垂体瘤转化基因1(PTTG1)的表达变化对人前列腺癌细胞LNCaP生长增殖的影响

垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)具有促进肿瘤生长和转移的作用.通过上调或下调基因表达的策略,观察PTTG1基因对人前列腺癌细胞株LNCaP细胞生长增殖的影响.利用PCR技术分离出PTTG1全长cDNA,分别正向和反向插入真核表达载体pIRES2-EGFP,重组载体分别命名为正义PTTG1-S/pIRES2-EGFP(即pI-P-S)和反义PTTG1-AS/pIRES2-EGFP(即pI-P-AS),将这两种重组载体稳定转染LNCaP细胞,通过流式细胞仪和MTT法分别检测了细胞周期和细胞增殖的情况.转染正义PTTG1后处于S期和G2期的细胞明显增加,细胞生长增殖能力增强;相反,转染反义PTTG1后处于S期和G2期细胞明显减少,细胞生长增殖能力减弱(P<0.05).结果表明,PTTG1能明显改变人前列腺癌细胞株LNCaP的细胞周期和细胞生长增殖能力,它的异常表达可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程.

垂体瘤转化基因1(PTTG1)在肝细胞癌组织高表达且与预后不良相关

目的分析垂体瘤转化基因1(PTTG1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床预后意义。方法首先利用肿瘤生存(Tumorsurvival)和肝细胞癌整合分子数据库(HCCDB)分析HCC组织PTTG1及其共表达基因的表达情况;再利用cBioPortal、MetaScape和Kaplan-Meier Plotter数据库分析PTTG1基因在HCC中共表达基因的突变、基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集情况,并分析共表达基因对HCC患者总体生存(OS)的影响;最后利用肿瘤免疫评估资源库(TIMER)数据库分析PTTG1基因在HCC免疫微环境中的表达及与免疫细胞的关系,并分析各种免疫细胞对HCC患者OS的影响。结果PTTG1基因在HCC组织中高表达,且不利于HCC患者的OS;PTTG1基因在HCC中有19个显著共表达基因,并且其共表达基因在HCC中也高表达,同样不利于HCC患者的OS;PTTG1基因及其共表达基因的GO功能主要富集在细胞分裂、有丝核分裂和蛋白激酶结合等功能上,而KEGG富集在细胞循环、p53信号通路和人类嗜T细胞病毒(HTLV)感染等通路上;PTTG1及其共表达基因在HCC中均发生一定的突变,并显著缩短HCC患者的OS和DFS;PTTG1基因在HCC免疫微环境中与各种免疫细胞的表达正相关,但各种免疫细胞的表达同样也不利于HCC患者的OS。结论PTTG1高表达不利于HCC患者的生存预后。

垂体瘤转化基因1在骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的分析垂体瘤转化基因1(PTTG1)在骨肉瘤组织中的表达,并探讨其表达与骨肉瘤患者预后的关系。方法采用免疫组织化学检测71例骨肉瘤组织和对应的71例正常骨组织中PTTG1蛋白的表达,并分析其表达与骨肉瘤患者临床病理学参数和预后之间的关系。结果 PTTG1蛋白在骨肉瘤组织中的阳性表达率(77.46%,55/71)显著高于正常骨组织(18.31%,13/71),差异有统计学意义(P<0.05)。PTTG1蛋白表达与骨肉瘤患者的肺转移和临床阶段密切相关(P<0.05)。PTTG1高表达的骨肉瘤患者的存活时间明显低于PTTG1低表达的骨肉瘤患者(P<0.05)。结论 PTTG1蛋白在骨肉瘤组织中的表达率显著增高,且与肺转移和生存时间有一定相关性。

miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究

目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞Cal-27、HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测该miRNA在组织中的表达。结果ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低(P<0.05)。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR-362-3p,双荧光素酶实验检测出PTTG1与miR-362-3p存在结合位点;qRT-PCR检测结果显示miR-362-3p在OSCC肿瘤组织中相对于正常组织表达下调(P<0.05);并且敲低miR-362-3p的表达后能够促进敲低PTTG1后的Cal-27、HN-30侵袭和增殖。结论miR-362-3p可通过靶向PTTG1抑制Cal-27、HN-30细胞侵袭、增殖。

