槟榔提取物体外诱导人口腔黏膜成纤维细胞增殖模型的建立

目的为研究口腔黏膜下纤维化的修复机制,建立体外人口腔黏膜成纤维细胞增殖模型。方法体外培养口腔黏膜成纤维细胞,并用波形蛋白、角蛋白免疫细胞化学方法鉴定;分别用0、5、50、100、150、200μg/mL浓度的槟榔提取液对培养的成纤维细胞诱导,MTT法检测细胞增殖。结果波形蛋白表达阳性,而角蛋白表达阴性;50、100μg/mL槟榔提取物促进口腔黏膜成纤维细胞增殖。结论培养的细胞为纯化的成纤维细胞,槟榔提取物诱导口腔黏膜成纤维细胞增殖的最佳浓度为50～100μg/mL。该模型可为进一步的研究提供实验基础。

人口腔黏膜成纤维细胞的原代培养和在聚乳酸羟基乙酸膜上的种植实验

目的探索人口腔黏膜成纤维细胞体外培养,观察其在聚乳酸羟基乙酸(PLGA)膜上生长情况。方法体外分离培养人口腔黏膜成纤维细胞,苏木精-伊红染色,光镜、倒置相差显微镜、扫描电镜(SEM)观察其形态结构、免疫组化Vimentin,鉴定其间叶来源。结果光镜、倒置相差显微镜、SEM观察显示培养的细胞形态结构符合成纤维细胞特征,免疫组化结果显示Vimentin染色阳性。结论成功培养人口腔黏膜成纤维细胞,且其在PLGA膜上生长良好。

直流生物电刺激活化PTEN/Akt/mTOR信号通路促进人口腔黏膜成纤维细胞增殖的研究

目的:探讨直流电刺激(direct current stimulation,DCS)对人口腔黏膜成纤维细胞(human oral mucosa fibroblast,hOMF)增殖的影响及相关机制。方法:以不同强度(0、10、25、50、100μA)、时长(0、5、10、30、60 min)、频率(0、1、2、3次/d)的DCS作用于hOMF,应用CCK-8法检测细胞增殖情况。通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测DCS组与对照组(接种的细胞贴壁后,随机设置DCS组及对照组)24、48 h细胞培养上清液中表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度。通过蛋白质印迹法(Western blotting)检测经DCS后的hOMF中蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian rapamycin target protein,p-mTOR)、磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的表达水平。结果:通过检测DCS强度梯度、时间梯度、频率梯度的吸光度值可知,25μA的电流强度(P<0.01)、10 min的刺激时长(P<0.001)及2次/d的刺激频率(P<0.01)为hOMF的显著增殖刺激条件。相较于对照组,DCS组24 h和48 h细胞培养上清液中VEGF的浓度均有所升高,24 h培养上清液中的VEGF浓度升高更为明显(P<0.01)。在不同时长的DCS下,刺激5、10 min后的p-mTOR和p-Akt的蛋白表达升高(P<0.05),PTEN的蛋白表达降低(P<0.001)。结论:DCS可促进hOMF的增殖,诱导细胞因子VEGF的高表达,可能与PTEN/Akt/mTOR信号通路的激活有关。

口腔黏膜成纤维细胞的单细胞转录组特征

目的:探讨正常口腔黏膜和皮肤组织之间的成纤维细胞亚型构成及功能异同,建立两者间统一的成纤维细胞亚型分类,明确其功能异同,为组织修复和再生提供研究基础。方法:通过整合分别来自口腔黏膜及皮肤的4个单细胞数据库,提取其中的成纤维细胞亚群,使用harmony消除批次效应后,统一流形逼近与投影降维、聚类后将成纤维细胞亚群进行分类,通过基因集富集结果对其功能进行分析。采用R 4.2.0软件包对数据进行统计学分析。结果:共分离得到8个不同功能的成纤维细胞亚群,其功能分别与细胞外基质构成、免疫和收缩相关,在口腔黏膜与皮肤内存在统计学构成比差异。结论:成纤维细胞作为组织稳态的重要组成部分,在伤口愈合过程中起到关键作用。整合分析来自多个部位的正常皮肤组织和口腔黏膜的成纤维细胞转录数据,明确了健康状态下两者之间的亚群构成及功能差异,为提高转录组水平上对口腔黏膜和皮肤稳态和细胞功能的理解提供基础。

