人参皂甙Rg3抑制卵巢癌SKOV3细胞生长的机制研究

目的探讨人参皂甙Rg3抑制卵巢癌细胞生长可能存在的分子机制。方法采用细胞克隆实验检测人参皂甙Rg3对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制效果;四氮唑蓝(MTT)比色法、流式凋亡、划痕实验、Transwell实验分别检测人参皂甙Rg3对SKOV3细胞凋亡、侵袭、迁移的影响;qRT-PCR法和Western blot法分别检测Rg3不同浓度作用下卵巢癌细胞中Zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因和蛋白的表达。结果人参皂甙Rg3对SKOV3细胞增殖抑制率升高(P<0.05),凋亡率显著上升(P<0.01),侵袭、迁移能力均显著下降(P<0.01),SKOV3细胞中EZH2的基因和蛋白随着Rg3浓度的增加表达量呈现明显的下降(P<0.01)。结论人参皂甙Rg3可能通过抑制EZH2的表达,促进卵巢癌细胞的凋亡,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭以及迁移的能力,为卵巢癌的临床治疗提供新思路。

人参皂甙-Rg_(3)、-Rb_(3)抗病毒作用的研究

目的 观察人参皂甙 - Rg3、- Rb3抗病毒的活性。方法 在 FL细胞中扩增病毒 ,进行 TCID5 0 滴定 ,采用细胞病变抑制效应 (CPE)的测定法观察药物的抗病毒作用。结果 0 .1 2 5～ 4.0μg/ ml浓度的人参皂甙 - Rg3因浓度不同可以以不同方式抑制 HSV- 1和 Polio V致 CPE发生 ;1 56.2～ 2 50μg/ ml浓度的人参皂甙 - Rb3因浓度不同可以不同方式抑制 HSV- 1和 VSV致 CPE发生。结论 人参皂甙 - Rg3具有抗 HSV- 1和 Poli 活性 ,人参皂甙 - Rb3具有抗 HSV- 1和

人参皂甙Rg3诱导视网膜母细胞瘤HXO-RB_(44)细胞凋亡

目的观察人参皂甙Rg3对体外视网膜母细胞瘤(Rb)HXO-RB44细胞凋亡的作用。方法不同质量浓度的Rg3处理HXO-RB44细胞后,应用MTT比色法分析其细胞生长抑制作用。HOECHST33258染色法观察细胞的形态学改变,流式细胞仪测定48h细胞凋亡率。结果人参皂甙Rg3在一定范围内抑制体外培养的HXO-RB44细胞生长,其抑制率具有时间、质量浓度依赖性(P<0.01)。HOECHST染色可见实验组HXO-RB44细胞中致密强荧光。流式细胞仪检测凋亡率随药物质量浓度增加而增加。结论人参皂甙Rg3主要通过诱导HXO-RB44细胞凋亡达到抑制作用。

人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长和凋亡的影响

目的研究人参皂甙Rg3在体外对低、中分化胃腺癌细胞株MKN-45和SGC-7901生长及凋亡的影响。方法取处于对数生长期的MKN-45和SGC-7901细胞,加入不同终浓度(20、30、40、50μg/mL)的人参皂甙Rg3分别培养24、48h或24、48和72h,以不加药细胞作为阴性对照。MTT法检测MKN-45和SGC-7901细胞生长抑制率;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测SGC-7901细胞凋亡率;流式细胞仪分析SGC-7901细胞周期;透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞的形态学改变。结果人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901和MKN-45细胞生长抑制率均明显高于对照组(P<0.05),且随药物浓度的增加和作用时间的延长而上升(P<0.05)。与对照组比较,人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901细胞凋亡率和G0/G1期细胞百分比均明显上升,且呈浓度和时间依赖性。透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞,可见典型的凋亡细胞结构。结论人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长具有抑制作用,且呈现一定的时效和量效关系,其机制可能与诱导胃癌细胞凋亡有关。

三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh_2和人参皂甙Rg_3

20（R）-ginsenoside-Rh2,ginsenoside-Rg3 and 20（S）-ginsenoside Rg3 were prepared by the hydrolysis of leaf saponins of Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen with solution of 50% acetic acid and then column chromatography on silica gel.Their structures were characterized by spectroscopic analysis,chemical degradation and comparison with authentic samples.

