人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响

目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell实验测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞迁移及侵袭的影响;Western blot测定不同浓度人参皂苷Rg3对E2F1、MMP-2、MMP-9、BCL-2、Bax表达的影响。结果80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞存活率与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞凋亡率与空白对照组比较明显增加,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞迁移数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞侵袭数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组E2F1 mRNA与E2F1蛋白表达量相较空白对照组明显减少且,呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞中MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达量与空白对照组比较明显降低,BCL-2与空白对照组比较明显升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3能降低胃癌SGC-7901细胞增殖能力,抑制细胞迁移及侵袭能力,同时还促进SGC-7901细胞凋亡,且具有浓度依赖性,其作用机制可能通过E2F1因子下调MMP-2、MMP-9、BCL-2表达,上调Bax表达有关。

人参皂苷Rg3对骨质疏松大鼠骨代谢及肠钙吸收功能的影响

目的:探究人参皂苷Rg3对骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠骨代谢及肠钙吸收功能的影响。方法:60只SPF级雌性Wistar大鼠,按照随机数字法分为空白组、模型组、阳性组、实验组,每组大鼠各15只。除空白组外,其他大鼠均采用去势(OVX法)法制备OP大鼠模型。造模成功后,空白组及模型组生理盐水灌胃[10 mL/(kg·d)],阳性组给予阿仑膦酸钠维D3灌服(每周6.25 mg/kg),实验组给予人参皂苷Rg3[80 mg/(kg·d)]灌胃治疗,连续干预治疗12周。检测各组股骨、胫骨骨密度变化,酶联免疫法检测大鼠血清中骨保护素(osteoclastogenesis inhibitory factor,OPG)、Ⅰ型前胶原氨基末端肽(procollagen typeⅠNterminal propeptide,PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)、I型胶原交联C-末端肽(TypeⅠcollagen carboxy-terminal peptide,CTX-I)含量变化;原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法分析各组肠黏膜组织细胞凋亡情况;Masson法分析各组肠黏膜组织纤维病理改变;免疫组化法检测各组肠黏膜组织中维生素D膜相关快速反应结合蛋白(membrane-associated rapid response steroid-binding,1,25-D3-MARRS)蛋白表达;蛋白免疫印迹法及RT-PCR法检测各组Jagged1、Notch1、Hes1蛋白及mRNA表达水平。结果:大鼠造模后股骨、胫骨骨密度明显下降,血清中OPG、PINP、TRACP及CTX-I含量明显变化(P<0.05);肠黏膜组织病理发生明显改变,组织纤维化增强,细胞凋亡程度增加;肠黏膜组织1,25-D3-MARRS蛋白表达降低(P<0.05)。治疗后与模型组对比,阳性组及实验组大鼠股骨、胫骨骨密度明显升高,血清中OPG、PINP、TRACP及CTX-I含量明显改善(P<0.05);肠黏膜组织病理发生明显改善,纤维化降低,细胞凋亡程度降低;肠黏膜组织中Jagged1、Notch1、Hes1蛋白及mRNA表达明显改善(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg3能够提高OP大鼠骨密度,减轻肠黏膜组织细胞凋亡及组织纤维化,增加肠黏膜1,25D3-MARRS蛋白表达,改善肠道钙吸收。

人参皂苷 Rg3对人乳腺癌细胞紫杉醇化疗耐药的影响

目的:分析人参皂苷Rg3对人乳腺癌细胞紫杉醇化疗耐药的影响。方法:选择2021年1月至2022年12月为4研究时间段,经低浓度持续递增法建立乳腺癌紫杉醇(PTX)耐药细胞,稀释细胞浓度1×10^(4)个/mL,在96孔板中接种,在明确贴壁后,加入紫杉醇(150µM),分为5组,分别为空白对照组、PTX组、3组G-Rg3+PTX组,每组设3个平行样本。其中,3组G-Rg3+PTX组分别加入G-Rg3药物60µM、80µM、100µM,PTX组及G-Rg3+PTX组均加入PTX 150µM。待PTX组、加入不同浓度(60µM、80µM、100µM)的G-Rg3+PTX组,共4组人乳腺癌MCF-7细胞处理24 h后,检测4组吸光值(OD值),经Annexin-V/FITC和PI双染,流式细胞仪检测,利用GraphPad Prism 7.04计算半数抑制浓度(IC50)值和耐药指数(RI);其中,RI计算公式为RI=空白对照组耐药细胞IC50/亲本MCF-7细胞IC500。结果:经24 h处理后,空白对照组OD值(0.90±0.04),无IC50值、RI值;PTX组的OD值(0.40±0.06)、IC50值(725.60±5.85)µmol/L、RI值3.2;G-Rg3+PTX组60µM的OD值(0.21±0.06)、IC50值(686.68±5.36)µmol/L、RI值4.9;80µM的OD值(0.17±0.05)、IC50值(412.46±723)µmol/L、RI值6.7;100µM的OD值(0.14±0.04)、IC50值(235.87±5.93)µmol/L、RI值9.1。结论:人参皂苷Rg3能够影响人乳腺癌细胞紫杉醇的化疗耐药性,提升对癌症的抑制作用。