肿瘤相关成纤维细胞对口腔鳞状细胞癌生物学行为影响的研究进展

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)是全球第六大常见恶性肿瘤,其发生、发展与肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)作为TME中重要的组成成分,通过分泌多种生长因子、细胞因子、炎性因子、外泌体等参与上皮-间充质转化、重塑细胞外基质,激活多种生物学途径,对OSCC的发生、发展产生影响。本文对CAFs的来源、特点、异质性以及CAFs对OSCC的生物学行为的影响做一综述。

SCRN1在口腔鳞状细胞癌肿瘤相关成纤维细胞中的表达及对HSC3细胞株生物学特性的影响

目的:探究胞吐作用相关蛋白(SCRN1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达及对CAFs分泌MMP2功能的影响,进一步研究CAFs对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。方法:通过免疫组织化学染色(IHC)检测SCRN1在OSCC组织及癌旁组织中的表达。原代培养、分离、纯化、验证正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,用免疫细胞化学染色法(ICC)、蛋白免疫印迹(WB)、qRT-PCR检测NFs、CAFs中SCRN1的表达情况。CCK-8、Transwell实验检测NFs、CAFs及CAFs-shSCRN1增殖、迁移及侵袭能力。收集NFs、CAFs上清并用ELISA和明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)水平及活性,然后分别与HSC3细胞株共培养,探究两种上清共培养对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。沉默CAFs的SCRN1基因后,收集CAFs、CAFs-shSCRN1和CAFs-Vector上清并检测MMP2水平及活性,然后分别与HSC3共培养,探究三种上清培养条件对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果:SCRN1在OSCC组织中阳性表达率及表达水平较高。成功分离、培养、鉴定NFs和CAFs, CAFs较NFs表达更高水平的SCRN1,且其增殖、迁移、侵袭能力均较NFs强。沉默SCRN1能够降低CAFs增殖、迁移及侵袭能力。CAFs上清分泌更高水平和活性的MMP2,与HSC3细胞株共培养可明显促进HSC3细胞株迁移、侵袭能力。沉默SCRN1后的CAFs上清中MMP2水平和活性降低,其促进HSC3细胞株迁移、侵袭能力也明显减弱。结论:SCRN1可调控CAFs分泌MMP2,在肿瘤微环境中,促进HSC3细胞株迁移和侵袭能力。

长链非编码RNA MALAT1对槟榔碱诱导的颊黏膜成纤维细胞活化能力影响的研究

目的:本研究旨在明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) MALAT1对槟榔碱诱导的颊黏膜成纤维细胞(buccal mucosal fibroblasts, BMFs)活化能力影响的作用,为寻找新的口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis, OSF)治疗途径提供理论基础。方法:体外培养BMFs,采用不同浓度槟榔碱刺激BMFs,在细胞水平上构建OSF疾病模型。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力;Transwell法和胶原凝胶收缩法检测BMFs活化;实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)检测BMFs中平滑肌肌动蛋白-α(α-smooth muscle actin, α-SMA)和lncRNA MALAT1的表达情况;siRNA-MALAT1瞬时转染到BMFs中,评估槟榔碱刺激下BMFs迁移和收缩能力的变化。结果:10μg/mL槟榔碱是体外构建OSF疾病模型的最佳浓度,此时细胞内α-SMA和lncRNA MALAT1表达升高。Transwell实验和胶原凝胶收缩实验提示敲低lncRNA MALAT能抑制槟榔碱诱导的BMFs收缩和迁移。结论:lncRNA MALAT1对槟榔碱诱导的BMFs激活,细胞收缩和迁移有重要作用。

