人参蛋白对阿尔茨海默病小鼠肠道菌群及BDNF/TrkB信号通路的影响

目的探讨人参蛋白对阿尔茨海默病小鼠肠道菌群及BDNF/TrkB信号通路的影响。方法采用D-半乳糖/AlCl_(3)联合诱导建立阿尔茨海默病模型,小鼠随机分为正常一组、正常二组、模型一组、模型二组、人参蛋白组、菌群移植组,采用Morris水迷宫实验评价学习记忆能力,Western blot法检测脑组织APP、p-Tau、BDNF、TrkB、p-TrkB蛋白表达,16S rDNA检测粪便菌群多样性。结果人参蛋白、菌群移植可缩短小鼠逃避潜伏期(P<0.05),增加穿越平台次数(P<0.05),降低脑组织APP、p-Tau蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高BDNF、p-TrkB、p-TrkB/TrkB蛋白表达(P<0.05,P<0.01),减少拟普雷沃菌属、瘤胃球菌科_UCG-014、普雷沃氏菌科_UCG-001、瘤胃球菌属_1丰度(P<0.05,P<0.01)。结论人参蛋白抗阿尔茨海默病的作用机制可能是调节肠道微生物多样性激活BDNF/TrkB信号通路。

人参蛋白抗辐射损伤作用研究

目的研究人参蛋白的抗辐射损伤作用。方法以^(60)Co-γ射线一次性照射小鼠全身,观察人参蛋白对照射小鼠外周血白细胞数,骨髓细胞微核数,红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,肝脏丙二醛(MDA)含量以及胸腺、脾脏指数的影响。结果人参蛋白能增加辐射后小鼠外周血白细胞数,减少骨髓细胞微核数,增加红细胞SOD活性,抑制肝脏MDA含量升高,提高胸腺及脾脏脏体指数。结论人参蛋白对γ射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。

人参蛋白对小鼠抗疲劳作用的研究

目的:研究人参蛋白对小鼠的抗疲劳作用。方法:选用昆明小鼠,经灌胃给予人参蛋白0.1,0.2,0.4g/kg,同时设空白对照组,连续灌胃30d。分别观察小鼠的体重变化情况、负重游泳时间、血乳酸、肝糖原和血清尿素氮的含量。结果:人参蛋白能明显延长小鼠游泳时间、降低血乳酸值、增加肝糖原及血清尿素氮含量。结论:人参蛋白具有增强小鼠抗疲劳功能的作用。

人参蛋白对β淀粉样蛋白_(1-40)和H_2O_2损伤神经元的保护作用及其机制

目的:探讨人参蛋白(GP)对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)和过氧化氢(H2O2)诱导神经元损伤的影响,阐明GP对神经元的保护作用及其机制。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,培养12d后,分别采用Aβ1-40(30μmol·L-1)和H2O2(200μmol·L-1)诱导神经元损伤,并随机分为模型组(Aβ1-40模型组与H2O2模型组,不加药物)、GP组和GP含药血清组。采用MTT法检测各组神经元存活率;试剂盒法检测细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)水平;Hoechst 33342/PI荧光染色检测细胞凋亡与坏死率。结果:倒置荧光显微镜,Aβ1-40和H2O2处理后,神经元数量明显减少,轴突缩短或消失,胞体变圆、缩小,大小不等,核固缩,核染色质聚集;Heochst 33342染色呈现高蓝光;部分细胞PI染色呈现高红光。加入GP及其含药血清后,神经元数量增多,胞体增大,细胞核着色形态为圆形、淡蓝色,PI阳性细胞数量减少。MTT法,GP组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),GP含药血清组与模型组无显著差异(5%GP含药血清组除外,P>0.05);试剂盒法,GP组细胞培养上清液中NOS活性与NO水平明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);Hoechst 33342/PI法,GP及其含药血清组细胞凋亡率低于模型组,以GP组差异更明显(P<0.05或P<0.01),GP及其含药血清组细胞坏死率与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GP具有神经保护作用,作用机制与减少NOS活性、降低NO水平、抑制神经元凋亡有关。

