人参皂苷Rb3对高糖诱导的内皮细胞迁移和增殖及糖尿病小鼠视网膜功能的影响

目的探究人参皂苷Rb3(Ginsenoside Rb3)对高糖诱导的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)迁移和增殖及db/db小鼠视网膜功能的影响及其作用机制。方法RF/6A细胞分为正常组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L D-葡萄糖)、高糖+Ginsenoside Rb3(100、150、200μg/mL)组。采用CCK-8法检测各组细胞活力,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc,BrdU)染色评估细胞增殖能力以及Transwell法检测各组细胞迁移能力,Western blot技术检测各组RF/6A中YES相关蛋白1(yes-associated protein 1,YAP1)和磷酸化YES关联蛋白1(p-YAP1)的表达。db/db小鼠分为模型组和Ginsenoside Rb3组,给药4周后,运用光学相干断层扫描实验和视网膜电生理检查评价db/db小鼠视网膜形态和功能的变化,并采用免疫荧光染色法观察YAP1在视网膜中的表达。结果结果显示,与对照组比较,高糖组细胞活力和BrdU阳性细胞率显著增加(P<0.01),细胞迁移率显著提高(P<0.001);与高糖组相比,Ginsenoside Rb3降低细胞活力(150μg/mL,P<0.05)、阳性细胞率(200μg/mL,P<0.05;100μg/mL,P<0.01)和迁移细胞数量(P<0.05)。与正常组相比,高糖组YAP1和p-YAP1蛋白表达上调(P<0.01或P<0.05);与高糖组相比,Ginsenoside Rb3干预下调RF/6A中YAP1和p-YAP1(150μg/mL)的蛋白表达水平(P<0.05)。体内研究结果显示,Ginsenoside Rb3增加db/db小鼠的视网膜厚度,改善视网膜功能并抑制YAP1在视网膜中的表达(P<0.05)。结论Ginsenoside Rb3不仅抑制高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移,亦能改善db/db小鼠视网膜的形态和功能,其药理机制可能与下调YAP1表达有关。

人参皂苷Rb3糖基水解酶的纯化及其反应特性

人参皂苷Rb3是三七茎叶皂苷的主要成分。为了充分利用廉价的三七茎叶皂苷,该研究以微生物Aspergillus sp.P90r菌为对象,综合运用生物转化的方法,经过提取、分离纯化和酶活力测定等步骤,最终以确定酶反应途径的方式得到了所产的特异性人参皂苷Rb3糖基水解酶的相关性质和动力学等反应特性。结果表明:该酶比Absidia sp.GRB3-X8r菌产酶活力高15%~25%,SDS-PAGE电泳结果测得分子量约为65.6 ku,纯化后酶蛋白的含量为0.237 mg·mL^-1,蛋白比活力可达到169 U·mg^-1,纯化倍数为13.70,回收率为9.39%。人参皂苷Rb3糖基水解酶在pH=5.0的偏酸性环境下酶活力很高,最适反应条件:pH=3.0~5.0,温度45℃,其中在pH=4.0~6.0范围内相对稳定。该酶在20 min时进入混合级反应,酶反应米氏常数K m值为8.77 mmol·L-1,V max为57.44 mmol·L-1·h-1,在60 min时反应速度达到最大,V max趋于稳定,为66.63 mmol·L-1·h-1。通过对酶的催化特性研究表明,该酶先水解Rb3的20-O-木糖基,其次水解3-O-葡萄糖基,最终催化反应产物中有F2和C-K生成。综上结果,微生物Aspergillus sp.P90r菌酶具有能水解人参皂苷Rb3木糖基和葡萄糖基的特异性。