人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜免疫力影响

[目的]观察人参皂甙Rg3对肿瘤化疗肠道黏膜损伤的治疗作用及其黏膜免疫机制。[方法]运用给小鼠原位接种C-26结肠癌并重复灌胃环磷酰胺建立肿瘤化疗肠道黏膜损伤的模型,观察人参皂甙Rg3对瘤重、抑瘤率及PP结面积影响,分离肠上皮内淋巴细胞,固有层淋巴细胞及PP结内的淋巴细胞,用免疫荧光染色及流式细胞仪分析黏膜免疫各部位T淋巴细胞亚群的变化。[结果]环磷酰胺组瘤重显著降低,抑瘤率约为37.6%,而环磷酰胺加Rg3组瘤重与环磷酰胺组比较差异无显著性。荷瘤及环磷酰胺都可显著降低PP结面积,而人参皂甙Rg3可明显减轻环磷酰胺对PP结面积的影响(P<0.01)。人参皂甙Rg3可使荷瘤和环磷酰胺作用下显著减少的固有层淋巴细胞中的CD4+细胞百分比显著增加(P<0.05),但对CD8+细胞百分比无明显影响。[结论]荷瘤及环磷酰胺可明显抑制肠道黏膜免疫功能,而人参皂甙Rg3能明显改善这种黏膜免疫抑制状态。人参皂甙Rg3对黏膜免疫的调节作用是扶正中药发挥作用的重要途径之一。

人参单体皂甙Rh_2对体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M抑制效应的研究

目的 :探讨人参单体皂甙 Rh2 对体外培养的 PC- 3M细胞株的抗肿瘤效应。方法 :采用 MTT实验及 3 H- Td R掺入实验观察 Rh2 对 PC- 3M细胞生长状态及细胞 DNA合成的影响。结果 :高剂量 Rh2可明显抑制 PC- 3M细胞的生长 ,细胞 DNA合成减慢 ,并呈剂量依赖性。结论 :Rh2 对 PC-

20(R)-人参皂甙Rg3对大鼠肝癌细胞的作用

目的 探讨人参皂甙 Rg3对大鼠诱发性肝癌的作用及其机制。方法 建立 SD大鼠诱发性肝癌模型 ,经肿瘤供血动脉灌注不同剂量的 2 0 (R) -人参皂甙 Rg3(0 .375、1.5、6 .0 mg/ kg) ,磁共振成像 (MRI)技术测量治疗前、后肿瘤的体积变化 ,流式细胞仪 (FCM)和免疫组织化学方法检测肿瘤细胞的凋亡、增殖及坏死情况。结果 高剂量组对肿瘤体积的影响与对照组比较 ,其差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ;低、中、高三个治疗组诱导大鼠肝癌细胞的平均凋亡率 (% )分别为 11.0 8± 3.78、13.5 7± 3.34和 2 7.35± 16 .0 4 ,高剂量组较其它组差异显著 ;用药后测得 S期细胞的平均比率 (% )分别为 2 3.98± 9.4 4、19.73± 6 .6 2和 14 .0 9± 3.4 8,治疗组与对照组相比均有显著性差异 ,且药物剂量与其对肿瘤细胞的抑制作用呈正相关。高剂量组中增殖细胞核抗原 (PCNA)与肿瘤坏死因子 (TNF)的表达与对照组相比差异有显著性 ;治疗组组间 PCNA与 TNF的表达差异不显著。结论 经肿瘤供血动脉灌注人参皂甙 Rg3能明显的抑制肿瘤细胞增殖、有效的诱导肿瘤细胞凋亡、促进肿瘤组织坏死 ,并有剂量依赖性。

