人参总皂甙对造血生长因子活性及其mRNA表达的影响

目的 探讨人参“补气生血”的现代生物学机理。 方法 采用核酸分子原位杂交和造血生长因子生物活性检测等技术，研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子活性及其ｍ ＲＮＡ表达的影响。 结果 ＴＳＰＧ能显著促进小鼠骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）、腹腔巨噬细胞（ＰＭ）和脾细胞（ＳＰＣ）的粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍ ＲＮＡ的表达，经ＴＳＰＧ诱导制备的ＢＭＳＣ、ＰＭ和ＳＰＣ条件培养上清液含有较高的爆式红系集落刺激活性（ＢＰＡ）、粒－巨噬细胞集落刺激活性（ＧＭ－ＣＳＡ）和巨核细胞集落刺激活性（ＭＫ－ＣＳＡ）。 结论 ＴＳＰＧ促进血细胞生成的机理与其诱导造血生长因子的基因表达有密切关系。

人参总皂甙的耐缺氧效应机理研究

从人参中提取有效成份人参总皂甙(TSPG),测定它对小白鼠密闭缺氧存活时间、血红蛋白含量、小白鼠不同组织中乳酸含量以及L-乳酸脱氢酶活性的影响,分析其耐缺氧效应,为预防或降低高原反应发生率,提高高原部队的战斗力提供科学依据。结果表明:人参总皂甙可以显著延长小鼠的密闭缺氧存活时间,其中以25mg/kg.d剂量效果最好,平均存活时间比对照组延长35.7%。TSPG明显促进小鼠血红蛋白的合成;增加脑、心、肝和肌肉中L-乳酸脱氢酶的活性,减少组织中因缺氧糖酵解造成的乳酸积累。

人参总皂甙抗衰老作用的实验研究

应用衰老模型小鼠对人参总皂甙的抗衰老作用进行了实验研究，结果表明：人参总皂甙能增加衰老模型小鼠的胸腺、肾上腺、睾丸及卵巢等脏器系数并减少衰老模型小鼠的肝脏和脾脏系数，人参总皂甙还能明显提高衰老模型小鼠的海马和血清中的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量，降低其过氧化脂质的代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）含量，以上结果提示人参总皂甙能减少自由基对细胞的损伤，改善衰老模型小鼠的免疫及内分泌等多种功能，具有一定的抗衰老作用。

人参总皂甙诱导造血生长因子生成的实验研究

为探讨人参“补气生血”的现代生物学机理，采用造血祖细胞体外培养，造血生长因子生物活性检测等技术，研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子的诱导生成作用。结果表明，经ＴＳＰＧ诱导分别制备的脾细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞的培养上清对髓系造血祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ）的体外集落增殖均有显著刺激作用。ＴＳＰＧ也能促进脾细胞、成纤维细胞和巨噬细胞分泌ＩＬ－６；刺激脾细胞产生ＩＬ－２。这提示，ＴＳＰＧ可通过诱导造血基质细胞与脾细胞等产生造血生长因子样物质（如ＣＳＦ，ＩＬ，Ｅｐｏ等），进而促进血细胞生成，这或许是人参“补气生血”的生物学机理之一。

人参总皂甙诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究

【目的】观察人参总皂甙(GS)对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。【方法】取成年SD大鼠骨髓细胞,采用密度梯度分离法与贴壁法结合获取MSCs,进行原代培养和克隆培养;采用流式细胞仪检测细胞表面抗原 CD34和CD44以鉴定该法所获细胞是否为MSCs;对传至第8代的MSCs进行分组诱导,分别为GS组(终末浓度为 250 mg／L)、5-氮胞苷(5-aza)组(终末浓度为10μmoL／L)、GS+5-aza组(终末浓度分别为250 mg／L、10μmol／L),每组再分 3个亚组,分别对MSCs进行24、48、72 h诱导,并设空白对照组;采用共聚焦荧光显微镜观察细胞数及阳性细胞数,计算心肌样细胞转化率;采用免疫组化法检测分化的心肌样细胞的特异性蛋白结蛋白(Desmin)和肌钙蛋白(cTnI),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导前后心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β-心肌肌球蛋白重链(β- MHC)的表达。【结果】分离培养后的细胞生长密集,形态呈纺锤状,表面抗原鉴定为CD44表达阳性,表明所获细胞为 MSCs;经GS、5-aza诱导后,MSCs分化成类心肌细胞,3组的心肌样细胞转化率无显著性差异(分别为38％、35％、39％); 免疫组化和RT-PCR检测结果显示Desmin、cTnI和MHC表达均阳性,阳性细胞呈梭形和成纤维细胞样形态,表明MSCs在 GS体外诱导下已向心肌样细胞转化,并具有心肌样细胞的特性。【结论】GS可体外诱导MSCs分化为心肌样细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。

