人参皂苷Rf的分离提纯

以人参根须为原料,采用甲醇浸提法提取人参根须中总皂苷,再用硅胶柱层析法对总皂苷进行分离,得到较纯净的人参皂苷单体Rf。结果表明,500 g人参根须中提取得到总皂苷20.5 g,提取率为4.10%。总皂苷中主要含Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分。20.5 g人参根须总皂苷经硅胶柱层析法分离,得到较纯人参皂苷单体Rf 0.410 g,在总皂苷中的得率为2.00%,在人参根须中得率为0.082%。高效液相色谱法检测分离得到的人参皂苷单体Rf的纯度较高,为93.0%。

HPLC法同时测定参龙通络丸中三七皂苷R_(1)和人参皂苷Rf的含量

目的建立一种可以同时测定参龙通络丸中两种成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rf)含量的HPLC法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),Hypersil Hypersil BDS C18色谱柱(5μm,4 mm×250 mm),乙腈-水为流动相梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长203 nm;柱温35℃,检测参龙通络丸中两种成分的含量。结果三七皂苷R1样品量在0.198~9.535μg范围(r=0.9993)、人参皂苷Rf的样品量在0.957~38.392μg范围(r=0.9997)线性关系良好,两种成分的平均回收率分别为99.10%(RSD=1.57%,n=6)和98.76%(RSD=2.13%,n=6)。结论本方法具有结果准确、可靠、重复性好的特点,可为参龙通络丸的质量标准制定提供科学依据。

人参茎叶中1个新皂苷20(S)-人参皂苷Rf_2

目的研究人参Panax ginseng茎叶总皂苷中的化学成分。方法采用硅胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法进行分离、纯化,通过NMR、MS等谱学方法进行化学结构鉴定。结果从人参茎叶的总皂苷中共分离鉴定了39个化合物,报道其中的1个新化合物和16个已知的化合物,分别为人参皂苷Re（1）、20（S）-人参皂苷Rh1（2）、20（R）-人参皂苷Rh1（3）、人参皂苷Rh5（4）、20（E）-人参皂苷F4（5）、人参皂苷F2（6）、20（S）-人参皂苷Rg3（7）、20（R）-人参皂苷Rg3（8）、20（S）-人参皂苷Rf2（9）、20（R）-人参皂苷Rf2（10）、20（S）-原人参二醇（11）、20（R）-原人参二醇（12）、20（S）-人参皂苷Rh2（13）、20（R）-人参皂苷Rh2（14）、20（S）-原人参三醇（15）、20（R）-原人参三醇（16）和人参皂苷Rd（17）。结论化合物9为1个新的化合物;210、13和14是稀有人参皂苷。

应用洗脱-推挤逆流色谱法高效分离制备人参皂苷Rg_1、Rf及Rd

目的运用洗脱-推挤逆流色谱技术(EECCC)分离制备人参皂苷Rg1、Rf及Rd。方法以乙酸乙酯-正丁醇-0.1%甲酸水(2︰1︰3,v/v)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,仪器转速为1 250 r/min,操作体积流量为40 mL/min,切换体积为2 400 mL。结果在此条件下,经一步纯化从300 mg样品中分离纯化得到71 mg人参皂苷Rg1、21 mg人参皂苷Rf及53 mg人参皂苷Rd,经高效液相色谱分析,纯度分别达到96.2%、94.3%和95.1%。结论 EECCC制备方法快速,简单。对于分离分配系数高的物质十分有效。

一测多评法同时测定十味香鹿胶囊中5种人参皂苷

目的建立一测多评法同时测定十味香鹿胶囊(人参、香附、鹿角脱盘等)中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb3的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Agilent EC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温25℃;检测波长203 nm。以人参皂苷Rb1为内标,计算其他4种人参皂苷的相对校正因子,测定其含有量。结果 5种人参皂苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率99.05%~101.4%,RSD 1.12%~2.67%,一测多评所得结果与外标法接近。结论该方法简便可靠,可用于十味香鹿胶囊的质量控制。

