和迁移力;Western blot法检测细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9和核转录因子KappaB(NF-KB)蛋白水平的变化。结果用人参皂甙Rh2处理后,MCF7/Adr细胞生长受到抑制,且作用呈时效-量效依赖关系;同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;MMP2、MMP9和NF-kB蛋白的表达均明显减弱。结论人参皂甙Rh2能够减弱MCF7/Adr细胞侵袭和转移,其机制可能与降低MMP2、MMP9和NF-kB蛋白表达有关。

人参皂苷单体Rh2抑制人白血病KG1-α细胞增殖并促进其凋亡

目的研究人参皂苷单体Rh2对人白血病细胞KG1-α增殖、凋亡的影响。方法取对数生长期的KG1-α细胞,分别用不同浓度的人参皂苷单体Rb1、Rg1、Rh2诱导,另设空白对照组,阳性对照用阿糖胞苷。运用CCK-8法检测各单体对细胞增殖的影响,筛选出最强作用单体。用筛选出的皂苷单体诱导KG1-α细胞,用annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测人参皂苷单体对细胞凋亡的影响,PI染色流式细胞术检测对细胞周期的影响,Western blot法检测人参皂苷单体处理的KG1-α细胞中P53、P21、cylin D1、cleaved caspase-3的表达。结果 CCK-8实验结果显示人参皂苷Rh2、Rb1、Rg1、阿糖胞苷的IC50分别为(75、207、268、1058)μmol/L;与对照组相比,经人参皂苷Rh2诱导24、48 h后,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术结果表明凋亡率由(5.37±0.02)%,分别增加至(8.37±0.015)%、(33.22±1.67)%(P<0.05);同样处理,细胞周期检测结果显示:G0/G1期由(26.78±3.14)%,分别上升至(29.26±2.31)%、(44.77±2.26)%;S期由(65.43±2.22)%,分别下调至(51.46±0.57)%、(48.29±1.80)%;Western blot结果显示,cleaved-caspase 3、P53和P21在75μmol/L Rh2处理后表达上调,而cyclin D1表达下调。结论人参皂苷Rh2可抑制KG1-α细胞的增殖,促进细胞凋亡。

人参皂甙Rh_2对耐药乳腺癌细胞P-糖蛋白和基质金属蛋白酶及其诱导物表达的影响

目的观察人参皂甙Rh2对人乳腺癌MCF7/Adr细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、基质金属蛋白酶诱导物(extracel-lular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)和基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinases1,MMP1)、MMP2、MMP9表达的影响。方法采用MTT比色法检测药物对MCF7/Adr细胞的毒性作用;流式细胞仪测定细胞内阿霉素(adriamycin,ADM)的荧光强度;Real time RT-PCR和Western blot检测细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9mRNA和蛋白水平的变化。结果 ADM组与对照组相比,ADM能上调细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9蛋白表达;人参皂甙Rh2能抑制ADM对细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9蛋白和mRNA水平的上调作用。结论人参皂甙Rh2可以有效逆转乳腺癌细胞耐药细胞系MCF7/ADM的耐药性。

人参皂苷单体Rh_2促使人脑胶质瘤U251细胞凋亡的实验研究

目的:观察人参皂苷单体Rh2(GS-Rh2)诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡作用,进而探讨其对端粒酶活性的影响和人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的机制。方法:人脑胶质瘤U251细胞经GS-Rh2处理后,采用MTT法检测细胞抑制率,免疫荧光技术观察凋亡小体,流式细胞仪经Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性改变,通过RT-PCR技术检测hTERT基因的表达。结果:GS-Rh2对U251细胞具有抑制作用,呈明显的剂量依赖关系,免疫荧光技术观察到凋亡小体的出现,流式细胞仪检测GS-Rh2引起U251细胞凋亡并与药物浓度存在依赖关系,TRAP-ELISA法发现GS-Rh2可以降低端粒酶活性且呈剂量和时间依赖关系,RT-PCR证实GS-Rh2可降低hTERT基因的表达。结论:人参皂苷单体Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞发生凋亡,并抑制和降低细胞端粒酶活性,经过RT-PCR证实GS-Rh2作用于胶质瘤的分子生物学机制可能与抑制胶质瘤细胞hTERT基因有关,进而诱导细胞发生凋亡。

人参皂甙Rh2抗肿瘤作用机制的研究

恶性肿瘤治疗至今尚无好的方法.传统化疗药因其缺乏特异性的细胞毒性作用,治疗中容易造成正常细胞的损伤,从而引起一系列的并发症.人参皂甙Rh2是人参中提取的天然活性成分,具有很高的抗肿瘤活性,而对正常细胞无毒副作用.文章从人参皂甙Rh2的抗肿瘤作用机制(抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、诱导分化、抑制肿瘤DNA合成、提高荷瘤机体的免疫功能和抑制肿瘤转移、抗肿瘤耐药性增强、其他化疗药物对耐药肿瘤作用)等方面进行研究.

