人参皂甙-Rh2对Ara-c诱导HL60细胞增殖抑制和凋亡作用的影响

目的探讨人参皂甙单体Rid（GS—Rh2）对阿糖胞苷（Ara—c）抗白血病作用的影响。方法体外培养人髓性白血病细胞株（HL60）并随机分为三组，其中Ara．C组加入终质量浓度分别为5．0-40．0μg／ml的Ara-c，GSRh2组加入终质量浓度为4．0～32．0μg／ml的GS-Rh2，联合组加入终质量浓度为4．0μg／ml的GS—Rh2及上述质量浓度Ara—C。48h后采用MTT法测定三组HL60细胞的增殖抑制率（IR），并计算半数抑制浓度（IC50）、合用指数（CI）、增效倍数及合并效应与期望合并效应的比值（q）；倒置显微镜及常规瑞-吉染色法观察细胞凋亡形态。结果Ara-c组、GSRh2组的IC如分别为32．0、13．0，联合组Ara-c的IC50为14．5μg／L，显著低于Ara-c组（P〈0．001）；联合组CI为0．76，4．0μg／ml GSRh2对Ara—c的增效倍数为2．21，Ara-c质量浓度为5．0、10．0、20．0、40．0μs／ml时的q分别为1．42、1．39、1．36、1．21；联合组细胞凋亡形态较其他两组明显。结论GSRh2可提高HL60细胞对Am-c的敏感性，减少Ara—C的临床用药剂量和毒副作用，加强Ara-c的疗效；此为临床治疗白血病提供了新的思路。

三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh_2和人参皂甙Rg_3

20（R）-ginsenoside-Rh2,ginsenoside-Rg3 and 20（S）-ginsenoside Rg3 were prepared by the hydrolysis of leaf saponins of Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen with solution of 50% acetic acid and then column chromatography on silica gel.Their structures were characterized by spectroscopic analysis,chemical degradation and comparison with authentic samples.

人参皂甙-Rh_2诱导人肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用

目的 研究人参皂甙 -Rh2 (GS -Rh2 )诱导肝癌Bel -740 4细胞凋亡的作用。方法 应用流式细胞术检测GS -Rh2对肝癌Bel -740 4细胞凋亡的诱导作用以及对细胞周期的影响。结果 流式细胞术证实GS -Rh2 具有诱导凋亡作用 ,细胞凋亡率(AR )随GS -Rh2 浓度增高和作用时间延长而升高 ,当GS -Rh2 浓度由 12 .5 μg/ml增至 5 0 .0 μg/ml时 ,AR由 16.2 %升高至2 7.5 % ,但GS -Rh2 浓度由 5 0 .0 μg/ml进一步增至 10 0 .0 μg/ml后 ,AR未见相应升高 ;GS -Rh 2 可将细胞周期阻滞于G1期。结论 GS -Rh2 能诱导体外培养的Bel -740 4细胞凋亡 ;GS -Rh2 诱导Bel -740

人参皂甙-Rh_2对人乳腺癌MCF7/AdrR细胞增殖和凋亡的影响

目的研究人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)对乳腺癌MCF7/AdrR细胞增殖和凋亡的影响。方法以MCF7/AdrR细胞不加药物干预,作为对照组;以Rh2单独作用于MCF7/AdrR细胞,作为Rh2组;以低浓度阿霉素(ADM)单独作用于MCF7/AdrR细胞,作为ADM组;以Rh2和阿霉素联用于MCF7/AdrR细胞,作为Rh2+ADM组。用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的MCF7/AdrR细胞生长的抑制作用;用荧光显微镜观察用药前后MCF7/AdrR细胞的形态学变化;用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化;用Westernblot的方法检测Fas、Bax、Bcl-2及Bcl-xL蛋白表达的变化。结果 MCF7/AdrR细胞经GS-Rh2作用后,生长受抑制,呈剂量和时间依赖性;显微镜显示,经GS-Rh2作用后,MCF7/AdrR细胞呈较明显的凋亡形态学改变,GS-Rh2能将细胞周期阻滞于G0/G1期,同时可能参与促凋亡蛋白Fas、Bax表达升高及抑制凋亡蛋白Bcl-2表达降低;但在GS-Rh2处理前后Bcl-xL无明显变化。结论 GS-Rh2能抑制体外培养的MCF7/AdrR细胞增殖并诱导其凋亡,且这种作用可能是通过上调Fas、Bax表达、下调Bcl-2表达以及阻滞细胞周期而实现。

维甲酸与人参皂甙-Rh_2或半边旗二萜类化合物5F协同诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的观察维甲酸与人参皂甙-Rh2或半边旗二萜类化合物5F协同诱导肝癌细胞凋亡及对Fas蛋白表达的影响。方法体外培养肝癌细胞,设RA、GS-Rh2、5F、RA+GS-Rh2、RA+5F3个实验组和对照组,分别收集其药物作用24和48h后的培养细胞,应用流式细胞仪(FCM)检测肝癌细胞的凋亡率及Fas蛋白的表达。结果肝癌细胞药物作用48h时,RA+GS-Rh2组、RA+5F组与RA组或GS-Rh2组或5F组比较凋亡细胞数和Fas蛋白的表达有显著增高(Р<0.05),但在24h时,RA+GS-Rh2组、RA+5F组与RA组比较"亚G1峰"差异无显著性(Р>0.05)。结论维甲酸与人参皂甙-Rh2或半边旗二萜类化合物5F协同作用可以增强诱导肝癌细胞凋亡,促进Fas蛋白的表达。