HPLC-ELSD法同时测定心脑舒口服液中7种皂苷类成分

目的建立同时测定心脑舒口服液（人参、黄芪、五味子、党参、麦冬）中人参皂苷Rg；人参皂苷Re；人参皂苷Rf；人参皂苷Rb1；人参皂苷Rb2；人参皂苷Rb3；黄芪甲苷的方法。方法采用HPLC—ELSD法；Kromasi]C，s色谱柱；乙腈一水为流动相；体积流量为1mL／min。结果根据回归方程，7种成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb，、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、黄芪甲苷分别在0．2028～2．028μg（r=1．00），0．3788～3．788μg（r=1．00），1．6862～16．862μg（r=1．00），0．8434—8．434μg（r=1．00），0．2048—2．048μg（r=1．00），0．1816。1．816txg（r=1．00）和0．1166—1．166μg（r=1．00）范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别为98．1％（RSD为1．1％），98．1％（RSD为0．87％），98．5％（RSD为0．58％），98．2％（RSD为0．58％），98．6％（RSD为0．49％），98．7％（RSD为1．1％），98．5％（RSD为0．42％）。结论该方法多种成分同时测定，操作简便、准确、重复性好，可用于心脑舒口服液的质量控制。

大孔吸附树脂对珠子参叶总皂苷纯化工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂分离纯化珠子参叶中总皂苷的工艺条件及参数.方法 以珠子参叶总皂苷的吸附量和解析率为指标筛选大孔吸附树脂,并研究所选树脂分离纯化珠子叶参总皂苷的吸附与解吸特性,优化纯化条件.结果 饱和吸附量为54.98 mg/g,树脂量:上样药材量为2∶3,上样浓度为4.8～5.8 mg/mL,上样液pH值6.0为佳;洗脱用60%乙醇16倍柱体积,收集60%乙醇洗脱部分.结论 HPD-100型大孔树脂对珠子参叶总皂苷有较好的吸附与解析特性,适合用于珠子参叶总皂苷的分离与纯化.

人参、三七在复方芪术调经散中的高效液相色谱法鉴别

【目的】建立芪术调经散中人参和三七的鉴别方法。【方法】以三七皂苷R1和人参皂苷R f为指标,采用高效液相色谱法对芪术调经散中人参和三七进行鉴别。【结果】通过利用人参特征性成分人参皂苷R f和三七特征性成分三七皂苷R1,并综合人参和三七中共有成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1,可对芪术调经散中人参和三七进行鉴别。【结论】该方法简便可行,可用于芪术调经散中人参和三七的同时鉴别。

HPLC法-测多评法对补气养血合剂中人参、三七的含量测定研究

目的创建应用HPLC法对“补气养血合剂”中含有的三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb 1(后文称“4种皂苷”)进行含量测定的方法。方法采用HPLC法。色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C18(长度:250 mm,直径:4.6 mm,孔径:5μm),P.N.959990—902。柱温:30℃。流速:1.0 mL/min。检测波长:203nm。进样量:10μL。流动相:水(A)—乙腈(B),程序洗脱。结果三七皂苷R 1:线性关系在0.0829—2.0454μg范围内良好(R=0.9995)。平均加样回收率为:95.17%(RSD为0.65%,n为6)。人参皂苷Rg 1:线性关系在0.2944—5.1263μg范围内良好(R=0.9999)。平均加样回收率为:96.81%(RSD为1.17%,n为6)。人参皂苷Rf:线性关系在0.0039—0.0586μg范围内良好(R=0.9993)。平均加样回收率为:104.05%(RSD为1.78%,n为6)。人参皂苷Rb 1:线性关系在0.2350—3.5256μg范围内良好(R=0.9999)。平均加样回收率为:96.61%(RSD为1.33%,n为6)。结论创建了应用HPLC法对“补气养血合剂”中含有的4种皂苷进行含量测定的可信度较高的方法。