人参皂苷Rb3保护低糖低氧/复氧诱导乳鼠皮层神经元凋亡的离子通道机制

目的研究人参皂苷Rb3对低糖低氧/复氧大鼠神经元凋亡的保护作用,并探讨其发挥神经保护作用与线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATPC)开放的关系。方法建立原代培养的大鼠皮层神经元的低糖低氧/复氧(OGD/R)模型,分为5组:正常对照组,低糖低氧/复氧组(OGD/R)、60 mol/L人参皂苷Rb3组、100 mol/L 5-羟基葵酸盐(5-HD)组、60 mol/L人参皂苷Rb3+100 mol/L 5-HD组。利用Hoechst染色法检测细胞凋亡;Western印迹法检测多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达并测定caspase-3的活性。结果经OGD/R损伤后细胞出现凋亡典型的形态学特征;凋亡蛋白caspase-3活性增强,PARP蛋白表达下降。与OGD/R组比较,60 mol/L人参皂苷Rb3降低OGD/R损伤后神经元的凋亡(P<0.01)。抑制caspase-3活性(P<0.01),保持PARP蛋白条带的完整性。5-羟基葵酸盐则削弱人参皂苷Rb3抑制神经元凋亡的作用,使caspase-3活性增强、PARP蛋白表达降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rb3对OGD/R损伤神经元的凋亡具有抑制作用,mitoKATPC开放可能介导了人参皂苷Rb3的抗凋亡作用。

人参皂苷Rb3的药理研究进展

人参和三七在临床和日常生活中使用广泛,人参具有益气复脉、补脾益肺、生津安神的功效,三七具有化瘀止血、活血定痛的功效。本文对二者的有效成分人参皂苷Rb3在神经系统、心血管系统、血液系统等方面的药理研究文献资料进行了综述。

人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,ErbB2,ErbB4表达的影响

目的观察人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,Erb B2,Erb B4表达的影响。方法 60只大鼠随机分为Sham组、Model组、G-Rb3-L组(10 mg/kg)、G-Rb3-M组(20 mg/kg)、G-Rb3-H组(40 mg/kg)及阳性药物组(地尔硫卓20 mg/kg),每组各10只。造模后,G-Rb3-L组、G-Rb3-M组、G-Rb3-H组及阳性药物组给予相对的药物,Model组和Sham组大鼠给予等体积的生理盐水。HE、Masson染色分别观察心肌组织的病理变化与心肌纤维化程度;ELISA法检测血浆中的VE-cadherin的水平;Western blotting法检测心肌组织NRG-1、ErbB2和ErbB4蛋白的表达。结果与Sham组比较,Model组大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度严重,心肌梗死面积、VE-cadherin水平上升(P<0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达减少(P<0.05);与Model组比较,人参皂苷Rb3干预的大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度减轻,心肌梗死面积、VE-cadherin表达水平降低(P<0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达增加(P<0.05)。结论人参皂苷Rb3可通过调控Neuregulin-1/ErbB信号通路降低心肌梗死大鼠的心肌细胞的炎症及心肌纤维化程度,减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤。

HPLC法同时测定三七花盘中人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3的含量

目的：建立HPLC法同时测定三七花盘中人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3的含量。方法采用ACE 5 C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液（32∶68）；流速：1.0mL/min；检测波长：203nm；柱温：25℃。结果人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3分别在10.25～143.50mg/L（r=0.9993， n=7）和10.94～153.16mg/L（r=0.9997，n=7）范围内呈良好线性关系；平均回收率（n=6）分别为98.78%和98.17%。结论本测定方法简便、快速、准确，为三七花盘的综合开发利用提供了参考，有利于控制三七花盘的质量。

人参皂苷Rb3联合二甲双胍对心肌缺血再灌注大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的观察人参皂苷Rb3(G-Rb3)联合二甲双胍对心肌缺血再灌注大鼠血管内皮细胞的保护作用。方法大鼠结扎冠状动脉前降支60min,松扎再灌注120min制备心肌缺血再灌注损伤模型,测定心肌梗死面积(MIS),血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,血浆内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、前列环素(PGI2)及血栓素A2(TXA2)水平。结果人参皂苷Rb3联合二甲双胍对大鼠心肌缺血60min再灌注120min,可明显缩小MIS,降低血清MDA含量及AST、CK、LDH活性,提高NO含量及SOD、GSH-Px活性,可使血浆ET、AngⅡ及TXA2水平明显降低,PGI2水平及PGI2/TXA2比值明显增高。结论人参皂苷Rb3联合二甲双胍对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显保护作用,可能通过增强抗氧化酶活性,减轻自由基对心肌的氧化损伤,减少血管内皮细胞因子ET及AngⅡ释放,纠正PGI2/TXA2失衡等机制有关。