人参皂苷Rg3对乳腺癌骨转移大鼠疼痛的缓解作用及机制研究

目的:研究人参皂苷Rg3缓解乳腺癌骨转移大鼠痛觉行为的作用及机制。方法:采用大鼠乳腺癌细胞注入胫骨骨髓腔内构建乳腺癌骨转移疼痛模型;随机分成假性手术组、模型组以及人参皂苷Rg3给药组;连续3天静脉注射人参皂苷Rg3;记录大鼠痛觉行为学变化;分子对接分析人参皂苷Rg3与蛋白质的结合;免疫荧光和免疫印迹法检测各组动物脊髓组织炎症相关蛋白表达变化。结果:乳腺癌骨转移可导致骨组织损伤,诱发大鼠机械痛敏、热痛敏及自发痛。同时脊髓胶质细胞和NLRP3炎症小体激活,促炎因子IL-1β表达上调,抗氧化因子Nrf2和GPX4表达下降,线粒体氧化损伤相关蛋白DHODH和细胞色素C表达增加。人参皂苷Rg3给药后,大鼠机械痛、热痛和自发痛缓解,脊髓炎症信号下降,抗氧化Nrf2/GPX4信号增加,线粒体过氧化物信号下降。分子对接显示人参皂苷Rg3可结合Nrf2。结论:人参皂苷Rg3激活Nrf2介导的抗氧化反应,降低脊髓炎症,从而缓解癌痛。

人参皂苷Rg3治疗放射性直肠炎大鼠的作用机制研究

目的基于TNF-α/NF-κB及Caspase-8信号通路,研究人参皂苷Rg3(GRg3)治疗放射性直肠炎大鼠的机制。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、低剂量GRg3治疗组、中剂量GRg3治疗组、高剂量GRg3治疗组,每组8只。6MV X射线单次21.5 Gy腹部照射进行模型复制,照射后第8天开始给药,观察大鼠情况并称重,2周后腹主动脉取血并处死解剖。HE染色观察直肠组织病理学变化,酶联免疫吸附试验检测血清TNF-α、IL-4、IL-10水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测直肠组织IKK-β、IκB-α、Caspase-8基因表达,Western blotting检测IKK-β、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB p50、Caspase-8蛋白表达。结果照射后第6天,与对照组比较,其他各组大鼠体重明显降低(P<0.05),且除对照组外的其他组大鼠体重比较,差异无统计学意义(P>0.05);开始灌胃后,对照组大鼠体重逐步上升,模型组大鼠体重不断下降,地塞米松组和GRg3治疗组大鼠在治疗前3天体重较治疗前无明显变化,从第4天开始逐渐增长;与模型组相比,灌胃第8、14天,地塞米松组和高剂量GRg3治疗组大鼠体重明显升高(P<0.05)。治疗2周后,地塞米松组直肠组织结构完整,黏膜层见少量的炎症细胞浸润;低剂量GRg3治疗组直肠组织大范围溃疡,肠腺形状、大小不一,数量减少,并伴大量炎症细胞浸润,少量肠腺扩张,腺腔内可见坏死细胞碎片,损伤侵及黏膜下层,黏膜肌层及黏膜下层亦可见炎症细胞浸润;中剂量GRg3治疗组见少量黏膜上皮细胞坏死脱落,肠腺形状、大小不一,伴中等量炎症细胞浸润,少量肠腺扩张,腺腔内可见坏死细胞碎片;高剂量GRg3治疗组直肠组织结构完整,见黏膜层水肿,肠腺排列疏松,伴炎症细胞浸润。与对照组比较,模型组大鼠血清TNF-α水平升高(P<0.05),IL-4、IL-10水平降低(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组及高剂量GRg3治疗组血清TNF-α水平降低(P<0.05),IL-4、IL-10水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠直肠组织IKK-β、IκB-α及Caspase-8基因表达升高(P<0.05);经过不同的干预治疗后,与模型组比较,各治疗组IKK-β、IκB-α及Caspase-8基因表达均降低(P<0.05),且随着GRg3治疗剂量的升高各因子表达呈下降趋势;地塞米松组与高剂量GRg3治疗组IKK-β、IκB-α及Caspase-8 mRNA的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠直肠组织IKK-β、p-IκB-α、胞核NF-κB p50及Caspase-8蛋白表达升高(P<0.05),IκB-α、胞浆NF-κB p50蛋白表达降低(P<0.05);经过不同治疗后,与模型组相比,地塞米松及中、高剂量GRg3治疗组IKK-β、p-IκB-α、胞核NF-κB p50及Caspase-8蛋白表达均降低(P<0.05),IκB-α及胞浆NF-κB p50蛋白表达均升高(P<0.05)。中、高剂量GRg3治疗组与地塞米松组各因子蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论GRg3通过抑制IKK-β的表达,减少IκB-α的磷酸化,增加胞浆中NF-κB p50的滞留,减轻放射性直肠炎,促进肠道组织损伤修复;GRg3能抑制电离辐射引起的肠道细胞凋亡减轻炎症反应。