人参蛋白四种提取方法的比较研究

通过对人参蛋白的四种提取方法(盐析法、丙酮沉淀法、聚乙二醇沉淀法、中空纤维膜过滤法)进行比较,采用SDS-PAGE电泳法、Bradford蛋白纯度检测法获得相关数据。结果表明,聚乙二醇沉淀法和中空纤维膜过滤法收率最高;中空纤维膜过滤法与盐析法纯度最好;中空纤维膜过滤法的电泳条带最完整清晰。

利用快速溶剂萃取方法提取人参蛋白的研究

目的该研究采用快速溶剂萃取装置(ASE)萃取人参蛋白,并与传统浸提法进行比较研究,建立了人参蛋白质的最佳提取工艺。方法加入捣碎的鲜人参10g,萃取溶剂为低浓度的KOH溶液,温度50℃,静态萃取时间5m in,循环3次,萃取体积100m l。结果人参蛋白的提取率为84.08%。而采用传统浸提法,人参蛋白提取率为72.77%。结论采用快速溶剂萃取方法提取人参蛋白要大大优于传统的浸泡提取方法。

SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱法研究人参蛋白热稳定性

目的研究人参蛋白在不同加热温度及时间下的热稳定性。方法采用中性缓冲液抽提和硫铵分级沉淀法提取人参蛋白,在不同加热温度及时间条件下,对人参蛋白进行SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱分析。结果人参蛋白随着加热温度的升高而发生聚集和解聚;在50℃时,人参蛋白会形成可溶性的大分子聚合物,这一聚合物的浓度随加热时间的延长而不断升高。结论人参中各种蛋白亚基的热敏感性各不相同。

人参蛋白对小鼠免疫功能影响的研究

目的:探讨人参蛋白对小鼠免疫功能的影响。方法:选用昆明小鼠,分别进行对二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发性超敏(DTH)反应实验、小鼠炭廓清实验、耐缺氧实验及常温游泳实验,并测定肝脏SOD、MDA含量。结果:人参蛋白对DNFB致小鼠耳肿胀具有明显增强作用(P<0.01),可明显提高碳廓清实验小鼠吞噬指数,增加小鼠脾和胸腺脏器指数(P<0.01),延长小鼠游泳时间及耐缺氧时间(P<0.05),提高肝脏SOD含量并降低MDA含量(P<0.05)。结论:人参蛋白具有增强小鼠细胞免疫、单核—巨噬细胞功能、增加免疫器官重量、耐缺氧、抗疲劳、抗氧化作用。

人参蛋白对Hep-2细胞增殖影响的比较

目的:比较人参蛋白对人喉癌细胞(Hep-2)增殖的影响。方法:采用中性缓冲液浸提法制备人参蛋白Ⅰ,蛋白Ⅰ经沸水浴处理、等电点沉淀,分别制备得到蛋白Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;采用MTT法检测细胞活性。结果:人参蛋白Ⅰ及人参蛋白Ⅲ对Hep-2细胞增殖具有明显抑制作用(P〈0.01),人参蛋白Ⅱ及人参蛋白Ⅳ对Hep-2细胞增殖无明显影响。结论:人参蛋白是人参的主要活性成分之一,其对Hep-2细胞增殖的影响与蛋白制备方法密切相关。

梯度胶对人参蛋白双向电泳分离效果的影响

为了建立高质量、高分辨率人参蛋白双向电泳图谱来对人参蛋白进行功能分析与研究,提出一种利用双向梯度胶电泳技术.第一向等电聚焦电泳分离后,第二向分别采用12.5%浓度的均一胶和10%～12.5%、12.5%～15%、10%～15%三种不同浓度的SDS-PAGE梯度胶来获取人参蛋白双向电泳图谱,并利用Image Scanner和Image Master 2D Platinum version6.0对图像进行扫描及比较分析.结果表明,采用10%～15%浓度梯度胶获得双向电泳图谱中蛋白点圆滑、形状规则,分离效果好;有效地减少了人参中高丰度蛋白对中低丰度蛋白的掩盖,Mw>75 kDa的可检测到的低丰度和大分子量蛋白点数明显增加.研究结果为高质量人参蛋白表达图谱的建立奠定了良好的实验基础,同时也为其它五加科植物蛋白质组学研究工作的开展提供了方法学上的指导.