胰岛素样生长因子-1对胶质瘤C6细胞垂体瘤转化基因的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(Insulin-like-growth factor-1,IGF-1)在体外对胶质瘤C6细胞垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)表达的影响。方法:体外培养胶质瘤C6细胞,给与不同浓度的IGF-1(0.1、1.0、10.0ng/ml)作用24h后半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测PTTG mRNA,Western blot检测PTTG蛋白表达。结果:不同浓度IGF-1作用后C6细胞PTTGmRNA表达与蛋白水平均增高,差异有统计学意义(P<0.01),且随着浓度的增加,其升高越明显。结论:IGF-1可以上调PTTG的表达,并剂量依赖性。

垂体瘤转化基因、P16在胶质瘤中表达的意义

目的探讨胶质瘤中垂体瘤转化基因(Pituitary Tumor Transforming Gene,PTTG)、周期素依赖性激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhabitor)P16在胶质瘤中的作用以及它们的关系。方法40例胶质瘤标本分为Ⅰ级8例、Ⅱ10例、Ⅲ级13例、Ⅳ级9例,RT-PCR检测PTTG及P16 mRNA的表达,免疫组化检测PTTG、P16蛋白的表达。结果PTTG mRNA在Ⅰ～Ⅳ级的表达分别为0.907±0.065、1.109±0.083、1.312±0.089、1.499±0.215,组间比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01);P16mRNA在Ⅰ～Ⅳ级的表达分别为1.317±0.115、1.112±0.223、0.871±0.105、0.593±0.065,组间比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01);PTTG蛋白表达随肿瘤病理级别的增高而增加,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05),P16蛋白表达随肿瘤病理级别的增高而降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);PT-TG与P16蛋白表达之间呈负相关(P<0.01)。结论PTTG、P16在胶质瘤的发生、发展中起重要的作用。

miR-186通过下调垂体瘤转化基因1的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖侵袭并诱导其凋亡

目的:探讨miR-186对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法:实时荧光定量PCR检测骨肉瘤细胞HOS、U2-OS、Saos-2及成骨细胞NHOst中miR-186表达,并运用人工合成的miR-186模拟片段及对照scramble mimic转染至人骨肉瘤HOS及U2-OS细胞内,运用实时荧光定量PCR检测转染后细胞中miR-186的表达水平;分别运用CCK-8法、流式细胞检测技术及Transwall体外侵袭实验检测过表达miR-186对HOS及U2-OS细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响;运用Western blotting及实时荧光定量PCR检测miR-186过表达对细胞中垂体瘤转化基因1(pituitary tumor transforming gene 1,PTTG1)的蛋白及m RNA表达水平的影响。结果:骨肉瘤细胞中miR-186呈现低表达;转染人工合成的miR-186片段可上调HOS及U2-OS细胞中miR-186的表达;miR-186过表达组细胞的增殖能力较scramble组明显下降(P<0.01),转染组HOS[(16.9±2.1)%vs(10.4±1.6)%,P<0.05]及U2-OS[(22.6±2.9)%vs(14.1±2.2)%,P<0.05]细胞的凋亡比例明显高于scramble组,转染组HOS及U2-OS细胞的穿膜数明显低于scramble组(P<0.01);转染组细胞中PTTG1的蛋白及m RNA表达水平均明显下降(P<0.01),而scramble组无明显变化(P>0.05);结论:miR-186能够抑制骨肉瘤细胞的增殖及侵袭并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PTTG1表达相关。

垂体瘤转化基因1研究进展

垂体瘤转化基因1(PTTG1),也被称为分离酶抑制蛋白基因,是近几年从大鼠垂体肿瘤中发现的癌基因。它不但可以与分离酶结合,使分离酶失活,从而抑制姐妹染色单体的分离,还具有转录激活活性。已有的染色质免疫共沉淀结合芯片数据显示,PTTG1不仅可以直接调控基因的转录,也可以与其他蛋白,如PTTG1结合因子(PBF)、p53、Sp1、上游刺激因子1(USF1)等相互作用来调控下游基因的转录。在NIH 3T3细胞中,PTTG1激活c-Myc的转录,增强NIH 3T3细胞在裸鼠体内的成瘤能力。PTTG1也能激活肿瘤细胞中成纤维细胞生长因子2(FGF2)的转录,从而促进肿瘤血管生成。PTTG1结合p53、抑制p21表达、激活周期蛋白D3的能力,提示它在凋亡、细胞周期和衰老方面也发挥作用。另外,PTTG1在肿瘤转移和肝癌的发生发展中也发挥着重要作用。我们简要综述了PTTG1的靶基因,及其在肝癌及肿瘤转移中的研究进展。