人参皂苷Rb3联合二甲双胍对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察人参皂苷Rb3(G-Rb3)联合二甲双胍对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法100μmol/LH_2O_2造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,以cck-8法检测各组细胞增殖情况,测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)含量和超氧物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果 100μmol/LH_2O_2可抑制血管内皮细胞活性,降低NO含量及SOD、GSH-Px活力,升高TNF-α含量。G-Rb3联合二甲双胍能明显抑制过氧化氢损伤引起的细胞活性降低,提高NO含量及SOD、GSH-Px活力,降低TNF-α含量,表明对100μmol/LH_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用。结论 G-Rb3可明显增强二甲双胍对血管内皮细胞的保护作用,可能通过调控抗氧化损伤机制实现的。

人参皂苷Rb3对肝糖异生作用机理的研究

为了探讨人参皂苷Rb3在降低血糖方面的分子调控机制,利用HepG2细胞为研究材料,系统分析了人参皂苷Rb3对肝糖异生关键酶PEPCK、G6Pase和转录因子FOXO1、HNF4α的影响。结果表明,人参皂苷Rb3可以显著抑制HepG2细胞肝糖异生途径关键转录因子FOXO1、HNF4α蛋白表达,从而抑制PEPCK和G6Pase酶活性及糖异生作用,该作用能够被AMPK抑制剂Compound C部分阻断,推测人参皂苷Rb3抑制肝糖异生作用是通过激活AMPK信号通路实现。AMPK信号转导通路作为重要的糖脂代谢靶点,在糖尿病及相关代谢类疾病的调控中发挥着重要的作用,为探讨人参皂苷Rb3治疗糖尿病的作用机制提供了新的理论依据。

三七叶中人参皂苷Rb3及总皂苷质量差异研究

目的:比较不同部位、不同生长年限、不同生长年份的三七叶中皂苷的含量,为三七叶相关产品开发和质量标准升级提供参考。方法:采用HPLC及UV法分别测定人参皂苷Rb3和总皂苷的含量。结果:人参皂苷Rb3及总皂苷主要分布于叶部,在茎和基部仅微量分布。3年生的整体质量优于2年生。不同年份采收的三七叶质量差异较大。结论:不同部位和不同生长年限的三七叶质量差异较大,采收和利用时需注意叶和茎的比例。

人参皂苷Rb3对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察人参皂苷Rb3(G-Rb3)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 100只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组及人参皂苷Rb3 7、14、28 mg/kg组。假手术组及模型组均腹腔注射0.9%氯化钠注射液2 ml/kg,人参皂苷Rb3的3个剂量组分别腹腔注射G-Rb3 7、14、28 mg/kg,连续3 d。通过大鼠右侧大脑中动脉阻塞2 h,再灌注24 h,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。缺血再灌注后6 h和24 h分别进行大鼠神经功能评分,于缺血再灌注24 h处死大鼠,取脑组织经TTC染色观察大脑梗死体积,检测脑组织中促炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果人参皂苷Rb3 14、28 mg/kg均能明显改善大鼠神经功能评分,降低脑梗死体积(P<0.05或P<0.01),可使血清中MDA含量明显降低,SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05或P<0.01),并降低脑组织中促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05或P<0.01)。结论人参皂苷Rb3对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与抗炎及抗氧化应激有关。