人参蛋白真空冷冻干燥技术工艺研究

目的通过真空冻干保护剂的筛选和冻干曲线的优化,建立人参蛋白冻干的最佳工艺.方法以外观、色泽、再分散性为指标,考察不同种类和浓度的冻干保护剂对人参蛋白样本的影响,筛选出最佳保护剂;采用电阻法检测其共熔点,在此基础上,以T-SOD酶活力为指标,优化样本,解析干燥程序,以建立人参蛋白样本的冻干曲线.结果加入5%甘露醇的冻干保护剂,人参蛋白冻干样本外观、形态、再分散性较好;通过检测确定人参蛋白样本的共熔点为-4℃;经过优化后建立的冻干曲线为-40℃预冷2 h后,6 h内升温至-10℃,随后2 h升温至-4℃,维持10 h,然后1 h内升温至5℃,再1 h升温至15℃,维持2 h.结论通过对人参蛋白样本冻干保护剂和冻干曲线的优化,确定了人参蛋白样本最佳的冻干工艺.

人参蛋白的提取和体外免疫调节活性研究

目的提取人参蛋白,并研究其对小鼠巨噬细胞的免疫调节活性。方法采用中性盐缓冲溶液提取人参蛋白,用lowry法测定蛋白含量并利用SDS-PAGE电泳法测定人参蛋白的亚基分子量分布。以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为模型研究人参蛋白对细胞吞噬能力的影响,刺激产生NO含量,释放PGE2、TNF-α来考察其对巨噬细胞免疫活性的影响。结果用lowry法测定人参蛋白的蛋白含量为1.95 mg/m L,人参蛋白的亚基分子量从8 kD到66 kD。结论人参蛋白可通过增强巨噬细胞吞噬能力,释放免疫因子等方面增强巨噬细胞免疫活性。

人参蛋白质不同提取方法及含量的比较

[目的]优选人参蛋白质提取的最佳方法,并比较不同生长年份对人参蛋白质含量的影响。[方法]比较丙酮沉淀法、聚乙二醇6000沉淀法、聚乙二醇20000沉淀法、酚提取法、Trizol提取法5种人参蛋白质的提取方法,及不同生长年份的人参蛋白质,采用Bradford方法测定蛋白质含量,SDS-PAGE电泳鉴定蛋白。[结果]丙酮提取法得到的蛋白质纯度最高,电泳条带最清晰完整,且人参蛋白质的含量随生长年份增加而升高。[结论]丙酮沉淀法是一种较好的适用于人参蛋白质提取的方法,5年生人参蛋白质含量最高。

人参蛋白质对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的研究人参蛋白质对乳腺癌MCF⁃7细胞的影响。方法采用CCK⁃8法测定不同质量浓度(0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/mL)人参蛋白质分别作用MCF⁃7细胞24、48、72 h后的细胞增殖抑制;采用流式细胞术检测人参蛋白质处理48 h后细胞的周期;采用DAPI染色法观察人参蛋白质处理48 h后的细胞凋亡形态;Annexin V/FITC双染法检测人参蛋白质处理48 h后的细胞凋亡。结果人参蛋白质能抑制MCF⁃7细胞的增殖,且呈浓度及时间依赖性,作用24、48、72 h后的IC50值分别为5.21、2.60、1.11 mg/mL。人参蛋白质可将MCF⁃7细胞周期阻滞在G1期,并能诱导MCF⁃7细胞的凋亡。结论人参蛋白质对人乳腺癌MCF⁃7细胞具有显著地抗肿瘤作用。