人参单体皂苷Rh_2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡

目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh2处理后,细胞生长明显受抑制,当Rh2浓度为5、15、25和30mg·L^-1时,其生长抑制率分别为12.0%、36.1%、51.2%和69.3%,呈明显的浓度依赖性;吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态;细胞周期G1期前出现凋亡峰,Rh2浓度为15和25mg·L^-1时,细胞凋亡率分别为41.9%和48.9%。结论：5-30mg·L^-1Rh2可诱导RM-1细胞凋亡,其具有明显的抗肿瘤作用。

人参皂甙Rh_2对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导分化作用

背景与目的目前寻找低毒高效的分化诱导剂是肿瘤诱导分化治疗的关键。人参具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物学活性,其主要的活性有效成分人参皂甙Rh2(ginsenosideRh2,G-Rh2)具有较强的抗癌活性,但其抗肿瘤机制还不十分清楚。因此,本研究探讨G-Rh2对人肝癌细胞株SMMC-7721的生长抑制作用及抗癌机制。方法以MTT法、光镜、电子显微镜观察G-Rh2对SMMC-7721细胞增殖、形态、超微结构的影响。用免疫组化染色和ELISA法检测细胞浆中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)合成情况,酶促反应试剂盒检测细胞浆中碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)活性,放射免疫法检测细胞AFP和白蛋白(albumin,Alb)分泌量,并观察G-Rh2对以上指标的影响。结果G-Rh2以时间依赖性和浓度依赖性抑制SMMC-7721细胞增殖,10μg/mlG-Rh2作用6天抑制率达50%;而20μg/mlG-Rh2作用4天抑制率近50%。经20μg/mlG-Rh2作用4天,肝癌细胞形态及亚细胞结构向正常肝细胞方向逆转。10μg/ml、20μg/mlG-Rh2作用SMMC-7721细胞后,AFP合成明显下降(P<0.05),分泌量从6.60±0.30下降到2.35±0.06(P<0.01);γ-GT及耐热型ALP活性显著降低(P<0.01);ALP活性及Alb分泌量显著升高(P<0.01)。

人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤血管内皮生长因子C及淋巴管生成的影响

目的观察人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤生长,肿瘤细胞血管内皮生长因子C（VEGF-C）表达和淋巴管密度的影响,探讨其作用机制。方法用S180瘤株构建55只小鼠移植瘤模型,成瘤后灌服人参皂甙Rh2,观察用药组与对照组移植瘤的生长情况,免疫组织化学染色,比较用药2周、3周后癌细胞VEGF-C的表达及LYVE-1标记的淋巴管密度与对照组的差异。结果接种约第3周开始,对照组移植瘤生长速度明显快于用药组。用药第2周癌细胞VEGF-C表达及淋巴管密度与对照组无差异;第3周VEGF-C表达较对照组弱,淋巴管密度也较对照组低,有差异（P〈0.05）。结论人参皂甙Rh2能抑制肿瘤生长,降低淋巴管密度,其机制可能是通过降低VEGF-C在癌细胞的表达,干扰淋巴管的生成。

端粒酶在人参皂甙Rh_2诱导肝癌细胞分化中的作用

背景与目的:最近我们研究发现,终浓度为20μg/ml的人参皂甙单体Rh2(ginsenosideRh2,G-Rh2)对人肝癌细胞株SMMC-7721有诱导分化作用,但其作用机制有待进一步研究。一些研究表明端粒酶再激活可能在细胞的癌变和永生化过程中发挥重要作用。本研究从端粒酶活性调控方面探讨G-Rh2诱导SMMC-7721分化的作用机制。方法:采用TRAP-PCR-ELISA法定量检测20μg/mlG-Rh2处理SMMC-7721细胞后端粒酶活性,RT-PCR法检测细胞内端粒酶催化亚单位(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)和p21mRNA的表达,以流式细胞仪检测药物作用前后细胞周期的改变和细胞内CyclinD1、CyclinE和P16蛋白水平。结果:G-Rh2呈时间依赖性抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性,20μg/mlG-Rh2处理细胞1天后,端粒酶活性从1.105下降到0.765(P<0.01);而作用细胞5天后,活性从1.152下降到0.326(P<0.01)。20μg/mlG-Rh2能抑制细胞hTERTmRNA表达。20μg/mlG-Rh2使G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少;处理细胞24h后,G1期细胞升高最明显,从60.85%增高到78.53%(P<0.01)。20μg/mlG-Rh2可诱导细胞周期抑制因子P16蛋白和p21mRNA的表达,抑制细胞周期正调节因子CyclinD1和CyclinE表达。结论:hTERTmRNA表达水平和细胞周期的进程与端粒酶的活性密切相关。

