miR-375靶向OTX1对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的分析微小RNA-375(miR-375)、人同源盒基因1(OTX1)对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分为空白对照组(Control组)、miR-375激动剂阴性对照组(mNC)组、miR-375激动剂组(miR-375 mimic组),miR-375抑制剂剂组(miR-375 inhibitor组),miR-375抑制剂阴性对照组(iNC组);除Control组细胞正常培养外,其余4组转染相应的miR-375激动剂、抑制剂及阴性对照试剂。4组细胞均培养48 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-375、OTX1 mRNA相对表达水平,MTT检测各组细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,细胞划痕实验检测细胞迁移,双荧光素报告基因检测宫颈癌HeLa细胞miR-375与OTX1的靶向关系,蛋白免疫印记(Western Blot)检测通路OTX1蛋白、增殖活性标志物-细胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白、侵袭迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)蛋白表达。结果与Control组、mNC组、iNC组相比,miR-375 inhibitor组的OTX1 mRNA及蛋白表达、增殖标志物Ki-67蛋白表达、侵袭及迁移相关分子MMP-2蛋白表达、增殖率、侵袭率、迁移率均增高(P<0.05),miR-375表达、侵袭及迁移抑制分子TIMP-2蛋白表达均降低(P<0.05);miR-375 mimic组的OTX1 mRNA及蛋白表达、Ki-67蛋白表达、MMP-2蛋白表达、增殖率、侵袭率、迁移率均降低(P<0.05),、miR-375表达、TIMP-2蛋白表达均升高(P<0.05)。Control组、mNC组及iNC组组间相比,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告实验发现,与miR-375 NC+WT-OTX13’-UTR组相比,miR-375 mimic+WT-OTX13’-UTR组的荧光素酶相对活性降低(P<0.05)。结论miR-375过表达可靶向抑制OTX1表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移。