人参皂苷Rb3对过氧化氢诱导心肌细胞损伤模型HIF-1α、VEGF的表达作用

目的观察人参皂苷Rb3对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤模型中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的调节作用,并探讨其作用机制。方法采用心肌细胞株H9c2细胞,人参皂苷Rb3(25μmol/L)预处理24 h后,加入H2O2(400μmol/L)分别诱导1 h和2 h,并使用磷酯酰激醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002(LY294),通过荧光定量逆转录-聚合酶链式反应法测定细胞中HIF-1α、VEGF的mRNA表达水平。结果与空白对照组相比,H2O2增强了HIF-1α和VEGF的mRNA表达(P<0.01);与H2O2组相比,人参皂苷Rb3可提高HIF-1α、VEGF的mRNA水平(P<0.01);与H2O2+Rb3组相比,LY294降低了H2O2作用2 h后HIF-1α的mRNA表达水平(P<0.01)。结论人参皂苷Rb3可以促进H2O2诱导的心肌细胞损伤模型中HIF-1α和VEGF的mRNA表达,且前者可能与PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路有关。

人参皂苷Rb3通过抗氧化应激对HT22细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤的保护作用

为了探讨人参皂苷Rb3对氧糖剥夺-复糖复氧(OGD/R)损伤的HT22细胞氧化应激的抑制作用和神经保护作用,本试验将体外培养的HT22细胞随机分为对照组(Control group)、模型组(OGD/R group)、阳性组(EDA group,OGD/R+EDA 100μmol/L)和Rb3组(Rb3 group,OGD/R+Rb32.5、5、10μmol/L);用连二亚硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(4))10 mmol/L合并无糖DMEM培养基进行氧糖剥夺培养2 h,后复糖复氧2 h以建立体外OGD/R模型,在光学显微镜下观察细胞形态;继而用噻唑蓝(MTT)和乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞存亡率,并用试剂盒检测氧化应激相关指标。结果显示,与对照组相比,模型组细胞肿胀、突起消失,死亡率极显著升高(P<0.01),氧化应激相关指标活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)水平和丙二醛(MDA)含量极显著增加(P<0.01),抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著下降(P<0.01),细胞色素C(Cyt-C)释放量极显著增加(P<0.01);与模型组相比,Rb3组可显著改善细胞形态,并极显著提高细胞存活率和降低死亡率(P<0.01),氧化应激方面可极显著降低ROS、NO水平和MDA含量(P<0.01),极显著提高抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性(P<0.01),极显著抑制Cyt-C的释放(P<0.01)。结果表明,人参皂苷Rb3对OGD/R诱导的脑缺血再灌注损伤(CIRI)的体外模型具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化应激、抑制Cyt-C的释放以减少内源性凋亡有关。

人参皂苷Rb3木糖苷酶的纯化及其酶学性质

采用DEAE-Cellulose DE52阴离子交换柱层析的方法对微生物Absidia sp.GRB3-X8r菌产特异性人参皂苷Rb3木糖苷酶进行分离纯化,分离后该酶在SDS-PAGE上呈现单一蛋白质条带,并对其酶学性质进行研究。研究表明:人参皂苷Rb3木糖苷酶的最适反应p H为3.0,在p H2.2~8.0范围内相对稳定;最适温度为40℃,在20~60℃范围内具有较好的稳定性;金属离子K^+、Na^+、Mg^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)离子对酶反应无明显作用,Zn^(2+)、Pb^(2+)、Ni^(2+)对酶反应有抑制作用。SDS-PAGE电泳结果表明酶蛋白的相对分子量约为66.7 k Da。反应动力学研究结果显示K_m值为65.63 mmol/L,V_(max)为2.03 mmol/(h·L)。通过对酶的催化特性研究表明,该酶能水解人参皂苷Rb3木糖基,生成人参皂苷Rd。