人参皂甙Rg3抑制卵巢癌SKOV3细胞生长的机制研究

目的探讨人参皂甙Rg3抑制卵巢癌细胞生长可能存在的分子机制。方法采用细胞克隆实验检测人参皂甙Rg3对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制效果;四氮唑蓝(MTT)比色法、流式凋亡、划痕实验、Transwell实验分别检测人参皂甙Rg3对SKOV3细胞凋亡、侵袭、迁移的影响;qRT-PCR法和Western blot法分别检测Rg3不同浓度作用下卵巢癌细胞中Zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因和蛋白的表达。结果人参皂甙Rg3对SKOV3细胞增殖抑制率升高(P<0.05),凋亡率显著上升(P<0.01),侵袭、迁移能力均显著下降(P<0.01),SKOV3细胞中EZH2的基因和蛋白随着Rg3浓度的增加表达量呈现明显的下降(P<0.01)。结论人参皂甙Rg3可能通过抑制EZH2的表达,促进卵巢癌细胞的凋亡,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭以及迁移的能力,为卵巢癌的临床治疗提供新思路。

黑参中人参皂苷Rg3的含量检测

目的建立HPLC法测定黑参中人参皂苷Rg3的含量,有效控制其内在质量。方法采用HPLC法对黑参中人参皂苷Rg3进行含量测定,色谱柱为Ultimate Polar RP(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)——0.01%磷酸水(B),梯度洗脱:0~5min(81%B);5~10min(76%B);10~30min(60%B);30~40min(50%B);40~60min(40%B),柱温:30℃,检测波长:203nm,流速:0.8 mL/min。结果人参皂苷Rg3含量在0.2~2μg时线性关系良好,回归方程为Y=59.819X-0.3441,R^(2)=0.9997(n=5),经测定黑参中人参皂苷Rg3的含量为0.201%。结论HPLC法测定黑神中人参皂苷Rg3的方法,可靠,稳定,简单,易行。建立了稳定的黑参中人参皂苷Rg3含量的测定方法,为黑参的质量控制和开发利用提供参考。

人参皂苷Rg3脂质体制备工艺优化

目的人参皂苷Rg3脂质体工艺优化研究。方法采用薄膜分散-超声法制备人参皂苷Rg3脂质体,通过正交试验,以包封率为评价指标,考察药物与大豆卵磷脂与胆固醇的质量比、水化体积、水化温度对人参皂苷Rg3脂质体的影响。结果人参皂苷Rg3脂质体的最佳制备工艺为药物与大豆卵磷脂与胆固醇用量比为1∶1∶6,水化体积为3 mL,水化温度40℃,此时包封率为85.05%。

