链球菌诱导外周血单个核细胞来源的树突状细胞的成熟

目的探讨链球菌抗原(SA)对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(moDCs)成熟的影响。方法体外分离外周血单个核细胞(PBMC),通过重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素4(rhIL-4)诱导moDCs。用链球菌抗原诱导其成熟,ELISA法检测培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,流式细胞技术检测moDCs表面标志CD80和CD86。结果加入链球菌抗原18h后,moDCs培养上清液的TNF-α和IL-6水平分别为(3 433±363.6)pg/mL和(1 798±49.79)pg/mL,与空白对照比较差异有统计学意义(P<0.000 1)。同时moDCs表面CD80和CD86的表达显著升高。结论链球菌抗原可以诱导人外周血单个核细胞来源的树突状细胞成熟。

菜豆凝集素对人外周血树突状细胞生长的研究

研究菜豆凝集素(PHA)对人外周血单核细胞培养而来的树突状细胞(DC)生长发育的影响。方法 用淋巴分离液分离人外周血单个核细胞,在单核细胞中再分别加入重组的人集落细胞因子(rhGM-CSF)和重组的人白细胞介素4(rhIL-4)和不同浓度的PHA进行培养。在光学显微镜下观察DC细胞的形态变化;用CCK-8检测试剂盒来测DC细胞增殖;实时荧光定量(qPCR)检测树突状细胞的CD80、CD83、CD86基因的表达水平。结果 形态学显示为成功培养出树突状细胞;CCK8法显示一定浓度的PHA能显著促进树突状细胞增殖;qPCR法显示适当PHA能促进树突状细胞CD80、CD83、CD86基因的表达。结论 适当PHA能有效促进人外周血单核细胞来源的树突状细胞的增殖和成熟度。

MUC1/Y基因修饰的树突状细胞体外抗卵巢癌效应的研究

目的研究人MUC1/Y基因转染人外周血树突状细胞(DC)后在体外诱导的特异性抗MUC1/Y+卵巢癌效应。方法通过人外周血单核细胞诱导DC,采用脂质体法将已构建好的含人MUC1/Y全长cDNA的真核表达载体pEGFPN1/MUC1/Y转染到DC中,荧光显微镜下观察其表达的蛋白定位;与自体T细胞共培养,观察其致敏的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MUC1/Y+的卵巢癌细胞A2780的杀伤活性,并与转染空载体的DC诱导的CTL进行比较。结果pEGFPN1/MUC1/Y转染DC后,其绿色荧光蛋白主要表达于DC细胞膜上,可诱导出对卵巢癌细胞系A2780特异性的细胞毒性T细胞。结论MUC1/Y基因修饰的DC可诱导特异的抗MUC1/Y+卵巢癌效应。