硫酸锌口服液联合牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液治疗复发性口腔溃疡患者的效果

目的:观察硫酸锌口服液联合牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液治疗复发性口腔溃疡患者的效果。方法:选取2020年3月至2022年6月该院收治的120例复发性口腔溃疡患者进行前瞻性研究,按照随机数字表法分为观察组与对照组各60例。对照组给予牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液治疗,观察组在对照组基础上采用硫酸锌口服溶液治疗,比较两组治疗总有效率、不同时间(治疗前,治疗3、5、7 d后)咀嚼效率、不同时间(治疗前,治疗3、5、7 d后)疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分和不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为98.33%,明显高于对照组的86.67%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3、5、7 d后,两组咀嚼效率高于治疗前,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗3、5、7 d后,两组VAS评分低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:硫酸锌口服液联合牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液治疗复发性口腔溃疡患者可提高治疗总有效率和咀嚼效率,降低VAS评分,效果优于单纯牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液治疗。

成纤维细胞在胃食管反流病中的作用研究进展

胃食管反流病(GERD)中的食管损伤是一种慢性炎性反应,成纤维细胞作为食管基质细胞,在食管黏膜屏障和食管炎性反应中扮演者重要角色。成纤维细胞与GERD的病程进展程度密切相关,在食管受损时,分泌大量胶原蛋白促进食管黏膜屏障修复;通过旁分泌信号调节免疫平衡,除了分泌炎性产物,还能与免疫细胞发生相互作用;但不适当的成纤维细胞被激活会诱导促炎和免疫抑制特性促进疾病的存在,提示其可能在疾病的发展中发挥关键作用。

人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层的研究

目的:探讨人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞代替鼠源饲养层细胞在体外培养人口腔黏膜上皮细胞的可行性。方法:通过酶消化法从人眼睑组织中分离成纤维细胞传代培养,取P5代成纤维细胞通过丝裂霉素C方法制备饲养层细胞,将其制备成的饲养层细胞用来培养商品化人口腔黏膜上皮细胞。通过罗丹明染色观察其细胞克隆形成率;HE染色观察细胞片层的结构;免疫荧光检测特征蛋白P63、β1-integrin的表达。结果:人眼睑组织来源的成纤维细胞在体外具有较强的增殖能力,高表达成纤维细胞特异性标志性蛋白CD90,培养的人口腔黏膜上皮细胞呈克隆样生长,细胞克隆形成率约为2.2%,并将其构建成3~4层口腔黏膜细胞片层,且高表达上皮细胞标志物P63及β1-integrin。结论:人眼睑组织来源的成纤维细胞可以作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层,为临床应用提供一种新的人源化饲养层工具细胞。

基于单细胞转录组测序结果分析成纤维细胞促进口腔黏膜无瘢痕愈合的机制

目的探索人类正常口腔黏膜与皮肤的成纤维细胞异质性,以及口腔黏膜成纤维细胞促进伤口无瘢痕愈合的机制。方法从GEO数据库中获取13例口腔黏膜和8例皮肤的单细胞转录组测序数据。对整合后的64633个细胞进行质控、降维、聚类及细胞注释。提取成纤维细胞进行亚群定义,差异基因富集、细胞互作分析。结果从12个细胞亚群中识别出成纤维细胞,并根据基因表达特征定义为5个功能亚群:促炎型、调脂型、间充质型、收缩型和Wnt抑制型。与皮肤相比,口腔黏膜中的促炎型成纤维细胞比例显著上调,且与免疫细胞招募相关。口腔黏膜成纤维细胞高表达CXCL13、EEF1A1和B2M等基因。基因本体(GO)功能分析显示,口腔黏膜成纤维细胞中免疫应答及促炎通路等瘢痕愈合相关通路被激活。细胞互作分析显示,成纤维细胞亚群间的互作模式显著改变,口腔黏膜胶原信号通路激活的同时,包含MMP1、MMP10等基因的胶原降解基因集评分也显著上调(P<0.05)。结论正常皮肤与口腔黏膜中的成纤维细胞,其亚群、功能等存在显著差异,口腔黏膜成纤维细胞更强的促炎特性及胶原代谢水平可能是伤口无瘢痕愈合的原因。

