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转化人参皂苷菌株的筛选及发酵工艺优化 被引量:1
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作者 王丽娜 李秋阳 +5 位作者 刘士伟 唐金鑫 刘胜楠 杨雯 于雷 毕云枫 《吉林医药学院学报》 2023年第3期161-166,共6页
目的 筛选得到β-葡萄糖苷酶活性较高的食品级菌种发酵人参,以期提高二醇型皂苷转化率,并优化发酵体系,验证发酵过程的可控性。方法 以人参为原料,利用4种常见食品级发酵菌即酿酒酵母菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌和肠膜明串珠菌肠膜亚种... 目的 筛选得到β-葡萄糖苷酶活性较高的食品级菌种发酵人参,以期提高二醇型皂苷转化率,并优化发酵体系,验证发酵过程的可控性。方法 以人参为原料,利用4种常见食品级发酵菌即酿酒酵母菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌和肠膜明串珠菌肠膜亚种发酵人参。通过对菌种代谢产生的β-葡萄糖苷酶酶活力的初筛及二醇型主要人参皂苷转化实验的复筛,最终确定以复合菌(植物乳杆菌+肠膜明串珠菌)作为人参发酵菌株。设置液料比、接菌量、发酵天数的单因素试验,利用响应面法优化人参发酵体系。结果 优化后的最佳发酵条件为液料比2∶1(mL/g)、接菌量为4%、发酵天数为23 d。在最佳工艺下,得到二醇型人参皂苷(Rb1+Rb2+Rb3+Rc)转化率为62.17%。结论 筛选得到的发酵菌株可以更好地将人参中二醇型主要皂苷转化为药理功效更强的次级皂苷,并优化了发酵体系,达到了经济、安全、高效的目的,极大地提高了人参的应用价值。 展开更多
关键词 人参 发酵 人参皂苷转化 Β-葡萄糖
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重组β-木糖苷酶转化人参皂苷Rb3及C-Mx 被引量:2
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作者 朱铃 王雨辰 +3 位作者 赵江源 文孟良 李铭刚 韩秀林 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1010-1017,共8页
从Aspergillus niger NG1306菌株中扩增得到β-木糖苷酶基因anxyl,与pPICZαA连接构建了表达载体pPICZαA-anxyl,进一步在毕赤酵母KM71H中诱导表达获得了目的酶蛋白重组β-木糖苷酶(Anxyl);并将其用于人参皂苷Rb 3及C-Mx的生物转化及催... 从Aspergillus niger NG1306菌株中扩增得到β-木糖苷酶基因anxyl,与pPICZαA连接构建了表达载体pPICZαA-anxyl,进一步在毕赤酵母KM71H中诱导表达获得了目的酶蛋白重组β-木糖苷酶(Anxyl);并将其用于人参皂苷Rb 3及C-Mx的生物转化及催化动力学参数表征.研究结果表明,Anxyl可将人参皂苷Rb 3和C-Mx分别转化为人参皂苷Rd和C-K.酶学性质研究表明,该酶最适反应pH=2.5,最适反应温度为35℃;在pH=2.0~5.0,20和30℃条件下其具有较好的稳定性,Mg 2+对酶活具有促进作用.Anxyl对葡萄糖和乙醇有较好的耐受性,其催化对硝基苯基-β-D-吡喃木糖苷(p NPX)、人参皂苷Rb 3和C-Mx水解的米氏常数(K m)值分别为3.1,1.55和1.04 mmol/L,酶的最大反应速率(V max)分别为1.9×10^2,0.8×10^3和8×10^3 mmol/min,酶的转换数(K cat)值分别为5.55,0.17和1.85 s-1,表明该酶对天然底物Rb 3和C-Mx具有更高的亲和力. 展开更多
关键词 黑曲霉 Β-木糖 人参皂苷转化 酶动力学
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人参二醇类皂苷的生物转化动态及人参稀有皂苷C-K或F2的制备 被引量:7
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作者 肖永坤 刘春莹 +6 位作者 鱼红闪 李泰厚 徐龙权 宋建国 林完泽 孙长凯 金凤燮 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1184-1192,共9页
为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.nigerg.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6%Rb1,25.9%Rd,19.3%Rc和5.23%Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用人参二醇皂苷诱导物比人参提取液诱导物的产酶总活力提高10%... 为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.nigerg.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6%Rb1,25.9%Rd,19.3%Rc和5.23%Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用人参二醇皂苷诱导物比人参提取液诱导物的产酶总活力提高10%~15%.