在体单向肠灌流模型研究三七人参皂苷Rb3大鼠肠吸收特性

目的:研究人参皂苷Rb3在大鼠肠道的吸收动力学,并考察不同的药物浓度和常用的吸收促进剂对其吸收速率的影响。方法:进行大鼠在体肠灌流实验,研究人参皂苷Rb3在肠道不同肠段的吸收情况。结果:人参皂苷Rb3在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率为十二指肠>空肠≈回肠>结肠,人参皂苷Rb3在低、中、高3个浓度下的吸收速率分别为低浓度>中浓度≈高浓度。结论:小肠整个肠段是人参皂苷Rb3的主要吸收部位,十二指肠、空肠、回肠、结肠都有不同程度的吸收,其中十二指肠段吸收速率最快。人参皂苷Rb3在小肠中吸收速率随着浓度的增加而逐渐减小,推测被动扩散、易化扩散和主动转运为影响人参皂苷Rb3吸收的主要转适机制。

人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆模型小鼠的改善作用及其机制研究

目的:研究人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆(VD)模型小鼠的改善作用及其机制。方法:将ICR小鼠随机分为模型组、人参皂苷Rb3组(10 mg/kg)、β-细辛醚组(10 mg/kg)、联合用药组(人参皂苷Rb310 mg/kg+β-细辛醚10 mg/kg)、阳性对照组(盐酸多奈哌齐1 mg/kg)和蛋白激酶B(Akt)抑制剂组(LY294002,1 mg/kg),并设假手术组,每组10只。除假手术组外,其余各组小鼠均按四血管阻断法复制VD模型。造模后,假手术组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,Akt抑制剂组腹腔注射相应药物,其余各组均灌胃相应药物,每日2次,连续30 d。末次给药后,采用避暗实验检测各组小鼠的学习记忆能力,酶联免疫吸附测定法检测其海马组织中4-羟基壬烯酸(4-HNE)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、活性氧(ROS)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测海马组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)及其X蛋白(Bax)mRNA的表达,免疫荧光法检测皮质中Bcl-2蛋白的表达,Western blotting法检测海马组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠的避暗潜伏期显著缩短,错误次数显著增多,4-HNE、8-OHdG、ROS含量以及Bax mRNA、蛋白的表达水平均显著升高,Bcl-2 mRNA、蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,人参皂苷Rb3组、β-细辛醚组、联合用药组和阳性对照组小鼠的避暗潜伏期均显著延长,错误次数均显著减少,4-HNE、8-OHdG、ROS含量以及Bax m RNA、蛋白的表达水平均显著降低,Bcl-2 mRNA、蛋白的表达水平均显著升高,且联合用药组的效果最为显著(P<0.05或P<0.01);而Akt抑制剂组小鼠的避暗潜伏期显著缩短,错误次数显著增多,4-HNE、8-OHdG、ROS含量以及Bax mRNA、蛋白的表达水平均显著升高,Bcl-2 mRNA、蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对VD模型小鼠学习记忆能力具有一定改善作用,且效果优于各化合物单用。这种作用可能与抗氧化应激、抗海马组织凋亡有关。

定志小丸有效成分中人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆模型小鼠作用研究

目的研究定志小丸有效成分中人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆模型小鼠的作用。方法采用四血管阻断法建立血管性痴呆小鼠模型后,随机分为模型组、人参皂苷Rb3组(10 mg/kg)、β-细辛醚组(10 mg/kg)、人参皂苷Rb3联合β-细辛醚组(10 mg/kg+10 mg/kg)、盐酸多奈哌齐组(1 mg/kg)和LY294002组(1 mg/kg),每组10只。除假手术组(n=10)和模型组给予等量体积生理盐水,各组给药30 d,每天2次。采用ELISA法检测各组小鼠海马和血清中3-硝基酪氨酸(3-NT)、神经营养因子-3(NT-3)、聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶1(PARP1)和醛糖还原酶(AR)的含量,采用HE法观察海马部位组织病理学的变化。结果与假手术组比较,模型组的海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,人参皂苷Rb3组、β-细辛醚组、人参皂苷Rb3联合β-细辛醚组和盐酸多奈哌齐组的海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量显著减少(P<0.05),而LY294002组的海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量显著增加(P<0.01);与人参皂苷Rb3组和β-细辛醚组比较,人参皂苷Rb3联合β-细辛醚组的海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量显著增加(P<0.05),而盐酸多奈哌齐组的海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量显著减少(P<0.05)。除LY294002组,其他各给药组的海马组织病理损伤均有所减轻。结论定志小丸有效成分中人参皂苷Rb3联合β-细辛醚具有一定神经保护作用,表现在可以减少血管性痴呆模型小鼠海马和血清中3-NT、NT-3、PARP1和AR含量,以及减缓海马组织损伤,而联合用药的作用优于单独给药组。