血管紧张素(1-7)激活自噬调控口腔黏膜下纤维性变细胞凋亡与血管生成的研究

目的体外观察血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对口腔黏膜下纤维性变(OSF)成纤维细胞凋亡与血管生成的影响,并初步探究作用机制。方法从人颊黏膜组织分离培养成纤维细胞,倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光染色检测波形蛋白(Vimentin)表达;以槟榔提取液(ANE)诱导人成纤维细胞模拟OSF内成纤维细胞体外模型,实验分组包括对照组(正常培养的细胞)、ANE组[100μg/ml ANE培养细胞48 h、ANE+低剂量Ang(1-7)组(100μg/ml ANE+10^(-7)mol/L Ang(1-7)培养细胞48 h]、ANE+高剂量Ang(1-7)组[100μg/ml ANE+10^(-5)mol/L Ang(1-7)培养细胞48 h],免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)的含量,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,小管形成实验检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血管形成情况,将mRFP-GFP-LC3病毒转染至细胞后通过免疫荧光染色检测细胞自噬水平,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果分离培养的细胞呈长梭形,Vimentin呈阳性表达,说明成功分离到成纤维细胞;与ANE组比较,ANE+低剂量Ang(1-7)组和ANE+高剂量Ang(1-7)组的细胞内α-SMA蛋白荧光表达明显减弱,培养上清液中Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ的含量减少(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率则升高(P<0.05),两组的细胞培养上清液均抑制了HUVEC的血管形成(P<0.05),细胞内自噬小体减少(P<0.05),Beclin-1蛋白表达降低(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下调(P<0.05);此外,ANE+高剂量Ang(1-7)组作用效果均强于ANE+低剂量Ang(1-7)组作用效果(P<0.05)。结论Ang(1-7)能够抑制ANE诱导下成纤维细胞的活化,促进细胞凋亡,并降低HUVEC的血管形成。该机制可能与调控细胞自噬水平有关。

富血小板纤维蛋白对牙龈成纤维细胞生物学功能的影响

目的:探究冷冻干燥富血小板纤维蛋白(freeze-dried platelet-rich fibrin, FD-PRF)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, hGFs)功能的影响以及其抗菌性能,为口腔黏膜炎的防治提供新思路。方法:采用流式细胞术、CCK-8检测细胞增殖(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞划痕和Transwell实验,检测FD-PRF对hGFs细胞周期、增殖和迁移的影响;采用倾注平板法和振荡培养法研究FD-PRF的抗菌作用。结果:CCK-8实验结果表明,随着FD-PRF浓度升高,hGFs的细胞数量显著增加。细胞周期结果显示,S-G2/M期的细胞比例:5%FD-PRF组>1%FD-PRF组>对照组,而G0-G1期细胞则相反。迁移实验结果显示,FD-PRF显著提升了hGFs的迁移速度。抗菌实验结果显示,FD-PRF组相比于对照组的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量明显减少。结论:FD-PRF促进hGFs进入细胞分裂期,进而促进细胞增殖。FD-PRF促进hGFs迁移。此外,本研究还证实FD-PRF具有一定的抗菌性。提示FD-PRF可以促进口腔黏膜炎的愈合。

胶原蛋白肽对人牙周膜成纤维细胞损伤的保护作用

文章以脂多糖(LPS)为致病因子,通过刺激人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)建立模型,研究胶原蛋白肽(CP)对口腔的保护作用及其可能机制。结果表明,100 mg/mL以上质量浓度的CP能有效降低LPS对hPLDFs的毒性,显著提高h PLDFs的增殖能力,同时也能有效降低TLR4和NF-κB的表达量,对炎症因子的分泌产生明显的影响。作用机理可能是,CP作为一种信号分子作用于TLR4,通过抑制TLR4和NF-κB的表达来抑制LPS引起的炎症反应,从而促进hPDLFs增殖。