人参皂苷Rg3复合水凝胶的制备及抗菌性能研究

目的选用人参皂苷Rg3为主要成分与透明质酸(Gel)水凝胶相结合,开发一种可以用于促进伤口愈合的伤口敷料。方法(1)制备负载Rg3的复合水凝胶,在乙酸溶液(0.5%w/v)中加入Cs并持续搅拌直至完全溶解,通过低温冻融的方法用P407包封Cs溶液。将HA添加到蒸馏水中,使用冷搅拌法包封P407和Cs,然后除去这些聚合物中的沉淀物,获得原位形成的水凝胶。(2)用扫描电子显微镜(SEM)检测,观察负载Rg3的Rg3-Gel的结构表征和性能表征。(3)进行复合水凝胶的体外抗菌实验,将实验组分为Blank、Blank+40℃、Gel、Rg3和Rg3-Gel组,分别进行体外抗菌实验。(4)负载Rg3的Rg3-Gel的抗菌性能体外研究—动物建模实验。本研究使用了30只健康雄性SD小鼠,无菌条件下,在每只小鼠的背部制造直径10mm的圆形全层创面。将这些小鼠随机分布在3组(n=10)中,I组未接受任何治疗(裸伤)的小鼠作为对照,II组用Blank-Gel治疗,Ⅲ组的小鼠伤口每天用Rg3-Gel治疗。结果在治疗后第4天,观察到所有动物的伤口大小都有一定程度的缩小,而Rg3-Gel组小鼠在第8、12和16天表现出最小的伤口面积。与空白凝胶组相比,Rg3-Gel组在整个愈合过程中的愈合率比其他组更快,第16天闭合率为90.68±1.3%,而原位水凝胶和对照组的伤口愈合率分别为87.63%和83.67%。结论Rg3-Gel可加速伤口愈合,将人参皂苷Rg3和透明质酸(Gel)水凝胶相结合,既可以利用微环境加速伤口愈合,又可以动态调节和响应伤口微环境的自适应性。

高效液相色谱法同时测定人参中人参皂苷F2和人参皂苷Rg3的含量

目的建立反相高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定人参中人参皂苷F2和人参皂苷Rg_(3)含量的分析方法。方法样品经高温高压蒸汽灭菌处理后,以0.4%磷酸水溶液:乙腈(90:10,V:V)为流动相,梯度洗脱,样品经C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,并于203 nm波长检测。结果人参皂苷F2在质量浓度8.46~84.56μg/mL之间呈现良好的线性关系,r^(2)=1.0000,加标回收率为97.54%~104.28%,相对标准偏差为2.4%;人参皂苷Rg_(3)在质量浓度18.61~139.60μg/mL之间呈现良好的线性关系,r^(2)=0.9999,加标回收率在96.42%~102.25%之间,相对标准偏差为2.0%。结论该方法前处理简捷、快速,色谱分析又能同时测定人参(药材)中人参皂苷F2和人参皂苷Rg_(3)含量,提高检测效率,可用于实验室对人参中人参皂苷F2和人参皂苷Rg_(3)的批量检测。

人参皂苷Rg3减轻帕金森病小鼠神经系统氧化应激损伤的作用机制

目的:探究人参皂苷Rg3减轻帕金森病(Parkinson′s disease,PD)小鼠神经系统氧化应激损伤的作用机制。方法:将60只C57BL/6小鼠分为对照组、PD组、低剂量干预组和高剂量干预组,每组15只。通过腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy1-4-phenvl-1,2,3,6-tetrahvdropvridine,MPTP)构建PD小鼠模型,建模前3天,低、高剂量干预组小鼠分别腹腔注射3、12 mg/kg人参皂苷Rg3,造模后继续干预28天,对照组和PD组腹腔注射等量生理盐水。各组小鼠腹腔注射第4、8、12天时进行爬杆实验和旋转实验评估运动能力;末次腹腔注射完成后,断颈处死小鼠取脑组织制成冰冻切片,免疫组化分析黑质纹状体中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达水平;酶联免疫吸附法测定黑质纹状体中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)水平;Western blot方法检测黑质纹状体中TH、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinoneoxidoreductase 1,NQO1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,PD组小鼠爬杆时间延长、旋转停留时间缩短、MDA水平升高,TH阳性率、SOD、GSH-PX活性、TH、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与PD组比较,低、高剂量干预组小鼠爬杆时间缩短,旋转停留时间延长,MDA水平降低,TH阳性率、SOD、GSH-PX活性、TH、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg3可能通过激活黑质纹状体中Nrf2/HO-1/NQO1通路,减轻PD小鼠神经系统氧化应激损伤,而改善其病理状态。