高效液相色谱法快速测定七叶神安片中的人参皂苷Rb3

建立了高效液相色谱法快速测定七叶神安片中的人参皂苷Rb3含量的方法。采用核壳型色谱柱分离,按照等度分离条件,流动相为32%乙腈的0.2%磷酸溶液,流量为0.85 mL/min,人参皂苷Rb3的质量浓度在6~120μg/mL的范围内与色谱峰面积线性关系良好,线性相关系数为0.9990,检出限为0.23μg/mL,平均回收率为95.6%~98.3%,相对标准偏差为0.6%~1.2%。在保持常规全多孔型分离填料梯度淋洗的分离度的前提下,人参皂苷Rb3的峰保留时间缩短至四分之一,检出限提高4倍。该方法可有效节约仪器配置、节省溶剂的使用和处理成本,提高工作效率,可为七叶神安片的质量监控提供新的检测方法参考。

人参皂苷Rb3治疗心肌梗死的分子生物学研究

目的研究人参皂苷Rb3治疗心肌梗死的分子生物学机制。方法采用PLM腺病毒转染人参皂苷Rb3灌胃后大鼠的心肌细胞,Western blot检测不同环境下人参皂苷Rb3对Ser68表达及细胞外调节蛋白激酶p ERK1/2、凋亡抑制蛋白Survivin、MAPK通路p38,以及凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达的影响。结果人参皂苷Rb3在缺氧和低糖环境下,可降低Ser68磷酸化表达,提升心脏的收缩供血能力,抑制ERK1/2通过磷酸化形成p ERK1/2,缓和p ERK1/2对心肌细胞凋亡的加速作用。人参皂苷Rb3还可在缺氧环境下增强凋亡抑制蛋白Survivin的表达。此外,缺氧和低糖环境下,人参皂苷Rb3可以降低MAPK通路重要蛋白p38的表达,并抑制凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8的表达,改善心肌梗死。结论在缺氧和低糖环境下,人参皂苷Rb3对心肌梗死具有积极的治疗作用。

人参皂苷Rb3通过上调Klf16/Nrf2表达改善小鼠脂性肝细胞模型的脂质沉积与氧化应激

目的探讨人参皂苷Rb3对小鼠脂性肝细胞模型脂质沉积和氧化应激的影响。方法采用原位二步灌流法提取小鼠肝原代细胞,以油酸(OA)和棕榈酸(PA)混合培养基制备脂性肝细胞模型,并以人参皂苷Rb3低、中、高剂量(5、10、20 nmol·L^(-1))分别干预24 h。测定各组细胞中甘油三酯(TG)的含量;分别采用荧光探针BODIPY 493/503、BODIPY 581/591、DCFH-DA检测各组细胞脂质蓄积、脂质过氧化情况及活性氧(ROS)水平;采用qPCR法检测细胞Klf16、Nrf2 mRNA表达水平;Western Blot法检测细胞Klf16、Nrf2、Sod2蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞中的TG含量显著升高(P<0.01),脂质蓄积和过氧化水平显著增强(P<0.05),ROS水平显著升高(P<0.01),Klf16、Nrf2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Klf16、Nrf2及Sod2蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,人参皂苷Rb3高剂量组细胞中的TG含量明显降低(P<0.01),细胞脂质蓄积、过氧化水平明显降低(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.01),Klf16、Nrf2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),Klf16、Nrf2及Sod2蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论人参皂苷Rb3可一定程度改善小鼠脂性肝细胞模型的脂质蓄积和氧化应激反应,其作用机制可能与上调Klf16/Nrf2表达有关。