人参总皂甙诱导淋巴细胞表达GM-CSF的实验研究

目的 研究人参总皂甙 (TSPG)对人淋巴细胞表达GM CSF的影响 ,及其与人粒细胞 巨噬细胞系血细胞发生调控的关系。方法 采用造血祖细胞、胸腺细胞和脾细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果 TSPG能显著刺激粒细胞 巨噬细胞系造血祖细胞 (CFU GM)增殖 ;经TSPG诱导制备的胸腺细胞和脾细胞条件培养液富含GM CSF样活性 ;TSPG能显著促进胸腺细胞和脾细胞的GM CSF蛋白和mRNA表达。结论 TSPG可能通过直接和 或间接途径促进淋巴细胞合成和分泌GM CSF ,进而促进CFU

人参总皂甙对人GM-CSF和GM-CSFR表达的调控

为探讨人参调控粒细胞发生的生物学机制,采用造血祖细胞和骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸分子原位杂交、免疫沉淀和蛋白印迹等现代生物学技术,研究人参总皂甙(totalsaponins of Panax ginseng ,TSPG)对人粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)表达的影响。结果:(1)经TSPG(50μg/ml)诱导制备的骨髓基质细胞、胸腺细胞、脾细胞、血管内皮细胞和单核细胞条件培养液可显著提高粒单系造血祖细胞(CFU-GM)的集落产率;(2)经TSPG(50μg/ml)诱导后,上述细胞的GM-CSF蛋白(诱导24 h)和mRNA(诱导12 h)表达显著提高;(3)经TSPG(50μg/ml)诱导24 h骨髓造血细胞的GM-CSFRα蛋白表达增强;(4)经TSPG(50μg/ml)刺激后2min,GM-CSFRα和Shc发生酪氨酸磷酸化,5 min时达高峰,随后去磷酸化。上述结果表明,TSPG可能通过直接和/或间接途径促进淋巴细胞与骨髓基质细胞合成与分泌GM-CSF,诱导骨髓造血细胞表达GM-CSFRα,并刺激GM-CSFRα和Shc的酪氨酸可逆磷酸化,从而通过调控GM-CSF的信号转导过程,促进CFU-GM的增殖。

人参总皂甙对小鼠造血细胞增殖的影响

应用MTT比色分析法证实,人参总皂甙在一定浓度内(3～50μg/ml)能促进小鼠骨髓造血细胞的增殖.应用流式细胞术的研究提示,人参总皂甙能促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期.造血祖细胞体外培养的研究表明,人参总皂甙能促进小鼠多种造血祖细胞的集落形成.综上研究结果提示,人参总皂甙可能通过促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期以及促进造血祖细胞增殖等途径,刺激血细胞的生成,进而发挥其临床“补气生血”作用.

人参总皂甙诱导人内皮细胞和单核细胞表达GM-CSF的实验研究

目的:研究人参总皂甙(TSPG)对人内皮细胞和单核细胞表达粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响,及其与人粒单系血细胞发生调控的关系。方法:采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术,检测内皮细胞和单核细胞中GM-CSF的表达。结果:经TSPG诱导制备的内皮细胞和单核细胞条件培养液中富含GM-CSF样活性,能显著促进人粒单系造血祖细胞的增殖分化;TSPG能显著促进内皮细胞与单核细胞的GM-CSF蛋白和mRNA表达。结论:TSPG可能通过直接和间接途径促进造血诱导微环境中的内皮细胞和单核细胞合成和分泌GM-CSF,进而促进血细胞生成。

