人垂体瘤转化基因1抑制卵巢癌A2780细胞凋亡的分子机制研究

目的利用小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)片段沉默卵巢癌细胞人垂体瘤转化基因1(human pituitary tumor-transforming gene 1,h PTTG1)基因表达,探讨其抑制细胞凋亡的分子机制。方法通过脂质体将h PTTG1 si RNA转染A2780细胞(h PTTG1 si RNA干扰组),并设立正常组和阴性对照组,转染48 h后进行检测。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染前后h PTTG1 m RNA表达水平的变化,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测survivin m RNA和蛋白表达水平,采用DNA梯带电泳法和碘化丙啶单染法分析细胞凋亡,采用比色法测定胱天蛋白酶(caspase)-3活性。结果 h PTTG1 si RNA可抑制A2780细胞内h PTTG1 m RNA表达;h PTTG1 si RNA干扰组可见典型的细胞凋亡阶梯状电泳,流式细胞仪检测该组细胞凋亡率为(17.53±2.17)%,明显高于正常组和阴性对照组[(8.97±1.56)%、(9.64±1.31)%],差异有统计学意义(P<0.05);h PTTG1干扰后survivin m RNA和蛋白表达均下调,caspase-3活性增强。结论 h PTTG1 si RNA可下调survivin基因表达,活化caspase-3,导致A2780细胞凋亡,其可成为卵巢癌基因治疗的潜在靶点。

小干扰RNA沉默hPTTG1基因对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:利用RNA干扰技术沉默人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)表达,观察卵巢癌细胞增殖能力和细胞凋亡的改变并探讨分子机制。方法:化学合成靶定hPTTG1的小干扰RNA(siRNA)转染体外培养的A2780细胞,RT-PCR和Western blotting检测hPTTG1及c-myc表达水平;MTT法和[3H]-TdR掺入实验检测hPTTG1对细胞增殖的影响;annexin V/PI染色流式细胞术和TUNEL法测定各组细胞凋亡情况。结果:hPTTG1siRNA转染组hPTTG1mRNA和蛋白表达下降,抑制率分别为70.5%±3.9%和63.8%±4.5%;转染hPTTG1siRNA 24 h细胞吸光度值开始下降,48 h抑制效果最明显,抑制率为42.9%±5.2%;转染hPTTG1siRNA后细胞[3H]-TdR放射性计数明显低于空白组和阴性对照组;hPTTG1siRNA干扰组细胞存活率下降,细胞凋亡率和坏死率均增加;TUNEL染色分析结果可见hPTTG1siRNA干扰组凋亡指数明显高于空白组和阴性对照组;hPTTG1干扰后c-mycmRNA和蛋白表达均下调。结论:hPTTG1siRNA通过下调c-myc表达抑制A2780细胞增殖,诱导细胞凋亡,hPTTG1可作为卵巢癌基因治疗的候选靶点。

实时荧光定量PCR检测结直肠癌hPTTG1的表达及其意义

背景与目的:虽然人垂体瘤转化基因1(human pituitary-tumor transforming gene1,hPTTG1)在结直肠癌等恶性肿瘤中高表达,然而hPTTG1 mRNA与结直肠癌临床病理参数之间的关系及其能否作为结直肠癌诊断和预后判断的分子标志尚不清楚。本研究检测hPTTG1 mRNA在结直肠癌中的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,探讨hPTTG1 mRNA作为结直肠癌诊断和转移复发的分子标志的可能性。方法:采用实时荧光定量PCR检测结直肠癌组织与对应癌旁组织hPTTG1 mRNA,并分析其与临床病理指标的关系。结果:结直肠癌组织hPTTG1mRNA表达较正常癌旁组织显著增高(0.42±0.07vs.0.03±0.01,P<0.001)。hPTTG1 mRNA与肿瘤大小、血清CEA水平有关,肿瘤直径≥3.5cm较<3.5cm显著增高(15.80±8.80vs.10.91±5.22,P<0.05),血清CEA>5ng/mL较<5ng/mL显著增高(22.79±7.42vs.9.39±2.61,P<0.001)。hPTTG1mRNA在Dukes'C、D期显著高于Dukes'A、B期(15.88±8.09、25.69±7.67vs.9.03±0.35、9.58±2.93,P<0.001)。伴有淋巴转移、肝转移或其他器官转移者(17.63±8.47、31.07±4.10和22.78±6.39)较无转移者(11.15±6.65)显著增高(P<0.001)。hPTTG1 mRNA与患者的性别、年龄和病理分型无关(P>0.05)。结论:hPTTG1 mRNA在结直肠癌中高表达,与结直肠癌的疾病进展密切相关,有助于对患者病情进展的预测。