所产的2种诱导酶均能水解人参二醇皂苷的3-O-和20-O-多种糖基,均为人参皂苷酶Ⅰ型;但是人参二醇皂苷诱导物所产酶几乎全部转化人参二醇皂苷为C-K,而人参提取液诱导物所产酶则残留中间产物.使用黑曲霉人参二醇皂苷诱导所产酶,在转化西洋参二醇皂苷的动态研究中发现,酶反应1.5~2.5h,主要为产物F2;酶反应12h后,主要产物为C-K皂苷.基于此,40g人参二醇类皂苷在45℃粗酶反应24h,经处理得到含C-K质量分数为87%的23g酶反应产物,C-K转化率达85%(摩尔分数).用40g西洋参二醇皂苷在45℃粗酶反应2.5h,经处理得到含有质量分数为58%的F2和27%的C-K的26g酶反应产物,F2转化率为50.4%,C-K转化率为29.5%.通过人参二醇皂苷诱导的黑曲霉粗酶转化人参二醇类皂苷动态研究,建立了C-K转化率为85%,F2转化率为50%的制备方法,为大批量制备提供了基础依据. 展开更多
关键词 人参二醇类 人参生物转化 人参F2 人参C-K 黑曲霉
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转化型人参皂苷对单克隆抗体生成的影响 被引量:10
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作者 许小琴 金文杰 +2 位作者 李金贵 秦爱建 钱琨 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期16-18,共3页
以转化型人参皂苷的8个组分,按12.50和6.25μg·mL-1的剂量,以培养抗禽流感(AIV)H9亚型血凝素特异性单克隆抗体6E6株杂交瘤细胞和抗新城疫病毒(NDV)血凝素与神经氨酸酶单克隆抗体10B11株杂交瘤细胞,收集细胞培养上清,用血凝抑制试验... 以转化型人参皂苷的8个组分,按12.50和6.25μg·mL-1的剂量,以培养抗禽流感(AIV)H9亚型血凝素特异性单克隆抗体6E6株杂交瘤细胞和抗新城疫病毒(NDV)血凝素与神经氨酸酶单克隆抗体10B11株杂交瘤细胞,收集细胞培养上清,用血凝抑制试验(HI)和间接免疫荧光试验(IFA)检测单抗水平,探讨转化型人参皂苷对单克隆抗体生成的影响。结果表明;转化型人参皂苷3、4、7号组具有促进6E6单抗和10B11单抗生成的作用,其HI效价为26-27,与对照组(25)相比差异显著;IFA效价为104-105,与对照组(102)相比差异极显著。 展开更多
关键词 转化人参 单克隆抗体 禽流感病毒 新城疫病毒
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转化型人参皂苷抗MDV及诱导肿瘤细胞凋亡的作用初探 被引量:8
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作者 许小琴 金文杰 +2 位作者 李金贵 秦爱建 陈鸿军 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 2004年第3期16-18,24,共4页
以转化型人参皂苷的8个组,按12.5μg·mL-1的剂量,在体外鸡胚成纤维细胞上进行抗MDV-RB1B强毒株空斑减数试验和诱导肝癌7402细胞株、大鼠脑胶质瘤细胞C6株细胞凋亡试验,用光学显微镜观察、琼脂糖凝胶电泳检测分析DNA损伤。结果表明... 以转化型人参皂苷的8个组,按12.5μg·mL-1的剂量,在体外鸡胚成纤维细胞上进行抗MDV-RB1B强毒株空斑减数试验和诱导肝癌7402细胞株、大鼠脑胶质瘤细胞C6株细胞凋亡试验,用光学显微镜观察、琼脂糖凝胶电泳检测分析DNA损伤。结果表明:转化型人参皂苷6、7号组,在感染阻断、增殖抑制、直接杀灭3种方式的抗MDV空斑减数率都达到阿昔洛韦(ACV)抗MDV空斑减数率的80%,转化型人参皂苷4、6号组对MDV-RB1B株的直接杀灭作用与ACV的杀灭作用相同;转化型人参皂苷8号组诱导肝癌7402株细胞48h后,有60%的瘤细胞凋亡,对大鼠脑胶质瘤C6株细胞也有诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 转化人参 马立克氏病病毒 瘤细胞凋亡
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基于网络药理学探讨人参皂苷R b1肠道菌转化物治疗胃癌的作用机制 被引量:1
6
作者 万彦 敖慧 《成都中医药大学学报》 2022年第3期49-57,共9页
目的:基于网络药理学技术研究人参皂苷R_(b1)的肠道菌转化物-人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)治疗胃癌的作用机制,为人参皂苷的临床合理应用提供科学依据。方法:Swiss Target Prediction数据库预测人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)的靶点;以... 目的:基于网络药理学技术研究人参皂苷R_(b1)的肠道菌转化物-人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)治疗胃癌的作用机制,为人参皂苷的临床合理应用提供科学依据。