人参总皂甙逆转K562/A02细胞对DOX耐药性的研究

目的 :研究人参总皂甙 (Totalsaponinspanaxginseng ,TSPG)对人红白血病耐药细胞系K5 6 2 /A0 2耐药性影响及作用机制。方法 :MTT法测定TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞对阿霉素 (DOX)的药物敏感变化。免疫组化法检测TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1基因产物P -gp及凋亡调控基因产物bcl- 2的表达。RT -PCR法检测TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1mRNA表达。结果 :TSPG能增强DOX对K5 6 2 /A0 2细胞的毒性作用 ,逆转效率与浓度相关。TSPG作用后P - gp表达下降有显著差异 (P <0 .0 1) ,bcl- 2表达变化无显著差异 (P >0 .0 5 )。TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1mRNA表达降低有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :TSPG能部分逆转K5 6 2 /A0 2细胞的耐药性 ,机制主要是下调mdr - 1mRNA表达 ,导致产物P - gp减少 ;与bcl- 2蛋白表达变化无显著相关。

人参总皂甙协同造血生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞扩增与分化的作用

为探讨人参总皂甙(totalsaponins of panaxginseng,TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)扩增与分化的作用,收集人脐血、骨髓细胞并采用StemsepTM干细胞分选系统分离纯化CD34+HSC/HPC,用不同剂量TSPG加入不同组合的造血生长因子进行培养,检测细胞总数、CD34+细胞和CD33+细胞比例及集落形成细胞总数(CFC)、粒系祖细胞(CFU-GM)数量变化。结果显示:10-70μg/mlTSPG均可不同程度地提高脐血细胞总数、CFC数和CD34+细胞数,50μg/ml是最佳刺激浓度,可使细胞总数、CFC数和CD34+细胞数分别增至(2470.5±79.96)×103、(53.96±4.29)×100%和(21.86±3.09)×100%;20μg/ml是液体培养诱导骨髓CD34+细胞向粒系分化的最佳浓度,可使细胞总数、CFU-GM和CD33+细胞分别增至(133.2±9.03)×103、(26.78±1.91)×100%和(16.98±1.73)×100%;甲基纤维素半固体培养检测显示,TSPG(10-50μg/ml)均能提高CD34+细胞形成CFU-GM的集落产率,以TSPG20μg/ml效果最为明显。结论:合适剂量的TSPG能够促进CD34+造血干/祖细胞体外扩增与定向诱导分化。

人参总皂甙对造血生长因子产生的影响

本文应用造血祖细胞体外培养术和白细胞介素（ＩＬ）生物活性检测术，观察经人参总皂甙（ＴＳＰＧ）刺激的小鼠脾细胞、腹腔巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的集落刺激因子（ＣＳＦ）、ＩＬ－２和ＩＬ－６生物活性。结果表明：ＴＳＰＧ刺激组的ＣＳＦ和ＩＬ－６活性均显著高于对照组，ＴＳＰＧ刺激的脾细胞培养上清液的ＩＬ－２活性明显高于对照组，而ＴＳＰＧ刺激的巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的ＩＬ－２活性与对照组无显著性差异。提示ＴＳＰＧ可能通过诱导ＣＳＦ和ＩＬ－６等造血生长因子的产生，从而刺激小鼠血细胞生成，发挥其临床“补气生血”作用。

杂色云芝漆酶用于提取人参总皂甙的研究

采用正交试验,对水浸提取条件、漆酶酶解条件进行了研究。结果表明人参总皂甙最佳提取工艺为:先用漆酶酶解,每克人参加入15ml漆酶粗酶液(92U/ml),在30℃、pH3.5的条件下酶解1.5h,然后水浸提取人参总皂甙。经过漆酶酶解处理后人参总皂甙提取率比水浸提取法提高了70.9%。

人参总皂甙对缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨人参总皂甙对缺血性急性肾功能衰竭肾脏的保护作用.方法 采用钳夹右肾蒂1 h再灌注并切除左肾法制备缺血性急性肾功能衰竭大鼠模型,观察再灌注24h后血清BUN、Scr含量,ET-1、NO水平和肾组织病理改变.结果 治疗组大鼠血清BUN、Scr含量与I/R组比较明显下降并有显著差异(P＜0.05),与对照组无差异(P＞0.05);治疗组血清NO水平与I/R组比较明显提高亦有显著差异(P＜0.05);肾组织病理示:治疗组肾小管病变明显轻于I/R组(P＜0.01).结论 人参总皂甙对缺血性肾功能衰竭肾脏有明显保护作用,其对NO水平的调节可能是这一保护作用的机理之一.