胆囊癌组织hPTTG1与c-Myc的表达及意义

目的 :探讨人垂体瘤转化基因 1蛋白 (hPTTG1 )和c Myc在胆囊癌组织中的表达及与其生物学行为之间的关系 ;并探讨二者的相关性及可能机制 .方法 :用免疫组织化学SP法对 4 1例胆囊癌和 2 2例慢性胆囊炎组织中hPTTG1和c Myc的表达进行检测 .结果 :4 1例原发胆囊癌中hPTTG1和c Myc的表达阳性率分别为 82 .9%和 6 3.4 % ,均高于慢性胆囊炎组(P =0 .0 0 2 ,0 .0 0 2 ) .hPTTG1的表达与临床分期和淋巴结转移有关 (P =0 .0 2 5 ,0 .0 0 7) ,而与组织学分级无显著关系 (P =0 .1 1 4 ) ;c Myc的表达与淋巴结转移有关 (P =0 .0 32 ) ,而与组织学分级、临床分期无显著关系 (P =0 .1 2 7,0 .1 98) ;hPTTG1的表达与c Myc的表达呈正相关 (r=0 .4 6 3,P =0 .0 0 2 ) .二者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的种类 ,是否伴有胆囊结石均无关 .结论 :hPTTG1和c Myc可能在胆囊癌的发生、发展过程中起重要作用 ,可能成为反映胆囊癌侵袭性的生物学指标 。

直肠癌组织中hPTTG1和survivin的表达及意义

目的:检测人垂体瘤转化基因1(human pituitary-tumour transforming gene,hPTTG1)与存活素(sur-vivin)在直肠癌、直肠腺瘤和癌旁正常组织中的表达,分析两者与直肠癌生物学行为的关系和机制。方法:收集2006-2008年间我院直肠癌手术标本60例,直肠腺瘤10例,癌旁正常组织10例,应用免疫组化SP法检测60例直肠癌、10例直肠腺瘤、10例癌旁正常组织中hPTTG1与survivin的表达,分析两者与直肠癌生物学行为的关系及意义。结果:在直肠癌、直肠腺瘤与癌旁正常组织中,hPTTG1的阳性表达率分别为80%(48/60)、20%(2/10)和0(0/10);hPTTG1的表达在直肠癌与直肠腺瘤之间及直肠癌与癌旁正常组织之间差异有显著性意义(P<0.01)。survivin的阳性表达率为90%(54/60)、80%(8/10)和20%(2/10)。survivin的表达在直肠癌和直肠腺瘤组与癌旁正常组织之间差异有显著性意义(P<0.05)。直肠癌中hPTTG1的表达与肿瘤Dukes分期、分化程度,淋巴结转移和分型关系密切(P<0.05)。直肠癌中survivin的表达与肿瘤Dukes分期和淋巴结转移关系密切(P<0.05)。60例直肠癌中两者与患者的性别、年龄、术前CEA、肿瘤所在直肠部位无相关性(均为P>0.05)。结论:hPTTG1和survivin可能在直肠癌的发生发展过程中发挥重要作用,可能与直肠癌侵袭转移密切相关。

hPTTG1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:检测人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)在结直肠癌中的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,为阐明hPTTG1在结直肠癌诊断和转移复发中的临床价值提供实验依据.方法:收集我院2004-01/2006-09结直肠癌及对应癌旁组织的手术标本60例.采用免疫组织化学和Western blotting检测结直肠癌组织与对应癌旁组织hPTTG1蛋白的表达,并探讨其与临床病理指标的关系.结果:60例结直肠癌组织有56例表达hPTTG1蛋白,阳性率为93.3%,而癌旁组织hPTTG1仅8例表达,且均为弱阳性,阳性率为13.3%(χ2=77.13,P<0.001).hPTTG1表达与血清CEA水平具有显著相关,血清CEA大于5mg/L较小于5mg/L显著增高(χ2=30.886,P<0.001).hPTTG1在DukesC、D期显著高于DukesA、B期(χ2=9.87,P<0.001).伴有淋巴转移、肝转移或其他器官转移者较无转移者显著增高(χ2=9.87,P<0.001).hPTTG1与患者的性别、年龄、肿瘤直径大小和病理分型无关.结论:hPTTG1在结直肠癌中高表达,与结肠癌的疾病进展密切相关,检测hPTTG1有助于患者预后的判断.