不同产地人参根和根茎中人参皂苷的含量分析

目的:研究不同产地人参根和根茎中14个人参皂苷的含量,为制定人参皂苷的质量标准提供科学依据。方法:采用Diamonsil·ODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)以乙腈和乙腈-水-0.1%磷酸水溶液(5:90:8,v/v/v)为流动相,梯度洗脱,203nm波长处二极管阵列检测器检测,外标对照品法测定人参根和根茎中人参皂苷(G)Ra_1、Ra_2、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg_1、Ro,20-O-葡萄糖基人参皂苷Rf(20-GG-Rf)三七人参皂苷(NG)R_1、R_2 14个化合物。结果:不同产地人参根和根茎中人参皂苷含量的变化较大,26批次五年生人参根和根茎样品中14个人参皂苷的含量(μg·g^(-1),人参根和根茎)变化幅度分别为G-Ra_1,0~2 958;G-Ra_2,0~1 320;G-Rb_1,1 195~7 129;G-Rb_2,835~6 993;G-Rb_3,178~1 812;G-Rc,414~5 569;G-Rd,393~5 529;G-Re,603~3 564;G-Rf,301~1 504;G-Rg_1,738~4 710;G-Ro,893~8 569;20-GG-Rf,110~656;NG-R_1,74~778;NG-R_2,0~844。结论:G-Ra_1、Ra_2、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc和Rd为典型的原人参二醇型人参皂苷,G-Re、Rf、Rg_1,20-GG-Rf、NG-R_1和R_2为典型的原人参三醇型人参皂苷,G-Ro为典型的齐墩果酸型人参皂苷,三大类人参皂苷能代表体现人参药物活性的皂苷成分。其中,又以G-Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg_1、Ro和20-GG-Rf含量更高,作为判定人参根和根茎中人参皂苷质量的指标性成分更科学。

HPLC法同时测定人参及其制剂中16种人参皂苷

目的建立同时测定人参及其制剂中16种人参皂苷的HPLC方法。方法采用C18（150mm×4．6mm，5μm）色谱柱；流动相为乙腈和水，梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，检测波长203nm，柱温35℃。结果16种人参皂苷Rgl、Re、Rf、Rbl、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、Rh2及原人参三醇、compoundK、原人参二醇均得到良好分离，线性关系良好（r≥0．9990）。加样回收率均在95％-102％，RSD〈2％。结论该方法快捷简便、稳定可靠，可应用于人参及其制剂的质量控制。

人参总皂苷主要成分大鼠体内药动学研究

目的研究人参总皂苷中9种人参皂苷Rb1、Rb2/Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1和Rh1在大鼠体内的药动学。方法大鼠ig 200 mg/kg人参总皂苷后于不同时间点眼底静脉丛取血。生物样本采用正丁醇液-液萃取,经C18柱,应用梯度洗脱程序进行色谱分离(体积流量0.2 m L/min),应用液质联用(LC-MS)技术检测。结果大鼠ig人参总皂苷后,血浆中可测得6种人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc、Rd、Re和Rg1),其中二醇型的人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc和Rd)的体内暴露程度及半衰期显著高于三醇型的人参皂苷(Re和Rg1)。结论建立的人参皂苷血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中各人参皂苷的测定及人参总皂苷的药动学研究。

HPLC同时测定人参药性菌质中8种皂苷含量

目的:建立一种可以同时测定人参药性菌质中8种人参皂苷(人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rf,人参皂苷Rh1,人参皂苷Rb1,人参皂苷Ro,人参皂苷Rb2,人参皂苷Rd)含量的HPLC方法。方法:采用高效液相法,Inertsil ODS-SP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.4%磷酸水梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长203 nm,柱温30℃,测定人参药性菌质8种皂苷的含量。结果:8种单体皂苷在100 min内可良好分离,线性关系良好(R2>0.999 7),平均加样回收率分别为100.15%,101.54%,101.87%,100.88%,102.10%,102.84%,101.38%,101.23%,RSD分别为1.6%,2.3%,1.9%,2.1%,1.5%,0.8%,2.7%,1.6%。结论:该研究提供了一种能方便、简单、准确、重复性好的HPLC分析人参药性菌质中8种人参皂苷含量的方法,可为人参药性菌质成分转化研究的质量标准制定提供科学依据。