调肝、健脾、补肾治法及人参总皂甙对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量的影响

目的 :观察调肝 (调肝方 )、健脾 (四君子汤 )、补肾 (肾气丸 )治法方药及人参总皂甙对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量的影响。方法 :用OPA高效液相色谱分析法检测下丘脑、海马氨基酸含量。结果 :人参总皂甙组下丘脑Glu明显下降(P <0 .0 5 ) ,健脾组与人参总皂甙组下丘脑Asp水平均明显低于模型组和正常对照组 (P <0 .0 1)。模型组海马Glu明显下降 (P <0 .0 5 )。补肾组、健脾组和人参总皂甙组海马Glu和Asp均明显升高 (P <0 .0 1)。调肝组、健脾组和人参总皂甙组下丘脑GABA和Tau均明显下降 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。补肾组下丘脑GABA明显下降 (P <0 .0 1)。模型组海马Tau明显下降 (P <0 .0 5 )。健脾组、补肾组与人参总皂甙组海马GABA和Tau均有不同程度地升高 (P <0 .0 1)。结论 :调肝治法方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑 ,其作用机制可能与下调基酸水平有关 ;而健脾、补肾治法方药及人参总皂甙的中枢作用部位可能与海马和下丘脑都有密切关系 ,作用机制则与上调氨基酸水平有关。

人参总皂甙体外诱导CD34^+造血干/祖细胞增殖的作用

目的：探讨人参总皂甙(TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞(HSC/HPC)增殖的作用。方法：收集人脐血细胞,采用Stemsep TM干细胞分选系统分离纯化CD34^+HSC/HPC,经不同剂量TSPG加入不同造血生长因子组合进行培养,检测细胞总数、CD34^+细胞及集落形成细胞总数(CFCs)的变化。结果：TSPG 10、20、50和70μg/ml均可不同程度地提高细胞总数、CFCs和CD34^+细胞扩增倍数,TSPG 50μg/ml是最佳刺激浓度,可使细胞总数、CFCs和CD34^+细胞分别增至(2470．50±79．96)倍、(53．96±4．29)倍和(21．86士3．09)倍。结论：合适剂量的TSPG能够促进CD34^+造血干/祖细胞体外增殖。

人参总皂甙诱导人造血基质细胞表达IL-3的实验研究

目的 研究人参总皂甙 (TSPG)对人早期血细胞发生的影响及其机理 ,进一步探讨人参“补气生血”的现代分子生物学机理。 方法 采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子 (HGF)生物活性检测、免疫细胞化学、核酸分子原位杂交技术 ,研究TSPG对造血基质细胞表达白细胞介素 3(IL 3)的影响及其机理。 结果 TSPG体外作用能明显促进人早期髓系多向性造血祖细胞 (CFU Mix)的集落形成 ;经TSPG诱导制备的人骨髓基质细胞 (BMSC)、脐静脉内皮细胞株 (EcV30 4 )、单核细胞株 (THP)条件培养液对CFU Mix的增殖分化有明显促进作用 ;经TSPG诱导后BMSC、EcV30 4、THP细胞内IL 3的蛋白及mRNA表达显著提高。 结论 TSPG能促进人早期血细胞的增殖分化 ,其机理可能与TSPG诱导人造血基质细胞表达IL 3有密切关系。

人参总皂甙诱导人肝癌细胞分化初探

目的 探讨人参总皂甙 (TSPG)对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用。方法 以MTT法 ,光镜 ,电子显微镜和流式细胞仪分析法观察TSPG对人肝癌细胞生长增殖 ,形态 ,超微结构及细胞周期的影响。结果 癌细胞在 4 0 0ug mlTSPG处理后 ,生长受到明显抑制。光镜 ,电子显微镜表明经TSPG作用细胞形态向正常肝细胞方向逆转。流式细胞仪分析发现TSPG使细胞生长阻滞于S期。

人参总皂甙诱导人骨髓基质细胞表达GM-CSF的实验研究

目的 :研究人参总皂甙 (TSPG)对人骨髓基质细胞表达GM -CSF的影响及其与人粒单系血细胞发生的关系。方法 :采用造血祖细胞与骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果 :TSPG能显著刺激粒单系造血祖细胞 (CFU -GM )增殖 ;经TSPG诱导制备的骨髓基质细胞条件培养液富含GM -CSF样活性 ;TSPG能显著促进骨髓基质细胞的GM -CSF蛋白和mRNA表达。结论 :TSPG可能通过直接和 /或间接途径促进造血诱导微环境中的骨髓基质细胞合成和分泌GM -CSF ,进而促进CFU -GM的增殖分化。