红果人参叶片RNA的提取

提取高质量的RNA是进行人参植物分子生物学研究的必要前提。利用CTAB法、Trizol法、Bizol法和SDS法,从红果人参叶片中提取了总RNA,通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测,结果显示:四种方法得到的纯度都比较高,OD260/OD280值都在1.7～2.0之间;SDS法提取的RNA,凝胶电泳显示28S条带是18S条带亮度两倍,而且无污染,好于其他三种方法。通过RT-PCR,ds cDNA片段条带弥散分布大小在0.2～3.0kb,从而进一步验证了SDS法提取的RNA质量。

均匀设计法优化人参叶片愈伤组织诱导培养基

以人参叶片为试材,MS为基本培养基,采用均匀设计和DPS软件分析的方法,研究了2,4-D、KT、NAA、6-BA等4种不同激素组合对人参愈伤组织诱导的影响,以期筛选出诱导人参叶片愈伤组织的最佳激素组合。结果表明:人参叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2mg·L-1+NAA 0.66mg·L^(-1)+KT 1.0mg·L^(-1)。验证试验表明,在添加最佳激素组合的MS培养基中接种新的叶片外植体,30d后愈伤组织诱导率为93%,单个叶片外植体上愈伤组织小块平均数达1.82.

人参叶片愈伤组织诱导数学模型分析

取人参叶片作为外植体诱导愈伤组织,利用二元二次通用旋转组合设计数学模型筛选植物激素浓度组合,结果表明:2,4-D与KT对人参叶片外植体诱导愈伤组织方程为:Y=0.653 30+0.229 63X1+0.140 85X2-0.130 83X12-0.197 48X22+0.100 00X1X2;叶片诱导愈伤组织最佳培养基为MS附加7 mg·L-12,4-D和0.9 mg·L-1KT,诱导率最高可达80%以上。

均匀设计法优化人参单芽诱导生根培养基

为建立完整的人参组培体系,以人参叶片为外植体,MS为基本培养基,利用2,4-D、KT、NAA3种生长调节剂配制的培养基诱导出愈伤组织,之后利用IBA、6-BA、NAA3种生长调节剂配制的培养基诱导出不定芽,然后采用均匀设计和DPS软件分析的方法,研究了NO3-、NH4+与NAA、KT、IBA、6-BA、IAA、GA36种生长调节剂不同组合配制的培养基对根诱导的影响,以期筛选出诱导人参生根的最佳生长调节剂组合。结果表明:人参愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D2mg/L+KT1mg/L+NAA0.66mg/L+1%琼脂,诱导率为93%;人参不定芽诱导的最佳培养基为MS+IBA3mg/L+6-BA3mg/L+NAA3mg/L+1%琼脂,诱导率为86%;人参根诱导的最佳培养基为NO3-3mg/L+NH4+7mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.1mg/L+IBA8mg/L+6-BA0.125mg/L+IAA0.15mg/L+GA36mg/L+8%琼脂+3%蔗糖,诱导率达95%,接种前不定芽茎粗的平均值为0.15cm,茎长的平均值为2.65cm,生根后茎粗、茎长的平均增长值分别为0.09和0.07cm。且生根后根粗和根长的平均长度分别为0.32和1.03cm。本研究为人参今后的育种工作提供参考依据。

Ocotillone—type Ginsenoside from Leaves of Pannax ginseng

An ocotillone-type ginsenoside,together with 2 known ginsenosids was isolated from leaves of Panax ginseng and identifed as psudoginsenoside-RT5 on the basis of chemical and physicohemical evidences.It has been so far the first example of ocotillone-type ginsenoside disicovered in Panax giunseng and its plausible biotransforrnation athway also discussed.