20(R)-人参皂甙Rg3对K562/ADM细胞凋亡诱导的研究

目的 :探讨抗癌药物 2 0 (R) -人参皂甙Rg3(2 0 (R) -GinsenosideRg3)对肿瘤细胞凋亡的诱导。方法 :采用人红白血病耐阿霉素 (adriamycin ,ADM)细胞株K5 6 2 /ADM细胞作为实验模型 ,用ADM作阳性对照。结果 :MTT法细胞毒实验显示 ,Rg3对K5 6 2 /ADM细胞的IC 5 0为 10 4 9± 0 30 μg/ml;流式细胞仪法测定该细胞与浓度为 1 0 μg/ml(无毒剂量 )和 5 0 μg/ml(低毒剂量 )的Rg3共同培养 4 8h的细胞凋亡率分别为 3 39± 0 2 5 %和 9 36± 0 6 1% ;电镜下 ,可见凋亡的K5 6 2 /ADM细胞及凋亡小体。结论 :Rg3具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力 ,其诱导强度与其浓度呈正相关 ,对作用时间有依赖性。

人参皂甙Rg3抗小鼠Lewis肺癌的机制研究

目的以小鼠Lewis肺癌为肿瘤模型探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤机制。方法以肺癌细胞系LLC荷瘤C57/BL小鼠建立小鼠肺癌模型,随机分为人参皂甙Rg3组、阳性药顺铂组和模型组,分别给予人参皂甙Rg3、顺铂和生理盐水;同时设立空白对照组。以肿瘤质量、抑瘤率观察人参皂甙Rg3的抗肿瘤效果;以流式细胞术测定脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞数量及比值;以Elispot技术检测机体肿瘤抗原特异性CTL的诱生情况;以肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数判定人参皂甙Rg3的毒副作用。结果人参皂甙Rg3组抑瘤率高于顺铂组,差异具有统计学意义(P<0.05)。生理盐水组小鼠脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞百分率比正常小鼠低,而人参皂甙Rg3组和顺铂组高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05)。人参皂甙Rg3组肿瘤特异性IFN-γ斑点数明显增多,与生理盐水组相比具有统计学差异(P<0.05),顺铂组脾脏无肿瘤特异性IFN-γ斑点出现。和模型组相比较,人参皂甙Rg3组小鼠肝脏、脾脏、胸腺指数无明显差异,而顺铂组的肝脏、脾脏、胸腺指数低于人参皂甙Rg3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LLC细胞荷瘤小鼠具有明显的免疫抑制现象,人参皂甙Rg3可显著增加脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞阳性率并促进肿瘤特异性CTL细胞诱生,人参皂甙Rg3无肝脏、胸腺、脾脏毒性。

PCNA、P16、MMP9在人参皂甙Rg3抗肝癌淋巴道转移中的表达及意义

目的 :通过检测PCNA、P16及MMP 9在人参皂甙Rg3抗荷瘤小鼠淋巴道转移中的表达 ,探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的机制。方法 :建立小鼠肝癌淋巴道转移模型 ,应用免疫组织化学方法检测PCNA、P16及MMP 9在各实验组 (Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3+DDP合用组、DDP阳性对照组和生理盐水阴性对照组 )的原发瘤及相应转移瘤 (淋巴结 )中的表达水平。结果 :应用人参皂甙Rg3组较未用药组 ,PCNA及MMP 9在原发瘤的表达减少 ,P16的表达增加 ,差异显著 (P <0 0 0 1) ;而在转移瘤中的变化不明显。结论 :人参皂甙Rg3抗淋巴道转移作用的机制与上调P16表达及下调PCNA和MMP9表达有关。