慢病毒载体感染人口腔黏膜成纤维细胞稳定表达绿色荧光蛋白的研究

目的:确立慢病毒载体高效感染人口腔黏膜成纤维细胞的感染条件,为进一步应用基因工程技术研究人口腔黏膜成纤维细胞奠定基础。方法:采用组织块法培养原代人口腔黏膜成纤维细胞,免疫组化SP法鉴定细胞类型,将携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染纯化细胞,并设置不同感染条件,感染4 d后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功分离纯化得到人口腔黏膜成纤维细胞,当慢病毒感染复数为30,polybrene浓度为8μg/mL,并加入感染增强液时,可达到较高的感染效率,满足后续实验需要。结论:慢病毒载体可高效感染人口腔黏膜成纤维细胞,携带的绿色荧光蛋白基因可在成纤维细胞内稳定表达。

槟榔碱通过促进巨噬细胞分泌含miR-155-5p外泌体诱导人口腔成纤维细胞的活化

目的探讨槟榔碱(ARE)通过调控巨噬细胞外泌体内miR-155-5p水平诱导人口腔黏膜成纤维细胞向成纤维表型转化的作用机制。方法以人单核细胞系(THP-1)与人口腔黏膜成纤维细胞系(HOMF)为研究对象。实验设为空白对照组、阴性对照组、ARE刺激组、ARE刺激后THP-1培养上清刺激组(CS)、ARE刺激后THP-1外泌体刺激组(EXO)、ARE刺激后THP-1无外泌体上清刺激组(NES)、miR-155-5p过表达组(miR-155-5p mimics)、ARE刺激后EXO处理对照组(NC+EXO-ARE)和miR-155-5p抑制联合ARE刺激后EXO处理(miR-155-5p inhibitor EXO-ARE)组。以流式细胞术检测THP-1细胞极化情况。Transwell细胞迁移实验检测HOMF细胞迁移能力。DCFH-DA检测细胞氧化应激水平。qRT-PCR检测细胞α-SMA、I型胶原和SOCS1的mRNA转录水平。免疫印迹实验检测细胞α-SMA、I型胶原与SOCS1蛋白表达。结果流式检测显示,相较于对照组,ARE组THP-1细胞由M0趋向M1极化。ARE对THP-1和HOMF细胞的刺激结果显示,相较于对照组,CS组与EXO组HOMF细胞迁移能力增强;细胞内氧化应激水平上调;细胞内miR-155-5p水平升高;细胞内α-SMA、I型胶原mRNA转录增多(1.90±0.08 vs 3.17±0.08;3.19±0.05 vs 5.65±0.01,P<0.05),SOCS1的m RNA转录减少(1.08±0.06 vs 0.34±0.02,P<0.05);α-SMA、I型胶原蛋白表达上调,SOCS1蛋白表达下调。miR-155-5p操纵实验显示,与阴性对照组相比,miR-155-5p mimics组HOMF细胞迁移能力增强,细胞内α-SMA和I型胶原蛋白表达上调;而与NC+EXO-ARE组相比,miR-155-5p inhibitor组HOMF细胞迁移能力减弱,细胞内α-SMA和I型胶原mRNA转录减少(5.84±0.08 vs 2.00±0.98;7.32±0.51 vs 2.33±0.43,P<0.05);α-SMA、I型胶原蛋白表达下调。结论ARE可上调THP-1胞内miR-155-5p并经外泌体途径转导和抑制HOMF胞内SOCS1蛋白表达,促进HOMF细胞的纤维化表型转化。

癌相关成纤维细胞在口腔鳞状细胞癌微环境中作用的研究进展

癌相关成纤维细胞是肿瘤微环境中数目最为丰富的基质细胞。越来越多的研究发现癌相关成纤维细胞对肿瘤的发生发展发挥着巨大作用。癌相关成纤维细胞不仅能够重塑细胞外基质,调节肿瘤代谢,参与免疫调节,还能促进肿瘤的生长、血管生成、迁移和侵袭等。因此,破坏癌相关成纤维细胞与周围环境的交互可能提供新的治疗思路。本文将对癌相关成纤维细胞在口腔鳞状细胞癌中的研究进展进行综述。