下调垂体瘤转化基因1对胶质瘤细胞SHG44血管生成拟态及细胞周期的影响

目的研究下调垂体瘤转化基因1(PTTG1)对胶质瘤细胞SHG44血管生成拟态及细胞周期的影响,探索PTTG1影响人恶性胶质瘤细胞SHG44细胞周期的可能机制。方法用PTTG1 siRNA干扰胶质瘤细胞SHG44基因表达,通过定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹分析在mRNA和蛋白质水平上评估PTTG1表达下降对AKT、p-AKT、C-myc、CyclinD1表达的影响,并进一步探究PTTG1对SHG44血管生成拟态及细胞周期的影响。结果 PTTG1 siRNA可以显著抑制PTTG1基因和蛋白的表达。降低PTTG1表达导致细胞不能形成网格状结构,即血管生成拟态形成能力受到抑制。抑制PTTG1的表达导致S期和G2期细胞百分比显著降低,即细胞增殖受到明显抑制。抑制PTTG1表达导致C-myc和CyclinD1 mRNA水平明显降低;p-AKT、C-myc和CyclinD1蛋白表达水平明显降低;说明PTTG1通过AKT/C-myc/CyclinD1信号通路影响SHG44细胞周期。结论下调PTTG1可以抑制胶质瘤的发生发展进程,为其治疗提供新思路。

垂体瘤转化基因(PTTG1)可抵抗UV诱导的细胞凋亡作用

垂体瘤转化基因(PTTG1)在很多肿瘤中呈高水平表达.越来越多的研究表明,PTTG1与细胞增殖、细胞转化有关.但PTTG1在凋亡中的作用仍不清楚.通过在细胞中下调和过表达PTTG1,观察PTTG1在UV照射诱导凋亡中的作用.结果发现,RNAi-介导下调HeLa细胞PTTG1表达可增加对UV诱导凋亡的敏感性,而过表达PTTG1则降低对UV诱导凋亡的敏感性.此外,UV照射能降低PTTG1蛋白的表达水平,并且表现为明显的剂量和时间关系.这些研究结果显示,PTTG1在UV照射诱导的凋亡中发挥重要的抗凋亡作用.这为研究PTTG1在肿瘤发生、发展中的作用机制提供了新的实验证据.

垂体瘤转化基因在多发性骨髓瘤患者中表达的研究

为了研究垂体瘤转化基因(pituitarytumor-transforminggene,PTTG)在老年多发性骨髓瘤(multiplemyelo-ma,MM)患者中的表达并分析它与MM发生的关系,采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞中PTTG的表达。结果表明MM患者PTTG在MM中的表达水平(0.3415±0.2172)明显高于正常对照组(0.0590±0.0233)(P<0.05)。结论PTTG的过度表达可能与MM的发生发展有关,这为MM的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。

垂体瘤转化基因和C-myc基因在多发性骨髓瘤中表达的研究

本研究探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)和c-myc基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中的表达并分析它们与MM发生的关系。采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常人骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中PTTG和c-myc基因的表达。结果表明:MM患者PTTG和c-myc基因的表达明显高于正常对照组(p<0.05)。PTTG基因与c-myc基因的表达呈正相关(r=0.801,p<0.05)。结论:PTTG和c-myc基因的过度表达与MM的发生发展有关。

