低极性人参皂苷F4抑制SHI-1和K562白血病细胞增殖及诱导分化的研究

目的:观察低极性人参皂苷F4(F4)抑制人单核系白血病细胞SHI-1和红系白血病细胞K562增殖及诱导分化的作用。方法:以不同浓度(0、40、80和120 mg/L)的F4处理SHI-1和K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测F4对细胞增殖的抑制作用;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞趋向分化的形态;流式细胞术和免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b和CD14阳性表达率及其荧光反应强度;免疫细胞化学和Western blot法分析SHI-1细胞分化相关转录因子PU.1和K562细胞红系分化相关GATA-1和γ-globin的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测PU.1和GATA-1的mRNA表达变化。结果:与对照(0 mg/L)组比较,F4能够抑制SHI-1和K562细胞增殖(P<0.01),诱导白血病细胞趋向分化,表现为细胞核/质比缩小,染色质粗糙,核仁减少,可见空泡,SHI-1细胞核有扭曲。SHI-1细胞CD11b和K562细胞CD14阳性表达率显著升高(P<0.01),且免疫荧光反应从弱阳性转变为强阳性;但SHI-1细胞CD14和K562细胞CD11b阳性表达率无显著变化。同时,F4上调PU.1和GATA-1的mRNA和蛋白表达水平及γ-globin的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:低极性人参皂苷F4具有抑制SHI-1和K562白血病细胞增殖及诱导分化的抗白血病作用,其作用可通过调控分化相关PU.1、GATA-1和γ-globin的表达来实现。

天冬氨酸催化人参皂苷Re转化制备稀有人参皂苷的研究

目的建立一种新的环境友好型的高效制备稀有人参皂苷Rg6、F4、Rk3和Rh4的方法,为制备稀有人参皂苷提供理论依据。方法人参皂苷Re为原料,以天冬氨酸为催化剂,人参皂苷Re与天冬氨酸以10∶1混合,于120℃反应1 h,采用半制备型高效液相色谱分离产物中各稀有人参皂苷组分,通过HPLC和NMR进行定量分析和结构鉴定。结果人参皂苷Re的转化率为100%,稀有人参皂苷Rg6、F4、Rk3和Rh4的得率分别是11.2%、13.1%、20.6%和24.3%,且4种化合物的质量分数均>99%。结论该方法操作简单,成本低廉,对环境无污染,对开发绿色环保型稀有人参皂苷新药及保健食品具有重要的应用价值。

蒸三七的肠吸收特性研究

目的:从肠吸收角度,研究蒸三七体内吸收特性,为阐明蒸三七的炮制机制提供实验依据。方法:采用体外Caco-2细胞转运模型和在体大鼠肠灌流模型,对蒸三七的2种混合体系醇提物及正丁醇部位整体吸收情况对比分析,选择蒸三七中特有的6种活性成分人参皂苷Rg_6,F_4,Rk_3,Rh_4,Rk_1,Rg_5作为检测和表征指标,进行蒸三七体内肠吸收特性的研究。结果:Caco-2细胞实验中,就两混合体系中各人参皂苷的表观渗透系数值(P_(app))相比,除人参皂苷Rk_3外,其他5种皂苷P_(app)值均无显著性差异(P<0.05)。总皂苷绒毛面(AP)至基底面(BL)的表观系数值均>10^(-6)cm·s^(-1),表明蒸三七的体内吸收良好;表观渗透率均(PBA/PAB)<1.5,表明蒸三七中皂苷类成分跨膜主要转运方式可能是被动扩散。大鼠在体肠灌流实验中,两混合体系中各人参皂苷及总皂苷在肠道各部位的有效渗透系数(P_(eff)~*)值均>0.5,表明蒸三七中各皂苷吸收良好。不同浓度下的P_(eff)~*值均表明,呈现一定的浓度依赖性;不同浓度下,各肠段下P_(eff)~*值均具显著性差异,表明蒸三七皂苷类成分的吸收可能存在除被动扩散外的其他转运机制。统计分析P_(eff)~*值,两混合体系中6个皂苷除某些皂苷外,人参皂苷Rk_3,Rk_1,Rg_5均有显著性差异(P<0.05)。结论:本实验表明,以蒸三七中6种特有的活性成分作为检测和表征指标,蒸三七的体内肠吸收均良好;就蒸三七的2种混合体系醇提物及正丁醇部位而言,蒸三七正丁醇部位中某些皂苷成分和醇提物中相应人参皂苷吸收有显著性差异,可能由于醇提物中某些非正丁醇萃取部位造成的影响。