人参皂甙单体Rh2诱导髓性白血病细胞株凋亡的时效与量效

目的:已发现人参中某些有效组分能增强和激活机体免疫系统,具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用。选取人髓性白血病细胞株HL60为模型,探讨人参皂甙单体Rh2抑制其增殖和诱导凋亡的时效量效关系。方法:实验于2006-07/08在吉林医药学院临床检验实验室进行。①材料:人参皂甙单体Rh2购自吉林省宏久生物科技股份有限公司,批号050801,溶于pH7.4磷酸盐缓冲液中配成50g/L母液。人髓性白血病细胞株HL60购自中国科学院上海生物细胞研究所。②实验方法:取处于对数生长期的HL60细胞制备3×108L-1细胞悬液,接种后6h分别加入终浓度为5,10,20,40,80mg/L的人参皂甙单体Rh2100μL,于加药48h后采用MTT比色法检测人参皂甙单体Rh2对HL60细胞生长的抑制作用,计算抑制率和半数抑制浓度。选择半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞,分别于作用6,12,24,48,72h后采用MTT比色法测定抑制率,并与未加药对照组进行比较。半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2作用48h时倒置显微镜下观察HL60细胞形态,吉姆萨染色观察细胞凋亡情况。结果:①量效关系:人参皂甙单体Rh2浓度为5,10,20,40mg/L时,处理48h后HL60细胞生长抑制率呈升高趋势(F=9.45,P<0.01),具有明显的剂量依赖性;至80mg/L时抑制率与40mg/L基本相似。加药48h后半数抑制浓度为13.0mg/L。②时效关系:13.0mg/L人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞6,12,24,48,72h后,抑制率逐渐升高(F=9.32,P<0.01),呈时间依赖性。③HL60细胞形态观察:与未加药对照组比较,经13.0mg/L人参皂甙单体Rh2处理后HL60细胞数量明显减少,细胞分散,体积缩小,细胞核呈碎片状。④凋亡细胞吉姆萨染色检测:经13.0mg/L人参皂甙单体Rh2处理后,HL60细胞出现核染色质浓缩、呈周边凝聚,核膜裂解形成凋亡小体、胞质出现空泡但胞膜完整的典型细胞凋亡形态学改变。结论:人参皂甙单体Rh2能有效抑制体外培养HL60细胞的增殖,并诱导其凋亡,干预效果呈时间和剂量依赖。

人参皂甙-R_2对人肝癌Bel-7404细胞增殖和凋亡的影响

目的研究人参皂甙Rh2(GSRh2)对肝癌Bel7404细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法采用MTT比色法观察GSRh2对体外培养的Bel7404细胞生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化;采用免疫组化SP法检测药物处理前后凋亡相关基因产物p53、Bax和Bcl2蛋白表达。结果①MTT比色法测定显示,Bel7404细胞经GSRh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为27.6μgml。②流式细胞仪检测证实,GSRh2能诱导Bel7404细胞凋亡。③当GSRh2浓度由12.5μgml增加至50.0μgml时,细胞凋亡率(AR)依次升高;但GSRh2浓度进一步增加时,AR未见相应升高。④GSRh2可将细胞周期阻滞于G1期。⑤GSRh2处理细胞后,突变型p53表达下调而Bax表达上调,Bcl2在GSRh2处理前后无明显变化。结论①GSRh2能抑制体外培养的Bel7404细胞增殖并诱导其凋亡;②GSRh2诱导Bel7404细胞凋亡可能是通过上调Bax表达、下调突变型p53表达以及阻滞细胞周期而实现。

人参皂甙单体Rh_2对K562细胞增殖和凋亡作用的实验研究

目的研究人参皂甙单体-Rh2(GS-Rh2)对人K562细胞增殖和凋亡作用的影响。方法采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的K562细胞生长的抑制作用;在光学显微镜下观察不同浓度GS-Rh2对K562细胞的凋亡作用及计数凋亡率(AR)。结果MTT比色法测定显示,细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为25.8μg/m l。结论GS-Rh2能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡。

人参抗肿瘤新成分的研究

从人参（Panax ginseng c.A.Meyer）茎叶中分离出一种新成分,经化学及光谱分析鉴定为20（R）-人参皂甙-Rh2。该化合物在浓度为2μg/ml时能明显地抑制人体早幼粒白血病HL-60瘤株。

三七活性成分抗肿瘤作用及其免疫学机制初探

目的通过测定小鼠黑色素瘤(B16)荷瘤小鼠外周血中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)的活性,探讨三七提取活性成分人参皂甙-Rh2(Rh2)、人参皂甙-Rg3(Rg3)抗肿瘤作用及对免疫功能的调节效应。方法将B16肿瘤移植后的小鼠随机分为Rh2大、中、小剂量组,Rh2+Rg3组,Rg3大、中、小剂量组,环磷酰胺(CTX)组以及模型组9组。计算肿瘤抑制率、胸腺指数及脾指数;放免法测定小鼠血清TNF-α、IL-2含量。结果Rh2与Rg3各剂量组均有一定的抑瘤效果,Rh2大剂量组、Rh2中剂量组、Rg3大剂量组以及Rh2+Rg3组与模型组瘤重比较,有统计学意义(P<0.05),其肿瘤抑制率分别为35.5%、30.1%、33.6%与38.6%。与CTX组比较,Rh2、Rg3单用及联合用药均能明显提高外周血中TNF-α、IL-2的含量,以联合用药组最为显著,且能够提高荷瘤小鼠免疫器官重量。结论三七提取活性成分Rh2、Rg3有一定的抗B16、提高免疫功能作用。而且联合用药具有协同增效作用。