垂体瘤转化基因在垂体细胞衰老和垂体瘤生成中机制的研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体细胞衰老和垂体瘤中表达规律。方法构建F344大鼠D-半乳糖诱导衰老模型和雌激素诱导泌乳素腺瘤模型。观察大鼠的衰老表型及成瘤情况,对大鼠垂体进行病理学检测,分子生物学方法检测垂体PTTG、P53、P21、P16蛋白表达。结果 1D-半乳糖成功诱导大鼠出现明显衰老特征,雌激素诱导大鼠成功生成泌乳素腺瘤;2衰老大鼠垂体胞质内有空泡和异染色质生成,肿瘤大鼠垂体PRL免疫组化为强阳性;3RT-PCR显示雌激素诱导组PTTG m RNA表达为(12.99±1.86),D-半乳糖诱导衰老组PTTG表达为(2.10±0.23),差异有高度统计学意义(P<0.01);D-半乳糖诱导衰老组P53、P16、P21 m RNA表达为(113.51±23.87)、(29.26±4.44)、(67.21±10.08),在雌激素诱导垂体瘤组中表达为(83.26±8.06)、(9.83±2.13)、(28.19±2.01),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4Western-blot条带积分灰度值显示D-半乳糖诱导衰老组PTTG、P21、P16蛋白表达为(0.198±0.032)、(1.239±0.051)、(1.673±0.055),雌激素诱导垂体瘤中表达为(1.002±0.041)、(0.202±0.055)、(0.409±0.059),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTTG基因过表达导致衰老绕过,垂体瘤形成。PTTG表达减弱,诱导衰老。P16、P21是垂体细胞衰老重要的调控因子。

垂体瘤转化基因在垂体大腺瘤中的表达及其与肿瘤侵袭性的关系

目的研究垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达,探讨其与肿瘤侵袭性的关系。方法收集手术和病理证实的垂体大腺瘤40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素腺瘤8例,泌乳素腺瘤10例。用免疫组化技术检测垂体大腺瘤中PTTG表达。结合影像资料,分析PTTG的表达与大腺瘤侵袭性生物学行为的关系。结果40例垂体大腺瘤中均发现PTTG的表达升高,PTTG在侵袭性垂体大腺瘤中的表达显著高于非侵袭性垂体大腺瘤(P<0.01)。结论PTTG的表达与垂体大腺瘤侵袭性的生物学行为有关,其表达程度可用作垂体大腺瘤预后的评估指标,为大腺瘤术后复发以及相应的辅助治疗提供判断依据。

siRNA介导垂体瘤转化基因沉默抑制人泌乳素型垂体瘤凋亡的研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)对人泌乳素型垂体瘤(HPA)细胞凋亡的影响。方法设计并合成针对PTTG的特异性siRNA序列,通过siPORTTM NeoFXTM转入原代培养HPA细胞,Western blot法检测siRNA作用后PTTG蛋白表达,DNA ladder和annexin V/PI染色法检测PTTG沉默对细胞凋亡的影响。结果siRNA转染组细胞内PTTG蛋白表达减弱;在CDDP诱导后,对照组和siRNA组均出现细胞凋亡,siRNA组DNA ladder形成不明显,Annexin V染色凋亡细胞数目减少,对照组细胞凋亡率为18.6%,而siRNA组仅为8.7%。结论垂体瘤转化基因对人泌乳素型垂体瘤细胞具有促进凋亡作用。

甲状腺滤泡性肿瘤中PPARγ和垂体肿瘤转化基因-1表达及意义

目的研究核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及垂体肿瘤转化基因-1(PTTG)在甲状腺滤泡性肿瘤中表达及其与病变的关系。方法应用免疫组化方法检测42例甲状腺滤泡性肿瘤(腺癌19例,腺瘤23例)标本中PPARγ及PTTG表达。结果PPARγ蛋白在腺癌与腺瘤表达差异无显著性(P>0.05),PTTG在甲状腺癌表达高于腺瘤(P<0.05)。甲状腺滤泡性癌中癌转移组与非转移组、高预后指数(≥65)组与低预后指数(<65)组的PPARγ及PTTG蛋白表达均具有统计学差异(P<0.05)。结论检测PTTG水平对于鉴别原发性甲状腺滤泡肿瘤良恶性具有重要参考意义,PPARγ及PTTG表达水平可能是判断甲状腺滤泡癌预后的观测指标。