人参皂苷Rg3抑制非小细胞肺癌细胞重编程的机制研究

非小细胞肺癌(NSCLC)作为一种常见的肺部恶性肿瘤,其全球发病率和死亡率仍处于较高水平。尽管传统疗法在局部晚期和转移性NSCLC的治疗方面取得了一定进展,但鉴于肿瘤细胞具有免疫逃逸特性,治疗效果尚不理想。研究发现肿瘤细胞重编程是导致免疫逃逸的重要因素。人参皂苷Rg3作为人参的有效活性成分,是一种具有不同结构的天然小分子化合物,其主要作用为辅助抗肿瘤。通过抑制NSCLC细胞的重编程,人参皂苷Rg3的主要抗肿瘤免疫逃逸机制包括降低肿瘤细胞免疫检查点PD-L1的表达、抑制上皮间质转化(EMT)以及肿瘤细胞干性。本文将从上述三个方面对人参皂苷Rg3抑制非小细胞肺癌细胞重编程的机制展开论述。

人参皂苷Rg3对肺癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 :探讨人参皂苷Rg3对肺癌诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。 方法 :用MTT法检测不同浓度Rg3对VEC、肺腺癌SPC A 1细胞增殖及SPC A 1细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :Rg3浓度为 0 .0 313～0 .5mmol·L- 1 时 ,对VEC及SPC A 1细胞增殖没有直接影响 (P >0 .0 5 ) ;经 0 .0 313～ 0 .5mmol·L- 1 Rg3作用后 ,SPC A 1细胞条件培养液对VEC的增殖作用也不受影响 (P >0 .0 5 ) ;Rg3浓度为 0 .12 5～ 0 .5mmol·L- 1 时 ,其对SPC A 1细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用 (P <0 .0 1) ,抑制率为 16 .4 4 %～ 5 7.5 3%。结论 :人参皂苷Rg3对肺癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖具有抑制作用。

人参皂苷Rg_3对肿瘤血管生长调控因子蛋白表达抑制作用的研究

目的探讨中药单体人参皂苷20(R)Rg3对肿瘤血管生长调控因子(VEGF,bFGF,MMP2)蛋白表达的抑制作用。方法进行人肺腺癌细胞株A549、人脐静脉血管内皮细胞HUVEC304细胞株培养、10-6mol·L-1浓度Rg3药物干预72h,采用免疫组化、基因芯片技术,检测上述因子蛋白表达阳性率和灰度变化以及A549细胞基因的差异表达情况。结果Rg3干预后,A549细胞VEGF蛋白阳性表达率显著降低(P=0.03),VEGF,Flt,KDT以及MMP2蛋白阳性表达的强度较对照组均有显著下降(P<0.05),内皮细胞VEGF,Flt和KDT蛋白阳性表达的灰度较对照组均有显著下降(P<0.05)。基因芯片差异性表达显示其中14个基因下调,10个基因上调。结论Rg3可显著抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的血管生长调控因子蛋白表达,通过不同靶点作用于肿瘤细胞影响肿瘤新生血管的生成。

人参皂苷Rg3的拉曼光谱研究

人参皂苷是人参的有效化学成分,其中人参皂苷Rg3因具有显著的生理活性而备受关注。运用拉曼光谱的方法,对人参皂苷Rg3的两种异构体20-(R)-Rg3和20-(S)-Rg3进行了测量和分析。因20位羟基空间位置不同,20-(R)-Rg3与20-(S)-Rg3相比,归属于亚甲基的振动峰发生了明显的变化,表明两种异构体的堆积方式不同。归属于CC振动的1674cm-1峰的强度明显降低,表明在20-(S)-Rg3中,C27和C28较20-(R)-Rg3处于分子内部。对比拉曼光谱还发现,这一对异构体中糖环的空间结构基本相同。两种异构体拉曼光谱的明显差异,使得拉曼光谱技术成为鉴别人参皂苷Rg3异构体的一种快速、简便的分析方法。

人参皂苷Rg3抗肿瘤机制研究进展

人参皂苷Rg3是人参提取物中主要抗肿瘤成分,可通过多途径发挥作用,尤其抗肿瘤血管新生作用具有特色,被认为是中药血管新生抑制剂。目前该药的研究已初具规模,近年来已通过多角度研究阐述其部分作用机制,对该药抗肿瘤机制研究进展做一综述,以备临床参考。