方法:Swiss Target Prediction数据库预测人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)的靶点;以“Gastric cancer”为关键词在Disgenet、Malacards和Omim数据库中获得胃癌的靶点;将人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)的PPI网络分别与胃癌的PPI网络取交集分别获得人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)治疗胃癌的PPI网络;分别将人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)治疗胃癌的核心靶点导入到Metascape数据库中,得到GO分析结果和KEGG富集结果。结果:网络药理学结果表明人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)治疗胃癌的关键靶点分别有64个及56个。结合人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)的生物学特性,发现PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、HIF-1t信号通路及ErbB信号通路可能是上述两种人参皂苷抗胃癌作用涉及的主要通路。结论:人参皂苷R_(b1)肠道菌群转化物-人参皂苷R_(d)及人参皂苷F_(2)可能通过调节PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、HIF-1t信号通路及ErbB信号通路治疗胃癌,后续可开展相关实验加以验证。 展开更多
关键词 PI3K-AKT信号通路 MAPK信号通路 HIF-1t信号通路 ErbB信号通路 人参R b1肠道菌群转化 人参R d 人参F 2 胃癌 网络药理学
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6种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响
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作者 田颖 郜玉钢 +3 位作者 张雪 高飞 王茜 臧埔 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期483-488,共6页
目的研究6种内生菌对人参茎叶中5种农药残留降解和20种皂苷单体转化的影响。方法在同一培养条件下,通过GC、HPLC分别对6种人参内生芽孢杆菌处理前后人参茎叶中农药残留及人参皂苷含量进行测定,计算6种内生菌对人参茎叶中农药残留率和皂... 目的研究6种内生菌对人参茎叶中5种农药残留降解和20种皂苷单体转化的影响。方法在同一培养条件下,通过GC、HPLC分别对6种人参内生芽孢杆菌处理前后人参茎叶中农药残留及人参皂苷含量进行测定,计算6种内生菌对人参茎叶中农药残留率和皂苷转化率,评价内生菌对人参茎叶转化产物质量的影响,优选出降农残和转化皂苷效果好的菌株。结果6种人参内生菌对人参茎叶中的5种农药残留均有降解作用,其中,多黏类芽孢杆菌对农药残留降解作用最强,氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕的降解率分别为86.90%,88.89%,79.88%,86.12%和86.67%(P<0.05);对20种单体皂苷均有转化作用,其中,赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参茎叶皂苷作用最强,20种单体皂苷加和值分别为5.84%和5.85%(P<0.05)。结论6种内生菌对人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响不同,多黏类芽孢杆菌降解农药残留效果最好,赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参皂苷效果最好,为提高人参茎叶总皂苷提供理论依据。 展开更多
关键词 人参内生菌 人参茎叶 农药残留降解 人参皂苷转化
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糖苷酶转化人参皂苷研究进展 被引量:1
8
作者 孙晓雨 《生物技术世界》 2013年第9期75-75,共1页
人参皂苷为人参主要的药理活性组成部分,通过水解二醇系人参皂苷的糖苷配基是制备稀有人参皂的常用方法。酶法转化因其底物高度专一、条件温和、副产物少等潜在优势而被作为结构修饰和生理研究的主要技术手段。本文主要对糖苷酶转化人... 人参皂苷为人参主要的药理活性组成部分,通过水解二醇系人参皂苷的糖苷配基是制备稀有人参皂的常用方法。酶法转化因其底物高度专一、条件温和、副产物少等潜在优势而被作为结构修饰和生理研究的主要技术手段。本文主要对糖苷酶转化人参皂苷研究进展进行了综述,为其工业化生产高活性皂苷提供理论依据。 展开更多
关键词 人参人参酶微生物转化
原文传递
Microbiological Transformation of Ginsenoside Rg_1 被引量:14
9
作者 董阿玲 崔亚君 +2 位作者 郭洪祝 郑俊华 果德安 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2001年第3期115-118,共4页