丹参注射液诱导口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞凋亡的实验研究

目的:通过观察丹参对口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞凋亡的影响,探讨丹参治疗口腔黏膜下纤维性变的机制。方法:将不同浓度的丹参注射液与口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞共同培养,显微镜下观察口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞凋亡,并计凋亡细胞率及活细胞率。结果:丹参诱导口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞发生典型的细胞凋亡形态学变化,凋亡率升高及活细胞细胞率降低呈剂量、时间依赖性,但当丹参浓度及作用时间达到一定域值后,细胞凋亡率及活细胞率变化不明显(P>0.05)。结论:丹参可诱导口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞凋亡,且有剂量、时间依赖性。

脂肪干细胞来源的生长因子与口腔黏膜成纤维细胞增殖

背景:近年来脂肪干细胞被证实对软组织创伤修复具有促进作用,关于其机制的研究中,更多的学者倾向于脂肪干细胞的旁分泌机制,即脂肪干细胞分泌的各种细胞因子对创伤部位细胞的修复功能具有促进作用。但脂肪干细胞分泌的因子种类,每种因子的含量,以及对软组织创伤修复,尤其是口腔黏膜的作用,鲜有报道。目的:观察脂肪干细胞条件培养液中血管内皮生长因子、血小板源性生长因子以及碱性成纤维细胞生长因子对口腔黏膜成纤维细胞增殖的影响。方法:采用蛋白芯片技术,检测脂肪干细胞条件培养液中血管内皮生长因子、血小板源性生长因子以及碱性成纤维细胞生长因子的含量。分别于1,2,3,4,5d时,采用CCK-8法检测0,1,10,20,50,100μg/L血管内皮生长因子、血小板源性生长因子以及碱性成纤维细胞生长因子以及在脂肪干细胞条件培养液中分别加入上述各因子的中和抗体后,对口腔黏膜成纤维细胞增殖的影响。结果与结论:脂肪干细胞条件培养液中血管内皮生长因子、血小板源性生长因子以及碱性成纤维细胞生长因子信号值均大于300。脂肪干细胞条件培养液对成纤维细胞的增殖有明显的促进作用,其中,血小板源性生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的促进作用非常明显,且随着因子浓度的变化而呈现峰值性改变,血小板源性生长因子的促进作用在50μg/L时达到峰值,碱性成纤维细胞生长因子的促进作用在1μg/L时达到峰值(P≤0.05),两者的中和抗体均能抑制脂肪干细胞条件培养液对口腔黏膜成纤维细胞的促进作用;而血管内皮细胞生长因子对成纤维细胞增殖无明显的促进作用。实验结果提示脂肪干细胞条件培养液可促进口腔黏膜成纤维细胞的增殖,其中所含有的血小板源性生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的促进作用非常明显,且具有浓度依赖性,因此应注意选择适宜的细胞因子浓度,从而有效地促进成纤维细胞增殖。

γ-干扰素对肿瘤坏死因子-α促口腔黏膜下纤维化成纤维细胞胶原合成的抑制作用

目的观察γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)对肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)促正常人颊黏膜成纤维细胞(normalmucousfibroblasts,NM-FB)及口腔黏膜下纤维化(oralsub-mucousfibrosis,OSF)患者颊黏膜成纤维细胞(OSF-FB)胶原合成的影响,探讨IFN-γ用于治疗OSF的可能性。方法取6例OSF患者及5例正常人颊黏膜,行成纤维细胞原代培养并传代,采用羟脯氨酸试剂盒法观察IFN-γ对TNF-α作用下NM-FB及OSF-FB的胶原合成的影响,并在电镜下观察其超微结构的改变。结果IFN-γ对TNF-α促NM-FB及OSF-FB的胶原合成有明显抑制作用。结论IFN-γ是OSF形成过程中的一种负性调节因子,有可能用于临床治疗OSF。