HPLC-DAD-ELSD法同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量

目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定牛膝中3种化合物β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法:采用Agilent 5 TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)不同比例进行梯度洗脱;流速为0.9 mL/min,运行时间80 min,β-蜕皮甾酮采用DAD进行检测,检测波长为248 nm;人参皂苷R0和竹节参皂苷Ⅳa采用ELSD进行检测,漂移管温度为110℃,载气流速3.2 L/min。结果:β-蜕皮甾酮在0.001 9~0.096 3 mg/mL浓度范围内浓度与峰面积间呈良好的线性关系(r^2=0.999 9);人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa分别在0.002 2~0.469 5 mg/mL和0.004 7~0.483 0 mg/mL浓度范围内浓度的对数与峰面积的对数间呈良好的线性关系(r^2=0.999 5,r^2=0.999 4)。牛膝中三种化合物(β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa)的平均加样回收率分别为99.29%(RSD为2.14%)、99.13%(RSD为2.04%)和98.30%(RSD为2.11%)。结论:本研究所建立的方法简便,快速,且稳定性、精密度、重复性良好,适用于牛膝中甾酮类和皂苷类成分的同时测定,也可用于牛膝药材的质量控制。

高效液相色谱法测定珠子参中人参皂苷R_0的含量

目的建立用高效液相色谱法测定珠子参中人参皂苷R_0含量的方法。方法 SHISEIDO SPOLAR C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(34∶66);检测波长203nm;柱温30℃,流速1.0mL/min,进样量20μl。结果对照品线性范围为0.212μg-5.300μg,相关系数0.99998,平均回收率为101.4%,RSD=2.4%(n=9)。结论该方法简便可行,重复性好,可为中药珠子参质量评价体系的建立提供科学依据。

独活寄生汤高效液相色谱指纹图谱的建立和7种有效成分含量的测定

目的:建立高效液相色谱(HPLC)指纹图谱法分析独活寄生汤中7种有效成分的方法,为临床独活寄生汤中药处方的质量控制提供参考依据。方法:分析独活寄生汤中药处方现代药理研究文献,筛选HPLC检测主要有效成分,建立HPLC检测上述有效成分的色谱条件,考察精密度、重复性、加样回收率,检测5批次独活寄生汤煎液中独参汤中蛇床子素、二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷、二氢欧山芹醇、芍药苷、松脂醇二葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0含量。HPLC检测独活寄生汤中主要有效成分的色谱条件为:ODSC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析柱;1 mL/min;柱温为30℃,进样量10μL,检测方法:设置监测波长0~40 min采用330 nm检测,41~80 min采用230 nm检测;流动相:乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)洗脱程序:0~25 min,10%~26%流动相A,26~30 min,27%~44%流动相A,31~35 min,45%~46%流动相A,41~45 min,47%~48%流动相A;46~65 min,49%~92%流动相A;66~80 min,93%~100%流动相A。结果:蛇床子素、二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷、二氢欧山芹醇、芍药苷、松脂醇二葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0具有较好的线性关系,精密度(日内和日间)RSD值均低于2.5%,7种成分检测重复性RSD值均低于3.5%,7种成分的加样回收率均≥95.0%。5批次独活寄生汤中7种成分含量比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤主要有效成分可通过HPLC进行定量分析,但不同种含量差异较大,可能与煎药人不同、中药材批次不同有关。

参麦注射液治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)合并冠心病的网络药理分子机制探析

目的利用网络药理学方法解析参麦注射液治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)合并冠心病的分子网络作用途径。方法借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)和中医百科全书平台(ETCM)收集参麦注射液中红参、麦冬的化学成分;通过SwissTargetPrediction数据库预测化合物的作用靶点;通过NCBI数据库和GeneCards数据库筛选COVID-19及合并症冠心病的靶点;通过DAVID数据库分别进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;运用Cytoscape 3.7.1软件构建化合物-靶点-通路网络。利用Glide软件对参麦注射液成分与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶(Mpro)的分子对接。结果参麦注射液中麦冬皂苷D′、麦冬皂苷D、人参皂苷Rg2、麦冬甲基黄烷酮A、麦冬苷元-3-O-新橙皮糖苷、人参皂苷Rb2、人参皂苷R0、Ophiopogon A、三七皂苷Rd、麦冬二氢高异黄酮E、人参皂苷Re在分析中显示了较高的度值,且与SARSCoV-23CL水解酶结合力较强,可能是参麦注射液发挥治疗COVID-19合并冠心病的主要药效成分,共涉及到IL6、GAPDH、ALB、TNF、MAPK1、MAPK3、TP53、EGFR、CASP3、CXCL8等77个靶点,以及低氧诱导因子-1信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、鞘脂信号通路、Toll样受体信号通路、神经营养素信号通路、血管内皮生长因子信号通路、细胞凋亡、Ras信号通路、PI3K-Akt信号通路、泌乳素信号通路等124条信号通路。结论参麦注射液可能通过抑制细胞因子风暴、维持心脏功能稳态、调节免疫、抗病毒等方面实现对COVID-19与冠心病的同时干预,呈现出了相互影响、复杂关联的网络调控机制。