人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒的制备工艺

以人参皂苷Rg_(1)为原料、羟丙基-β-环糊精为载体、人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒粒径为评价指标,通过单因素试验、正交试验优化制备工艺,制备人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒;应用红外光谱、扫描电镜、X射线衍射、热质量分析、体外缓释试验,对人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒进行表征。结果表明:人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒的最优制备工艺——m(人参皂苷Rg_(1))∶V(水)为1 g∶20 mL、m(羟丙基-β-环糊精)∶m(人参皂苷Rg_(1))为4 g∶1 g、反应温度为25℃、反应时间为45 min;制备的人参皂苷Rg_(1)水溶性纳米颗粒平均粒径为(405±20)nm,具有良好的水溶性和体外释放效果。

HPLC法测定人参三七颗粒中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的:建立同时测定人参三七颗粒中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1和三七皂苷R_1含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Sunfire C_(18)(150mm×4.6mm,5μm)分析柱.流动相以乙腈-水梯度洗脱;检测波长为203nm;柱温30℃;流速1.0ml·min^(-1)。结果:人参皂苷Rg_1,Re,Rb_1和三七皂苷R_1之间有较好的分离度,4种成分在线性范围內与峰面积之间线性关系良好,人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1和三七皂苷R_1加样回收率分别为99.83%,97.84%,98.43%,97.34%,RSD分别为2.08%,1.66%,1.73%和1.42%(n:5)。结论:本方法可同时测定人参三七颗粒中的人参皂苷Rg_1,Re,Rb_1和三七皂苷R_1含量。

人参皂苷Rg1纳米颗粒对缺血性脑卒中后血管新生的干预作用

目的人参皂苷Rg1纳米颗粒(Rg1-NPs)已被证实能够主动靶向脑微血管内皮细胞(BMECs),文章进一步观察Rg1-NPs对缺血性脑卒中后血管新生的干预作用。方法制备耦联单克隆抗体OX26的纳米颗粒并用其包裹人参皂苷Rg1。在培养的BMECs细胞中分别加入PBS(对照组)、Rg1(Rg1组)和Rg1-NPs(Rg1-NPs组),采用MTT法、嵌套小室方法和小管形成实验分别检测Rg1-NPs对BMECs增殖、迁移和成管能力的影响。结果4℃储藏条件下人参皂苷Rg1泄露率为(5.98±0.58)%,在常温储藏条件下人参皂苷Rg1泄露率为(13.64±1.84)%。MTT实验结果显示,Rg1-NPs组(0.56±0.03)和Rg1组(0.49±0.02)BMECs细胞的增殖皆高于对照组(0.44±0.01),其中Rg1-NPs组BMECs细胞的增殖高于Rg1组(P<0.05)。嵌套小室方法检测的结果显示,Rg1-NPs组(55.33±5.03)和Rg1组(43.67±2.08)迁移的细胞数量均高于对照组(35.00±3.00),其中Rg1-NPs组迁移的细胞数量高于Rg1组,差异具有统计学意义(P<0.05)。小管形成实验结果显示,Rg1-NPs组和Rg1组管腔形成的网眼、点和管腔长度明显均高于对照组,其中Rg1-NPs组管腔形成的网眼、点和管腔长度高于Rg1组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论Rg1-NPs能显著促进BMECs的增殖、迁移和成管能力,从而改善缺血性脑卒中后的血管新生。

人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用及其分子机制

目的探究人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用及分子机制。方法选取22~24 d SD的大鼠提取卵巢颗粒细胞进行原代培养,应用顺铂诱导建立卵巢早衰模型。设置正常组,模型组,人参皂苷Rg_(1)低浓度组、中浓度组、高浓度组和雌二醇(E2)组。HE染色及免疫细胞化学法进行颗粒细胞鉴定;CCK8法检测人参皂苷Rg_(1)作用24 h、48 h对顺铂损伤颗粒细胞的保护作用;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western blot法检测FSHR、PI3K、p-AKT、AKT、Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果细胞形态观察和胞质FSHR表达检测结果均表明所提取细胞为卵巢颗粒细胞;顺铂处理12 h后,颗粒细胞增殖率呈剂量依赖性下降,而给予人参皂苷Rg_(1)后,细胞增殖率下降被显著抑制,且呈剂量和时间依赖性;与模型组比较,人参皂苷Rg_(1)和E2处理后卵巢颗粒细胞中FSHR、PI3K、p-AKT/AKT及Bcl-2/Bax蛋白表达水平显著上升,而PI3K抑制剂干预后,Bcl-2蛋白表达显著下降。结论人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤的卵巢颗粒细胞具有保护作用,该保护作用可能通过激活FSHR/PI3K/AKT通路,抑制卵巢颗粒细胞凋亡实现。