Forty-nine microbial strains were used to screen their ability for the microbiological transforma-tion of ginsenoside Rg1. Aspergillus niger (3.1858) and Absidia coerulea (3.3538) were found to convert ginsenoside Rg1... Forty-nine microbial strains were used to screen their ability for the microbiological transforma-tion of ginsenoside Rg1. Aspergillus niger (3.1858) and Absidia coerulea (3.3538) were found to convert ginsenoside Rg1 efficiently to less polar metabolites. Preparative scale transformation with both fungi Absidia coerulea (3.3538) and Aspergillus niger (3.1858) have resulted in the production of one same metabolite (MT1). Its structure was char-acterized as 6-O-b-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxatriol (Ginsenoside Rh1) on the basis of its TOF-MS and 1H, 13C NMR spectral data. The biotransformation kinetic curves for Ginsenoside Rg1 and MT1 were reported for the first time, and the biotransformation pathway was proposed. 展开更多
关键词 Microbiological transformation Ginsenoside Rg1 Ginsenoside Rh1 MICROORGANISM FUNGI
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A novel catalytic application of heteropolyacids:chemical transformation of major ginsenosides into rare ginsenosides exemplified by Rg1 被引量:6
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作者 Jie Cao Chang Liu +2 位作者 Qianqian Wang Yuze Li Qing Yu 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第6期748-753,共6页
High performance liquid chromatography coupled with quadruple-time-of-flight mass spectrometry(HPLC-Q-TOF-MS)method was developed for analyzing the hydrolytic mixtures of ginsenoside R_(g1) in acidic conditions(pH 3).... High performance liquid chromatography coupled with quadruple-time-of-flight mass spectrometry(HPLC-Q-TOF-MS)method was developed for analyzing the hydrolytic mixtures of ginsenoside R_(g1) in acidic conditions(pH 3). Three catalysts, a heteropolyacid(H_4SiW_(12)O_(40), SiW_(12) for short), its complex with γ-CD(SiW_(12)/γ-CD for short) and formic acid, were used for comparison. The chemical transformation products were identified based on the accurate mass measurement and the fragment ions obtained from tandem mass spectrometry. It was concluded that the catalytic efficiency of SiW_(12)(≈SiW_(12)/γ-CD) is ca. 410 times higher than that of formic acid, thus becoming the most efficient catalyst for chemical transformations of ginsenosides. 展开更多
关键词 ginsenoside R_(g1) heteropolyacid hydrolysis HPLC-Q-TOF-MS
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