在线二维多中心切割液相色谱法测定三七、人参及其相关产品中8种人参皂苷

目的基于一法多用策略,建立了在线二维多中心切割液相色谱同时测定三七、人参及其相关产品中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd的方法。方法按照产品的不同类别和制备工艺,分别采用相应的样品制备方法,对于原药材及其复方中药固体制剂,采用加压溶剂萃取法,分别采用三氯甲烷和水饱和正丁醇的2步溶剂提取;优化了一维和二维色谱分离条件,包括色谱柱选择、梯度洗脱等,分别采用Phenyl-x和C18柱作为一维和二维色谱柱,根据各目标物在一维色谱柱上的出峰时间,设置切割时间窗口,将各组分分别转移至6个定量环中,交替储存目标物馏分。第二维分离采用2.6μm颗粒的核-壳柱实现了8次的快速循环分离,完成8个目标物的测定。结果 8种目标待测物在药材、提取物和中药复方等基质均可获得较好的分离和定量,线性相关系数r>0.999,连续进样的精密度RSD在0.52%~1.53%,方法回收率在94.57%~103.47%,检出限在0.041~0.18μg/m L。结论本方法可准确对不同样品基质中的8种人参皂苷进行定量测定,结合8种人参皂苷的相对比例变化,可对人参、三七及其相关产品进行质量评价。

生态因子对人参皂苷合成及其关键酶基因表达的影响

目的研究生态因子和人参皂苷合成关键酶表达对人参皂苷合成、积累的影响。方法以人工栽培的4年生人参为研究对象,用实时荧光定量PCR法对在不同生长时期根组织中8个关键酶基因(HMGR、FPS、SS、SE、DS、β-AS、CYP82D47、CYP716A47)表达量进行测定;采用HPLC法测定根中8种单体皂苷(人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd)的量;以小型气象站对人参样地气象数据进行采集;采用SPSS软件进行相关性分析。结果人参皂苷合成关键酶基因在人参皂苷积累的重要时期(开花期至果熟期)的表达高于果后参根生长期和枯萎期,人参皂苷合成关键酶基因的表达相互影响,协同增减,人参根组织中关键酶基因的表达对人参皂苷积累多表现出了正相关关系;人参根中人参皂苷Rg_1、Rb_1、Re、Rc量较高,8种单体皂苷量动态变化趋势并不相同;温度、光合有效辐射、土壤水势是影响根部人参皂苷合成的重要生态因子,温度与人参皂苷Rb_1、Rd显著负相关(P<0.05),光合有效辐射对人参皂苷Rg_1的生成有显著的促进作用(P<0.05),土壤水势与人参皂苷Rb_1显著负相关(P<0.05);灰色关联度分析结果表明温度、光合有效辐射、相对湿度是影响人参皂苷量的主导生态因子,人参皂苷合成关键酶基因的表达是次要因子,在生态因子主导下人参皂苷合成关键酶基因调控人参皂苷的合成与积累。生态因子与关键酶基因的表达共同调控了人参皂苷的合成,对人参皂苷的积累有重要影响。结论明确了人参皂苷合成关键酶基因表达和人参皂苷量在人参中的动态变化,为人参皂苷合成生理生态机制的明晰及对人参药材质量的调控提供了理论依据。

HPLC法测定注射用益气复脉(冻干)中的4种低含量人参皂苷

目的建立一种同时测定注射用益气复脉(冻干)(YQFM)中4种皂苷(人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro和人参皂苷Rg5)含量的HPLC法。方法用Pro Elut PLS固相萃取柱预先处理样品,然后采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温26℃,检测波长203 nm,进样量10μL。结果人参皂苷Rf(0.008 96~0.224 mg/mL),人参皂苷Rc(0.009 84~0.246 mg/mL),人参皂苷Ro(0.010 06~0.251 5 mg/mL),人参皂苷Rg5(0.002 61~0.026 1 mg/mL)线性良好;准确度试验(n=6)中,人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro和人参皂苷Rg5的平均回收率分别为93.9%、91.8%、97.4%和87.8%;20批YQFM中人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro和人参皂苷Rg5平均含量分别为0.233 3(0.195 2~0.271 1 mg/g)、0.438 4(0.325 8~0.497 1 mg/g)、0.739 6(0.615 8~0.910 8 mg/g)、0.066 1 mg/g(0.038 2~0.087 8 mg/g)。结论所建立的方法简单可靠,可用于测定YQFM中人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro和人参皂苷Rg54种皂苷的含量测定。