人参皂苷Rg_(3)和大黄酸纳米乳的制备及其联合aPD-L1治疗三阴性乳腺癌的药效学研究

目的根据中医治疗肿瘤时提倡的“扶正祛邪”治则,选用中药人参和大黄的主要成分人参皂苷Rg_(3)(ginsenoside Rg_(3),G-Rg_(3))和大黄酸(rhein,Rhe)进行组合,制备G-Rg_(3)/Rhe纳米乳(G-Rg_(3)/Rhe NE),同时提高G-Rg_(3)和Rhe溶解度以利于注射给药,并利用该纳米乳联合程序性死亡受体配体1单抗(anti-programmed cell death ligand 1,aPD-L1)治疗三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)。方法采用紫外分光光度法分别测定G-Rg_(3)和Rhe在不同辅料中的溶解能力,筛选出合适的乳化剂、助乳化剂和油相。利用伪三元相图考察乳化剂与助乳化剂质量比(Km值)对纳米乳体系的影响,根据形成纳米乳区域面积大小选择适宜的Km值,优选G-Rg_(3)/Rhe NE的处方,并对其进行表征和稳定性评价。选用4T1Fluc原位乳腺肿瘤小鼠模型,评价G-Rg_(3)/Rhe NE联合aPD-L1抗TNBC的效果。结果G-Rg_(3)/Rhe NE的优化组分比为聚氧乙烯氢化蓖麻油EL35-聚乙二醇400-辛癸酸甘油酯-水,其质量比为1.33∶2.67∶2.80∶12.50,Km值为1∶2,G-Rg_(3)/Rhe NE的平均粒径为(84.8±1.1)nm,多分散性系数(polydispersity index,PDI)为0.21±0.02,ζ电位为(−11.30±0.43)mV。载药纳米乳中G-Rg_(3)、Rhe的包封率分别为96.51%、97.47%,两药共载的载药量为0.75%。G-Rg_(3)/Rhe NE联合aPD-L1,能显著抑制荷4T1Fluc小鼠的肿瘤生长。结论G-Rg_(3)/Rhe NE粒径均一、稳定性好,可联合aPD-L1增强其抗TNBC的效果。

HPLC-DAD同时测定少阳感冒颗粒中8个成分的含量

目的 建立同时测定少阳感冒颗粒中黄芩苷、甘草苷、甘草酸铵、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、6-姜辣素、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法 采用Waters Symmetry C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min;柱温为30℃;检测波长为280 nm(黄芩苷,6-姜辣素),237 nm(甘草苷,甘草酸铵),210 nm(人参皂苷Rg_(1),人参皂苷Re,柴胡皂苷a和柴胡皂苷d);进样量为20μl。结果 黄芩苷、甘草苷、甘草酸铵、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、6-姜辣素、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d分别在进样量为0.151~3.025μg,0.060~1.210μg,0.090~1.803μg,0.040~0.803μg,0.046~0.911μg,0.070~1.401μg,0.086~1.713μg,0.012~0.242μg(r≥0.9993)范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为99.1%,99.0%,100.7%,98.7%,101.1%,100.6%,101.6%,98.8%(RSD<2.0%,n=6)。结论 该方法灵敏度高,专属性好,可用于少阳感冒颗粒的质量评价。

一测多评法测定芪白平肺颗粒中8种皂苷类成分

目的 建立一测多评法（QAMS）测定芪白平肺颗粒中8种皂苗成分的分析方法。方法 以芪白平肺颗粒为研究对象,以人参皂苷Rb_1为内参物,计算人参皂苷Re、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、黄芪甲苷、人参皂苷Rd与人参皂苷Rb_1的相对较正因子（f）,通过f计算芪白平肺颗粒中7种成分,并在10批芪白平肺颗粒中进行验证,比较该方法与外标两点法测定结果的相似度。结果 人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rc、Rb2、Rd、黄芪甲苷分别在进样量为0.416 0-4.992、0.315 4-3.785 2、0.259 6-3.115、0.385 2-4.622、0.222 8-2.674、0.193 2-2.318、0.183 5-2.202、0.574 6-6.895μg线性关系良好,f值分别为1.244、1.075、1.133、1.090、1.071、1.070、0.967,且在不同条件下重复性良好。QAMS法的计算结果与外标两点法的测定结果无显著性差异,再验证结果也无显著性差异,实验所得的f值可信。结论 建立的QAMS可以准确、快速地实现芪白平肺颗粒中多种皂苷类成分的定量测定。