人参单体皂苷Rh2抑制缺氧条件下人视网膜血管内皮细胞增殖及整合素αvβ3表达的研究

目的探讨人参单体皂苷Rh2对缺氧条件下人视网膜血管内皮细胞生长及整合素(integrin)αvβ3表达的影响。方法建立人视网膜血管内皮细胞缺氧模型,并给予其不同浓度的人参单体皂苷Rh2,应用MTT法观察人参单体皂苷Rh2对人视网膜血管内皮细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测人视网膜血管内皮细胞凋亡的情况;用RT-PCR检测对Integrinαv和β3基因的表达。结果MTT结果显示,缺氧对照组细胞增殖活性明显强于正常对照组(P<0.05);缺氧细胞加用Rh2后的增殖明显受到抑制,与缺氧对照组比差异具有显著性(P<0.05);流式细胞结果显示,加用Rh2后的细胞凋亡率与缺氧对照组比无显著性差异(P>0.05)。RT-PCR结果表明,和正常对照组比,缺氧对照组的细胞Integrinαv和β3基因的表达明显增强,Rh2可显著下调Integrinαv和β3基因表达。结论人参单体皂苷Rh2在缺氧条件下能明显抑制人视网膜血管内皮细胞的生但无明显诱导凋亡的作用。

人参皂甙Rh_2抗肿瘤作用的研究

作为中国传统中药的人参在中药史中占有重要的地位 ,被用于多种古方验方的主药。其主要成分人参皂甙具有多种药理作用 ,其中二醇组皂甙Rh2 为从人参中提取的天然活性成分 ,经现代医学研究证明具有很高的抗肿瘤活性 ,对肿瘤细胞具有分化诱导、增殖抑制、诱导细胞凋亡等作用。

人参皂甙Rh_2致MCF-7/ADM凋亡的实验研究

目的:本实验旨在研究Rh2对肿瘤细胞生长的抑制作用及其机理,以进一步阐述Rh2在抗肿瘤方面的作用。方法:Rh2作用于MCF-7及MCF-7/ADM细胞,应用MTT法确定各组细胞增殖抑制率。流式细胞仪分析Rh2导致MCF-7和MCF-7/ADM细胞坏死及凋亡的作用,及其对细胞周期的影响,并检测Rh2对MCF-7和MCF-7/ADM细胞内Caspase3活性的影响。结果:Rh2可以显著抑制MCF-7和MCF-7/ADM的增殖(P<0.05),并有时间和剂量依赖关系,对MCF-7抑制作用更强。Rh2可以导致MCF-7坏死,通过Caspase途径诱导MCF-7/ADM凋亡(P<0.05),对两种细胞周期的影响也有所不同。结论:人参皂甙Rh2通过不同机制抑制了MCF-7和MCF-7/ADM细胞的增殖,Rh2促进耐药细胞系MCF-7/ADM凋亡的研究结果显示其在抗肿瘤作用方面的独特性。

人参皂甙Rh2联合顺铂对食管癌细胞的杀伤作用

目的:体外观察低剂量人参皂甙Rh2(ginsenoside Rh2,GS-Rh2)对抗肿瘤药顺铂(cisplatin,DDP)杀伤人食管癌细胞株Eca109的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:人食管癌细胞Eca109经培养符合条件后,分别加用0.3μg/ml DDP(A组)、20μmol/ml GS-Rh2(B组)、0.3μg/ml DDP+20μmol/ml GS-Rh2(C组)、对照组(D组)处理48小时。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和死亡率。高效液相色谱检测各组细胞内DDP的药物浓度。蛋白质印迹法检测各组细胞中p53表达。结果:细胞凋亡率和死亡率C组显著高于A、B两组(P<0.05);C组细胞内DDP的药物浓度显著高于A组细胞(P<0.05);C组细胞p53表达水平低于A组(P<0.05)。结论:体外低剂量GS-Rh2能增强DDP对人食管癌细胞Eca109的杀伤作用,其作用机制可能与降低细胞内p53表达有关。