人参蛋白的药理作用

人参是我国传统中药,人参蛋白是其重要组成成分。目前已发现的人参蛋白在影响细胞增殖、抗肿瘤、抗氧化衰老、提升免疫和降血脂等方面具有重要作用,且能够显著改善学习和记忆,对阿尔茨海默症和帕金森等疾病具有显著治疗作用,有被深入研究和开发的潜力。本文结合近年关于人参蛋白和人参多肽作用的研究,综述了人参蛋白的药理作用,为其进一步开发和利用提供参考。

人参蛋白的等电聚焦电泳分析

采用薄层等电聚焦的方法将人参水溶性蛋白分成20多个组分,并测定出绝大部分人参水溶性蛋白的PI在4～7范围内。以激光扫描法测出各组分的百分含量。用Coomassie brilliantblue及银染两种方法染色比较,银染的灵敏度大大超过了常规的Coomassie brilliantblue的染色对法。

人参蛋白对高脂血症模型大鼠的降血脂作用

目的探讨人参蛋白对高血脂模型大鼠的降血脂作用。方法 :采用高脂饲料喂养建立高血脂大鼠模型,以低、中、高三个剂量人参蛋白灌胃,测定大鼠体重和血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,同时对大鼠进行肝功能检查。结果 :给予高脂饲料后大鼠体重和血脂显著升高,人参蛋白能够明显降低高血脂模型大鼠血清TC及TG含量,有升高模型大鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)含量和降低碱性磷酸酶(ALP)含量的作用。结论 :人参蛋白对高脂血症大鼠具有降血脂的作用,部分剂量有改善模型动物肝脏功能的作用。

人参蛋白对小鼠的耐缺氧及抗氧化作用

目的:研究人参蛋白对小鼠耐缺氧及抗氧化能力的影响。方法:通过常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、急性脑缺血性缺氧三项指标评价人参蛋白对小鼠的耐缺氧作用;通过测定肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化,研究人参蛋白对小鼠体内抗氧化能力的影响。结果:与对照组比较人参蛋白组小鼠常压耐缺氧存活时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性缺氧张口喘气时间均延长;同时人参蛋白能降低肝脏和血清中丙二醛(MDA)的含量,并能提高肝脏和血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结论:人参蛋白对小鼠耐缺氧能力具有显著增强作用,对D-半乳糖造模小鼠有一定的抗氧化作用。

人参蛋白研究进展

人参作为一种名贵中药材,拥有悠久的药用历史。长期以来除对人参皂苷等少数几种物质进行广泛研究外,对人参蛋白也进行了一定研究。已从人参根中分离纯化出具有重要生物学活性的多肽及蛋白质,以及重要生物合成酶蛋白并开展了相应的人参代谢工程研究。人参根中差异蛋白的发现为人参蛋白研究、品质鉴定及质量控制提供参考。目前人参蛋白的研究已逐渐成为人参研究的热点之一,就人参蛋白的研究进展进行了整理归纳,以期对人参蛋白的研究提供帮助。

人参蛋白对过氧化氢致神经元损伤的保护作用

目的:采用H2O2诱导小鼠神经元损伤,研究人参蛋白(GP)对神经元的保护作用。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,通过倒置荧光显微镜观察细胞形态,β-半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰老,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342/PI双染色法检测细胞凋亡与坏死,荧光定量RT-PCR实验检测凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达。结果:H2O2致细胞出现轴突缩短或消失,胞体变圆缩小,大小不等,核固缩,核染色质聚集等形态学变化,细胞存活率降低,Hoechst33342及β-半乳糖苷酶染色阳性;人参蛋白可改善细胞形态,增加细胞存活率,减少细胞凋亡与坏死,降低细胞衰老率。结论:人参蛋白对H2O2致神经元损伤具有保护作用,其机制与促进Bcl-2 mRNA表达,抑制Bax mRNA表达有关。