垂体瘤转化基因在急性髓系白血病患者中表达的研究

本研究探讨垂体瘤转化基因(pituitarytumor-transforming gene,pttg)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中的表达及其与AML发生的关系,以及pttg基因在FAB亚型中的表达是否存在差异性。采用实时荧光定量PCR方法检测47例AML患者及28例正常对照者骨髓中pttg基因的表达水平。结果表明:AML患者pttg基因的表达水平[(1.1323±1.3934)×105]明显高于正常对照组[(4.5766±1.1817)×103](p<0.05),急性早幼粒细胞细胞白血病(M3)患者中pttg基因的表达水平高于其他FAB亚型,其中包括急性髓系白血病未分化型(M1)、急性粒细胞白血病部分分化型(M2)、急性粒细胞单核细胞白血病(M4)、急性单核细胞白血病(M5)。结论:pttg基因的过度表达可能与AML的发生发展有关,其中可能与M3发生的关系更加密切,本研究为AML的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。

垂体瘤转化基因在垂体大腺瘤中表达的研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达及意义。方法收集经手术和病理证实的垂体大腺瘤患者40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素(GH)腺瘤8例,泌乳素(PRL)腺瘤10例。同期经手术和病理证实的垂体微腺瘤11例为对照组,其中促肾上腺皮质激素(ACTH)腺瘤8例,PRL腺瘤3例。采用免疫组化技术(LSAB法)检测垂体大腺瘤和垂体微腺瘤中PTTG的表达水平。结合临床资料及影像学分级标准,分析PTTG表达水平与垂体大腺瘤发生机制、生物学行为之间的联系。结果40例垂体大腺瘤中均发现PTTG的表达显著高于垂体微腺瘤组(P<0.01)。在侵袭性垂体大腺瘤中,PTTG的表达显著高于非侵袭性垂体大腺瘤(P<0.01),PTTG的表达与大腺瘤向鞍上生长的高度和向海绵窦侵袭性生长的程度显著相关(P<0.05)。结论PTTG表达增高与垂体大腺瘤的生长以及肿瘤的侵袭性密切相关。PTTG的表达水平及结合影像学资料可以为患者预后及术后的辅助治疗提供可靠的判断依据。

甲状腺肿瘤中增殖细胞核抗原和垂体肿瘤转化基因-1的表达

目的研究增殖细胞核抗原(PCNA)及垂体肿瘤转化基因-1(PTTG-1)在甲状腺肿瘤中的表达及其与病变的关系。方法对87例甲状腺肿瘤(乳头状腺癌38例,滤泡性腺癌21例,未分化癌5例,腺瘤23例)分别应用免疫组织化学方法检测PCNA及PTTG-1表达情况,并对各组瘤组织进行PCNA及PTTG-1表达比较,观察PCNA与PTTG-1的相关性。结果PCNA及PTTG-1蛋白在各甲状腺肿瘤组织均存在表达,PCNA在乳头状癌、滤泡性癌及未分化癌组中表达高于腺瘤组(P<0.05,P<0.01),PTTG-1在乳头状癌、滤泡性癌组表达高于腺瘤组(P<0.01);PCNA及PTTG-1在甲状腺肿瘤表达具有正相关性(r=0.36,P<0.05)。结论PCNA及PTTG-1的表达与甲状腺肿瘤相关,PCNA及PTTG-1水平升高可能参与甲状腺恶性肿瘤病程。

前列腺癌病灶内垂体肿瘤转化基因1与增殖、侵袭基因的相关性研究

目的:研究前列腺癌病灶内垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)表达量的变化及其与增殖、侵袭基因的相关性。方法:选择在我院接受根治性手术的前列腺癌患者作为研究的恶性组并收集前列腺癌病灶,另取同期因良性前列腺增生在我院接受前列腺电切治疗的患者作为研究的良性组并收集前列腺良性病灶,测定病灶内PTTG1、增殖基因、侵袭基因的mRNA表达量。结果:恶性组患者前列腺癌病灶内PTTG1、Survivin、Bcl-2、CyclinD1、GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著高于良性组,CDKN2、p21、TFPI2的mRNA表达量显著低于良性组;高PTTG1的前列腺癌病灶内Survivin、Bcl-2、CyclinD1、GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著高于低PTTG1的前列腺癌病灶,CDKN2、p21、TFPI2的mRNA表达量显著低于低PTTG1的前列腺癌病灶。结论:前列腺癌病灶内PTTG1基因呈高表达且与增殖、侵袭基因表达的变化密切相关。