β-catemin和hPTTG1在结直肠癌中的表达及其意义

目的:探讨β-catenin与hPTTG1在结直肠癌组织中的表达及预后意义.方法:通过免疫组化方法检测79例结直肠癌组织,20例癌旁正常结直肠组织中β-catenin,hPTTG1的表达,分析两者表达水平与临床病理特征及患者预后的关系.结果:β-catenin在20例正常结直肠组织均呈正常表达,在结直肠癌组织中的异常表达率为77.2%,差异有统计学意义(P<0.01).其异常表达率与肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期和腹水之间的差异有统计学意义(χ2=5.975,6.041,4.347,7.364,5.513,P<0.05).hPTTG1在正常结直肠组织均呈阴性表达,在结直肠癌组织中的阳性率为65.8%差异有统计学意义(P<0.01),其阳性表达率与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期、腹膜播散和腹水之间的差异有统计学意义(χ2=6.393,6.446,24.017,5.788,9.614,13.067,P<0.05).Cox回归多因素分析显示hPTTG1、淋巴结转移、Dukes分期、腹水、肿瘤大小是独立的预后指标(RR=2.916,3.546,2.703,2.217,1.952,P<0.05).结论:β-catenin,hPTTG1的表达异常可能与结直肠癌的发生发展、转移相关.hPTTG1表达可作为评价结直肠癌预后的指标之一.

hPTTG1与肿瘤发生发展的研究进展

人垂体瘤转化基因(hPTTG)是一种潜在的癌基因,自发现以来一直是研究的热点,在人体肿瘤中主要表达hPTTG1,且在多种肿瘤中高表达。研究证实,hPTTG1具有促进细胞转化、血管生成及肿瘤转移等生物学功能,在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移及复发中起重要作用。hPTTG1对肿瘤的诊断具有重要的参考价值,有望成为肿瘤基因治疗的新靶点。

PTTG1在肝细胞癌的表达及临床意义

目的探讨PTTG1在肝细胞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测PTTG1在79例肝细胞癌组织及79例相应的癌旁肝组织中的表达,分析PTTG1表达与肝细胞临床病理指标的关系。结果在肝癌组织、癌旁肝组织中PTTG1高表达率分别为53.2%、1.3%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。PTTG1的表达水平与卫星结节,Edmondson病理分级密切相关。PTTG1在无卫星结节组和有卫星结节组高表达率分别为39.7%、68.7%,两组差异有统计学意义(P<0.05);PTTG1在Edmondson病理分级Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ、Ⅳ组高表达率分别为38.3%、62.5%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。PTTG1表达水平与性别、年龄、AFP、HBsAg、肝硬化程度、ICGR15、TNM分期、肿瘤大小及肿瘤包膜状况无关。结论肝癌组织中PTTG1的表达明显高于癌旁肝组织,PTTG1的表达水平与卫星结节,Edmondson病理分级相关,提示PTTG1可能在肝癌的发生、发展过程中起着重要作用。

CRD-BP、hPTTG1在结直肠癌表达的研究进展

不稳定编码区（CRD）是影响癌基因c-myc的因素之一，CRD结合蛋白（CRD-BP）可通过与c-mycmRNA的CRD相连接，通过保护CRD免受内核酸酶攻击而阻止c-myc mRNA快速降解，延长c-mycmRNA半衰期，进而增加c．myc蛋白含量。人垂体瘤转化基因（hPTTG）具有转化功能，参与细胞周期的调控，调节c-myc基因的表达，与c-myc协同参与结直肠癌的发生、发展及侵袭进程。CRD-BP和hPTrG1的表达与结直肠癌的发生发展可能呈正相关，两者可能对结直肠癌的侵袭转移起协同作用。

吉非替尼通过调控hPTTG1表达抑制卵巢癌细胞增殖并诱导凋亡的机制研究

目的:吉非替尼和人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:以不同浓度吉非替尼干预A2780细胞,MTT法检测细胞增殖。流式细胞仪、qRT-PCR和Western blot实验检测20μmol·L-1吉非替尼对A2780细胞凋亡及细胞中hPTTG1表达的影响。敲减hPTTG1或过表达hPTTG1联合20μmol·L-1吉非替尼处理,qRT-PCR和Western blot、MTT和流式细胞术检测细胞中hPTTG1表达及细胞增殖、凋亡情况变化。结果:吉非替尼能够有效抑制A2780细胞增殖(P<0.05),呈浓度依赖性。以20μmol·L-1吉非替尼干预A2780细胞,细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中hPTTG1在mRNA和蛋白水平的表达显著下调(P<0.05)。将hPTTG1 siRNA转染至A2780细胞后,细胞hPTTG1表达水平降低(P<0.05),细胞增殖抑制率和凋亡率增大(P<0.05);过表达hPTTG1可减弱吉非替尼对A2780细胞增殖的抑制及凋亡的促进作用。结论:吉非替尼可抑制A2780细胞增殖并诱导凋亡,这一结果可能是通过抑制hPTTG1表达来完成。