20(R)-人参皂甙Rg3对老年肿瘤患者放、化疗后的辅助治疗效果

老年肿瘤患者免疫功能明显降低,放、化疗对机体免疫功能又进一步影响〔1～3〕,因此在老年中晚期肿瘤患者放、化疗常规治疗后,提高其机体的免疫功能,加快疾病恢复,改善其生存质量更为重要。20（R）-人参皂甙Rg3被证明具有显著的抗肿瘤效应〔4〕,且有调节免疫的作用〔5,6〕,

人参皂甙Rg3在小鼠肝癌淋巴结转移模型中诱导细胞凋亡的作用

目的:观察人参皂甙Rg3对小鼠肝癌淋巴结转移模型中肿瘤细胞凋亡的诱导作用,探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤淋巴结转移的机制。方法:建立小鼠肝癌淋巴结转移模型;光镜和透射电镜下观察各组(Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3与顺铂联合治疗组、顺铂治疗组及对照组)中原发瘤及转移瘤组织的形态学结构改变,并通过流式细胞仪分析肿瘤细胞的凋亡。结果:Rg3预防组及治疗组电镜下(5份样品)可见较多细胞凋亡小体的形成(5/5,4/5);顺铂治疗组的形态改变以细胞破坏为主,凋亡的细胞较少;联合治疗组细胞的凋亡和坏死程度相当。流式细胞学检测分析结果为:Rg3预防组、治疗组及联合治疗组均见细胞凋亡的特征峰(5/5),而顺铂治疗组为1/5,对照组未见凋亡峰(0/5)。结论:人参皂甙Rg3抗肿瘤细胞淋巴结转移的作用与诱导细胞凋亡有关。

人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的探讨人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的诱凋亡作用及其对凋亡相关基因survivin的影响。方法人肺鳞癌SK-MES-1细胞分为Rg3实验组、空白对照组和阳性对照组,阳性对照药物为三氧化二砷。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;免疫细胞化学法和RT-PCR法检测survivin蛋白和mRNA的表达。结果不同浓度的人参皂甙Rg3处理SK-MES-1细胞48h后,细胞凋亡率增加,作用呈剂量依赖关系。人参皂甙Rg3能够下调survivin蛋白和mRNA的表达,各实验组与空白对照组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与其抑制survivin基因的表达有关。

人参皂甙Rg3抗鼠源性膀胱癌BBT739黏附、侵袭和肺转移作用的研究

目的研究人参皂甙Rg3对鼠源性膀胱癌细胞系BBT739黏附、侵袭和肺转移的作用。方法应用酶标仪检测不同浓度的人参皂甙Rg3对膀胱癌细胞BBT739体外黏附力的影响;通过癌转移模型,观察不同剂量人参皂甙Rg3对膀胱癌小鼠肺转移的影响;体内侵袭模型通过给予不同剂量人参皂甙Rg3观察18d后癌组织的侵袭情况,病理分级检测相关癌的侵袭阶段。结果人参皂甙Rg3可以明显抑制鼠源性膀胱癌细胞系BBT739体外的黏附(P<0.01)及癌细胞对小鼠肾胞膜下的侵袭过程,抑制小鼠膀胱癌肺转移的发展(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3通过抑制癌细胞的黏附、侵袭和癌组织抑制癌转移的发生。

人参皂甙Rg3诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的实验研究

背景与目的:人参皂甙Rg3[20(R)-GinsenosideRg3]是从红参中提取的微量中药单体。近年研究表明人参皂甙Rg3尚具有抑制肿瘤细胞的增殖、抗肿瘤细胞浸润和转移等作用。肿瘤的发生和发展是一个极其复杂的过程,有多种转移相关的蛋白因子参与,并涉及多种转移途径和分子机制。人参皂甙Rg3抗肿瘤机制的研究为目前中药抗肿瘤研究热点之一。本研究的目的在于探讨Rg3抑制乳腺癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。材料与方法:四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。结果:Rg3与MCF-7细胞生长抑制率之间有浓度依赖关系,相关系数(r)=0.953,Rg3处理细胞48h的IC50为71.91μg/ml;荧光显微镜下观察到经Rg3作用后,MCF-7细胞出现染色质凝集、核片段化、凋亡小体等凋亡形态学特征;流式细胞术检测表明Rg3能诱导细胞凋亡及调节细胞周期,用150μg/ml的Rg3处理细胞48h后,S期和G2-M期的细胞比率增加,G0-G1的细胞比率下降。细胞凋亡率从对照组的(0.45±0.25)%上升到(34.86±4.65)%。DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,服150μg/ml的Rg3处理细胞24h和48h后,能够使细胞产生明显的梯形电泳图谱(DNAladder)。结论:Rg3可通过诱导MCF-7细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。