人参皂苷Rg3诱导膀胱癌细胞系EJ的凋亡作用

目的:探讨Rg3抑制膀胱癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。方法:用一定质量浓度的Rg3处理膀胱癌细胞系EJ细胞,MTT法检测细胞增殖活力和抑制率50%的时候药物的浓度(IC50);Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞的形态;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率;免疫细胞化学观察caspase-3的表达变化;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。结果:Rg3抑制EJ细胞生长,呈浓度依赖关系,Rg3处理细胞48 h的IC50为125.5 mg.L-1;经150 mg.L-1Rg3处理细胞24 h和48 h后,观察到典型的凋亡细胞形态,即染色质凝集、核片段化、凋亡小体、核内致密的颗粒状荧光及caspase-3的表达增加;并呈时效依赖关系;用75 mg.L-1Rg3处理细胞24,48,150 mg.L-1的Rg3处理细胞48 h后,Rg3诱导了细胞凋亡和调节细胞周期,S期和G2/M期的细胞比率增加,G0/G1的细胞比率下降;凋亡率从对照组的(1.05±0.17)%分别上升到(8.41±0.98)%,(18.57±2.20)%和(33.98±1.64)%,琼脂糖凝胶电泳检测出典型的DNA梯形条带,其效应随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。结论:Rg3可通过诱导EJ细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。

人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长和凋亡的影响

目的研究人参皂甙Rg3在体外对低、中分化胃腺癌细胞株MKN-45和SGC-7901生长及凋亡的影响。方法取处于对数生长期的MKN-45和SGC-7901细胞,加入不同终浓度(20、30、40、50μg/mL)的人参皂甙Rg3分别培养24、48h或24、48和72h,以不加药细胞作为阴性对照。MTT法检测MKN-45和SGC-7901细胞生长抑制率;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测SGC-7901细胞凋亡率;流式细胞仪分析SGC-7901细胞周期;透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞的形态学改变。结果人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901和MKN-45细胞生长抑制率均明显高于对照组(P<0.05),且随药物浓度的增加和作用时间的延长而上升(P<0.05)。与对照组比较,人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901细胞凋亡率和G0/G1期细胞百分比均明显上升,且呈浓度和时间依赖性。透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞,可见典型的凋亡细胞结构。结论人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长具有抑制作用,且呈现一定的时效和量效关系,其机制可能与诱导胃癌细胞凋亡有关。

人参皂苷Rg_3对肿瘤放疗患者外周血淋巴细胞的体外免疫增强作用

目的 观察人参皂苷Rg3(Rg3)对肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞的免疫增强作用。方法 分离纯化肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞,与不同浓度Rg3共培养48 h或72 h后用流式细胞仪进行各项指标测定,观察Rg3对淋巴细胞增殖率、细胞膜表面分子表达率及Th1/Th2细胞的影响。结果 Rg3能增强ConA诱导的淋巴细胞增殖,增加HLA-DR,HLA-ABC,CD3-CD56+16等分子表达,使CD4+/CD8+及Th1/Th2向免疫增强的方向漂移。结论 Rg3能增强肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞的免疫功能,包括特异性和非特异性免疫。

人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜免疫力影响

[目的]观察人参皂甙Rg3对肿瘤化疗肠道黏膜损伤的治疗作用及其黏膜免疫机制。[方法]运用给小鼠原位接种C-26结肠癌并重复灌胃环磷酰胺建立肿瘤化疗肠道黏膜损伤的模型,观察人参皂甙Rg3对瘤重、抑瘤率及PP结面积影响,分离肠上皮内淋巴细胞,固有层淋巴细胞及PP结内的淋巴细胞,用免疫荧光染色及流式细胞仪分析黏膜免疫各部位T淋巴细胞亚群的变化。[结果]环磷酰胺组瘤重显著降低,抑瘤率约为37.6%,而环磷酰胺加Rg3组瘤重与环磷酰胺组比较差异无显著性。荷瘤及环磷酰胺都可显著降低PP结面积,而人参皂甙Rg3可明显减轻环磷酰胺对PP结面积的影响(P<0.01)。人参皂甙Rg3可使荷瘤和环磷酰胺作用下显著减少的固有层淋巴细胞中的CD4+细胞百分比显著增加(P<0.05),但对CD8+细胞百分比无明显影响。[结论]荷瘤及环磷酰胺可明显抑制肠道黏膜免疫功能,而人参皂甙Rg3能明显改善这种黏膜免疫抑制状态。人参皂甙Rg3对黏膜免疫的调节作用是扶正中药发挥作用的重要途径之一。