一测多评法同时测定红参中11种人参皂苷的含量

目的建立一测多评法(quantitative analysis single-marker,QAMS)测定红参药材中11种皂苷类成分的含量,为红参质量控制提供科学依据。方法采用HPLC法,Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.3 mL/min,柱温30℃,波长203 nm。以人参皂苷Rb1为参照物,建立其与人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3的相对校正因子,外标法与QAMS分别测定11个成分含量。结果在一定线性范围内,人参皂苷Rb1相对人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3的相对校正因子重复性好,2种方法所得11种成分的含量无明显差异,实验得相对校正因子可供参考。结论本研究建立的QAMS法,快速、简便、重复性好,可为红参药材的质量控制提供参考。

红参中5种人参皂苷含量的超高效液相色谱法同时测定

目的建立超高效液相色谱法同时测定红参中人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1和Ro含量测定的方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1×100 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速0.4ml·min^(-1),检测波长为203nm,柱温为40℃。结果 5种人参皂苷在相应的范围内呈良好的线性关系(r≥0.9999),平均加样回收率(n=9)分别为98.85%、98.42%、98.51%、99.63%和98.80%,RSD分别为1.2%、1.5%、1.3%、0.8%和0.9%。结论该方法操作简单,高效,准确,可靠,可用于红参的质量控制。

HPLC-ESI-MS/MS法同时测定珠子参中15种皂苷类化合物

目的 建立了高效液相色谱-电喷雾三重四极杆质谱法（HPLC-ESI-MS/MS）同时测定珠子参中15种皂苷类化合物（人参皂苷Rb2、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rh2、人参皂苷F2、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rf、三七皂苷R1、姜状三七皂苷R1、竹节参皂苷IVa）的检测方法。方法 采用Waters Sunfire TMC18色谱柱（150 mm×1.5 mm,5μm）,以含0.05%甲酸的乙腈-水（10∶90）为流动相,梯度洗脱分离,HPLC-ESI-MS/MS多反应监测模式（MRM）检测,外标法定量。优化了色谱分离条件、质谱去簇电压（DP）、碰撞能量（CE）和碰撞池出口电压（CXP）等参数,并考察了浓缩温度、提取时间等对提取率的影响。结果 15种皂苷类化合物在0.000 9～2 952.592 3μg/m L线性关系良好,r=0.999 6,检出限范围为0.003～626.554 ng/m L,定量限为0.075～1 762.150 ng/m L,平均加样回收率在98.15%～101.12%,RSD为0.82%～2.15%。结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,可以对珠子参中多种皂苷类化合物进行分析鉴定。

参麦注射液中有效成分的含量测定

目的：测定参麦注射液中主要有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf和人参皂苷Rb1的含量。方法：采用高效液相色谱法进行梯度洗脱,色谱柱为BDS Hypersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）,流动相为乙腈：水=25：75（0~40 min）,35：65（40~70 min）,检测波长为210 nm,进样量为15μL,流速为1.0 m L/min,柱温为35℃。结果：人参皂苷Rg1在0.3985~3.985μg（r=0.9998）、人参皂苷Re在0.4104~4.104μg（r=0.9997）、人参皂苷Rf在0.2998~2.998μg（r=0.9998）、人参皂苷Rb1在0.6042~6.042μg（r=0.9998）范围内具有稳定的线性关系;平均回收率分别为96.97%、98.47%、96.62%、98.55%（n=6）,RSD值分别为1.36%、1.22%、1.54%、1.67%。结论：高效液相色谱法用于参麦注射液有效成分的含量测定中,方法简单可靠,重复性好,含量测定准确,灵敏度高,可以作为参麦注射液含量测定和质量控制的方法之一。