小剂量化疗联合人参皂甙Rg3抑制小鼠Lewis肺癌血管生成作用实验研究

背景与目的目前发现一些细胞毒性化疗药物小剂量、短间隙、持续给药可表现出明显的抗肿瘤血管生成作用,从而抑制肿瘤生长和转移,被称作“抗肿瘤血管生成化疗(antiangiogenicchemotherapy)”。近来从中药人参中提制的人参皂甙Rg3也被证实具有抑制肿瘤血管生成的作用。本研究的目的是观察小剂量吉西他滨和人参皂甙Rg3联合治疗对小鼠Lewis肺癌血管生成的抑制作用,以及对小鼠生存质量的影响。方法建立小鼠Lewis肺癌模型,分别给予小剂量吉西他滨、人参皂甙Rg3以及二者的联合治疗。利用彩色多谱勒超声、免疫组化技术等观察和比较各治疗组的肿瘤血管生成和肿瘤生长情况。结果人参皂甙Rg3和吉西他滨联合治疗组小鼠有较好的生存质量。彩色超声多谱勒以及免疫组化结果发现联合治疗组比单药治疗组具有更高的肿瘤坏死率和更强的抗肿瘤血管生成作用。结论小剂量吉西他滨与人参皂甙Rg3联合治疗可能具有协同抑制肿瘤血管生成的作用,从而取得协同抗肿瘤效应,同时可维持较好的生存质量。

人参皂甙Rg_3对免疫功能的影响

对人参皂甙Ｒｇ３的免疫功能进行了实验研究，结果表明：人参皂甙Ｒｇ３能明显提高小鼠碳粒廓清速率、免疫器官重量、血清溶血素含量、脾淋巴细胞转化和ＮＫ活性，其结果均具有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明人参皂甙Ｒｇ３具有提高免疫功能的作用。

人参皂甙Rb_1、Rb_3、Rg_1对培养皮层神经细胞的抗缺血效应及其机制

目的 研究人参皂甙 (Ginsenosides,GS)的 3种单体成分GSRb1、Rb3 、Rg1对培养的皮层神经细胞的抗缺血效应及其机制。方法 体外培养小鼠胎鼠大脑皮层神经细胞 ,观察缺血 /再灌注对神经细胞的毒性及GSRb1、Rb3 、Rg1的保护作用。结果 培养的小鼠胎鼠大脑皮层神经细胞缺血 /再灌注损伤后 ,细胞出现明显损伤性变化 ,神经细胞活性降低 ,电镜观察显示神经细胞呈变性至坏死等不同程度的损伤 ,死亡率明显升高 ,培养上清液中乳酸脱氢酶 (LDH)释放量增加 ,而细胞匀浆中超氧化物歧化酶 (SOD)含量明显减少 ,丙二醛 (MDA)生成显著增多。GSRb1、Rb3 、Rg16 0 μmol/L能不同程度地抑制缺血 /再灌注引起的损伤性改变 ,培养上清液中LDH释放减少 ,而细胞匀浆中SOD含量明显增加 ,MDA生成显著降低。结论 (1)GSRb1、Rb3 、Rg1对神经细胞有明显的抗缺血效应 ;(2 )GSRb1、Rb3 、Rg1抗缺血的作用机制可能与其提高神经细胞抗氧化能力、减少自由基的生成 ,保护细胞的结构与功能有关。